果布次仁，卓 瑪

（1.貢覺(jué)縣哈加鄉(xiāng)農(nóng)牧綜合服務(wù)中心，西藏 昌都 854200；2.貢覺(jué)縣農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)快檢室，西藏 昌都 854200）

瘦肉精是一類動(dòng)物用藥的統(tǒng)稱，能夠促進(jìn)瘦肉生長(zhǎng)［1］，抑制動(dòng)物脂肪生長(zhǎng)的物質(zhì)。瘦肉精是一種人工合成的興奮劑，添加于飼料中飼喂牲畜能顯著提高瘦肉率，促進(jìn)肌肉生長(zhǎng)，人食用含有瘦肉精殘留的肉，可引起血壓升高、血管擴(kuò)張、心跳加快，呼吸加重、產(chǎn)生惡心、嘔吐、頭暈、乏力和肌肉顫抖甚至不能站立等癥狀［2］，給人類的精神、健康及正常生活造成嚴(yán)重危害。筆者采用膠體金免疫層析技術(shù)和固相萃取技術(shù)對(duì)西藏貢覺(jué)縣阿旺綿羊肉、牛肉、豬肉是否存在瘦肉精情況進(jìn)行試驗(yàn)檢測(cè)并對(duì)結(jié)果判定方法進(jìn)行研究［3］，整個(gè)過(guò)程分為樣品前處理、萃取和檢測(cè)3 個(gè)部分，一次樣品前處理可以用于克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇共3 種藥物的檢測(cè)［4］。本技術(shù)適用于豬肉、雞肉、鴨肉、鵝肉、牛肉等組織的現(xiàn)場(chǎng)或?qū)嶒?yàn)室快速檢測(cè)。單個(gè)項(xiàng)目檢測(cè)時(shí)間約為20～25 min［5-6］。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

牛肉、羊肉、豬肉（采集點(diǎn)：貢覺(jué)縣農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)）

1.2 儀器及主要試劑

1.2.1 儀器設(shè)備

食品安全快速檢測(cè)儀YR600plus（深圳市易瑞生物技術(shù)股份有限公司、中國(guó)）、廢液收集缸、測(cè)試液收集架、2 mL離心管、離心機(jī)（4000 r/min）、50 mL離心管、30 mL 注射器、檢測(cè)試紙條、電子秤、水果刀。

1.2.2 主要試劑

T-AG 試劑A、乙酸乙酯試劑、T-AG 試劑C、紅色微孔試劑。

1.3 樣品分析

1.3.1 樣品前處理

組織樣品去皮、均質(zhì)，稱?。?±0.2）g 均質(zhì)好的組織樣品至50 mL 離心管中；加入5 mLT-AG 試劑A，將離心管上下大力搖晃60 s 至組織分散；加入10 mL 乙酸乙酯，渦動(dòng)或搖晃約60 s ，室溫，4000 r/min 離心2 min；從包裝內(nèi)取出所需的固相萃取柱和30 mL 的注射器，去掉螺口注射器內(nèi)塞并將注射器下端插入固相萃取柱；將50 mL 離心管內(nèi)的上清液倒入注射器內(nèi)，注射器內(nèi)塞插入注射器內(nèi)，注射器內(nèi)的液體通過(guò)固相萃取柱推入廢液收集缸，直至注射器和固相萃取注中無(wú)液體；液體全部流出后，拔出注射器，將固相萃取柱放到2 mL 的離心管上；往固相萃取柱中加入800 μL 的試劑C；用新的注射器將固相萃取柱中的液體推入2 mL 的離心管中，離心管中的液體為待測(cè)液。

1.3.2 樣品檢測(cè)

取出相應(yīng)數(shù)量的紅色微孔試劑，吸取150 μL上述待測(cè)液于紅色試劑微孔中，上下抽取6～10 次直至微孔試劑混合均勻；40 ℃開(kāi)始第一步溫育反應(yīng)，并計(jì)時(shí)3 min；取出試紙筒中的試紙條，將試紙條插入上述紅色微孔中，40 ℃開(kāi)始第二步反應(yīng)，并計(jì)時(shí)3 min；取出試紙條，輕輕刮去試紙條下端的樣品墊，并于5 min 內(nèi)進(jìn)行結(jié)果判讀，超過(guò)5 min 后無(wú)效。用試劑盒檢測(cè)肉類中克倫特羅、萊克多巴胺等瘦肉精試紙條灰度限值見(jiàn)表1。

表1 肉類中試紙條檢測(cè)瘦肉精灰度值限值

1.4 結(jié)果判定

1.4.1 目測(cè)

產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果在陰性情況下T 線灰度≥C 線灰度，即未檢出瘦肉精；在陽(yáng)性的情況下T 線灰度

1.4.2 系統(tǒng)讀數(shù)

輕輕刮去試紙條下端的樣品墊后，將試紙條放入檢測(cè)孔，通過(guò)系統(tǒng)自動(dòng)對(duì)T線和C線的灰度進(jìn)行讀數(shù)后，得出T線和C線的灰度值，按照最終T/C值≥1.0判定為陰性，最終T/C 值<1.0 判定為陽(yáng)性，C 線不顯色或T線和C線均不顯色時(shí)檢測(cè)結(jié)果判定為無(wú)效。

2 結(jié)果與分析

根據(jù)表2 系統(tǒng)讀數(shù)結(jié)果，阿旺綿羊肉中克倫特羅、沙丁胺醇和萊克多巴胺的試紙條灰度值中T>C且最終T/C 值>1.0，很容易判定快速檢測(cè)結(jié)果為陰性。

表2 阿旺綿羊肉檢測(cè)系統(tǒng)讀數(shù)結(jié)果

根據(jù)表3、表4 系統(tǒng)讀數(shù)結(jié)果，克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺的T 線灰度值大于C 線灰度值，判定結(jié)果為陰性。

表3 貢覺(jué)縣本地牛肉檢測(cè)結(jié)果

表4 豬肉檢測(cè)結(jié)果

根據(jù)表2、表3、表4檢測(cè)結(jié)果可知，對(duì)肉類樣品檢測(cè)瘦肉精時(shí)，為確保檢測(cè)結(jié)果判定的準(zhǔn)確率，試紙條應(yīng)放入食品快速檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)孔，對(duì)試紙條的灰度自動(dòng)讀數(shù)。

3 討論

采用試紙條檢測(cè)肉類樣品中的瘦肉精時(shí)，可以根據(jù)目測(cè)試紙條中的T 線和C 線判斷結(jié)果，但是檢測(cè)結(jié)果中T 線和C 線的灰度值大體相同時(shí)，目測(cè)無(wú)法準(zhǔn)確判斷結(jié)果，所以在檢測(cè)牛肉、羊肉、豬肉等禽畜肉中鹽酸克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺等瘦肉精時(shí)，第二步溫育結(jié)束后試紙條應(yīng)放入食品安全檢測(cè)儀中對(duì)T 線和C 線灰度進(jìn)行讀數(shù)，確保檢測(cè)結(jié)果判斷準(zhǔn)確。