姜良龍，張 哲，王 臻，杜榮斌，欒順香，吳艷慶，劉立明

( 1.煙臺大學 海洋學院，山東 煙臺 264005； 2.萊州順昌水產(chǎn)有限公司，山東 煙臺 261441； 3.中國水產(chǎn)科學研究院 東海水產(chǎn)研究所，上海 200090 )

綠鰭馬面鲀(Thamnaconusseptentrionalis)屬鲀形目、單角鲀科、馬面鲀屬[1]，俗稱扒皮狼、剝皮魚、馬面魚等，為暖水性近底層魚類，廣泛分布于我國沿海，朝鮮和日本九州、北海道海域[2]，產(chǎn)黏性卵，卵巢非同步發(fā)育，屬分批產(chǎn)卵型，產(chǎn)卵期一般在春末5—7月[3]。20世紀60—80年代，綠鰭馬面鲀作為我國主要經(jīng)濟魚類，年漁獲量僅次于帶魚(Trichiurus)。20世紀90年代以來，由于過度捕撈，其資源量及年產(chǎn)量急劇下降[4]，市場價格一路走俏，現(xiàn)已成為極具開發(fā)潛力且值得推廣的優(yōu)良養(yǎng)殖品種。

目前，針對綠鰭馬面鲀的研究，主要見于胚胎發(fā)育、仔稚魚生長發(fā)育、攝食及早期生物學特性等方面[5-8]，人工增養(yǎng)殖研究尚處摸索階段，溫海深等[9]對野生綠鰭馬面鲀的人工馴養(yǎng)、生殖調(diào)控等做了初步研究，李平倫等[10-11]對其海上網(wǎng)箱養(yǎng)殖做過介紹?，F(xiàn)階段綠鰭馬面鲀苗種繁育尚無成熟的模式，苗種早期階段成活率極低，尚無法進行大規(guī)模繁育，養(yǎng)殖苗種來源仍以少量野生苗為主，主要原因在于，制約其早期階段成活率的苗種繁育關鍵技術尚未突破。筆者于2018—2019年進行了一次工廠化早繁育苗試驗，基于對其早期階段生物學特性的研究，總結(jié)了綠鰭馬面鲀規(guī)?；绶N早繁培育的關鍵技術，以期為工廠化育苗提供參考。

1 材料與方法

1.1 育苗設施

育苗試驗在萊州順昌水產(chǎn)有限公司進行，育苗廠位于萊州灣海區(qū)，配備有水泵房、蓄水沉淀池、玻璃鋼無閥濾罐、砂濾池、燃油鍋爐、鈦合金板式換熱器、SWR-175型三葉羅茨鼓風機、變配電室等供水、供熱、供氣及供電系統(tǒng)。采用該廠育苗車間37口6.0 m×5.0 m×1.0 m的八角形室內(nèi)水泥池作為育苗池，2口同規(guī)格水泥池作為親魚培育和產(chǎn)卵池，2池輪換使用。車間遮光，用20 W LED燈泡調(diào)節(jié)光照度及光周期。小球藻(Chlorellavulgaris)培養(yǎng)池為15口5.0 m×4.0 m×1.0 m長方形水泥池。輪蟲培養(yǎng)池為3口5.0 m×4.0 m×1.0 m長方形水泥池，鹵蟲(Artemia)暫養(yǎng)池為1口5.0 m×4.0 m×1.0 m長方形水泥池。受精卵附著基為焊接的金屬框架加裝60目聚乙烯網(wǎng)的組合網(wǎng)板(圖1)，每組投放10塊，可恰好覆蓋親魚池底，共準備3組，每收卵1～2 d更換1次。此外，育苗車間還設有12個0.9 m3鹵蟲孵化桶，4個0.9 m3輪蟲、鹵蟲強化桶。育苗用水為經(jīng)過沉淀和二級砂濾處理的自然海水。用便攜式水質(zhì)檢測儀(衡欣，86031型)測定育苗池的水溫、鹽度、溶解氧和pH。

1.2 親魚馴養(yǎng)及促熟培育

試驗用親魚為海捕3齡以上成魚，2018年秋季開始在室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中馴化并越冬，越冬期水溫12.2～16.2 ℃，每日水循環(huán)量3～5個量程，每日按親魚體質(zhì)量的3%～4%投喂冰鮮小蝦，每周停餌1次。2019年2月初開始，水溫由12.8 ℃逐漸升至16 ℃，性腺發(fā)育至Ⅲ期后進行促熟培育，每日升溫0.5～1.0 ℃，升至19～22 ℃時待產(chǎn)，每日投喂新鮮貽貝肉及牡蠣肉，搭配活沙蠶，并添加少量維生素E。

1.3 受精卵的采集

主要采用親魚原池自然產(chǎn)卵投板法采集受精卵。親魚通常在下午至夜間產(chǎn)卵，午后將聚乙烯組合網(wǎng)板平鋪于親魚池底部，用石塊壓好，放置過夜。觀察親魚腹部隆起情況，在親魚接近產(chǎn)卵前，分散放置幾塊波紋板于親魚池底部，每1 h觀察波紋板上是否有卵子附著。通過觀察波紋板上卵子數(shù)量變化，以及雌雄魚是否出現(xiàn)發(fā)情追逐、游動暫停等現(xiàn)象，確定親魚產(chǎn)卵時間。

另外嘗試排水口推底采卵法，即親魚池不投放采卵網(wǎng)板，魚卵直接產(chǎn)于池底，以軟毛刷推底，同時用60目網(wǎng)袋在魚池排水口處集卵。

1.4 受精卵的孵化

次日早晨，若親魚大量產(chǎn)卵，將聚乙烯網(wǎng)板和波紋板取出，操作過程中緩慢傾斜網(wǎng)板，輕輕沖洗掉網(wǎng)板上的殘餌糞便，而后放入育苗池中孵化，并連續(xù)取樣觀察胚胎發(fā)育情況。育苗池中央排水管裝60目網(wǎng)套，入池水溫控制在19.5～20.5 ℃，與親魚池水溫相差不超過0.5 ℃，而后緩慢升至22.0～23.5 ℃。入池水位30 cm，加大換水量和充氣量24 h后將水位升至45 cm，而后保持微流水、微充氣。3 d后取出聚乙烯網(wǎng)板，操作時先將網(wǎng)板緩慢立起，而后由育苗池中豎直取出，以防仔魚附于網(wǎng)上，仔魚孵出后留在原池培育，仔魚孵出當日，用直徑50 mm的聚氯乙烯管在池中多點取樣，定量測定每池初孵仔魚數(shù)量。試驗期間每日布一個育苗池，直至親魚產(chǎn)卵期結(jié)束。

試驗期間進行聚乙烯網(wǎng)板集卵法和排水口推底集卵法的孵化試驗，每種集卵方法設3個平行試驗組，每組卵子300個，置于相同條件下孵化，比較2種集卵方法孵化率的差異情況。

1.5 苗種培育

1.5.1 培育環(huán)境與管理

育苗池水溫19.4～24.5 ℃，平均22.1 ℃，鹽度33，pH 7.9～8.3。仔魚0～7日齡，保持微流水，微充氣，保證育苗水體溫度恒定。7日齡后，充氣量隨魚苗生長漸增。仔魚8～25日齡，水流量逐漸增加，每日0.5～1.5個量程。26～35日齡，去掉進水口濾水網(wǎng)袋，安裝直徑20 mm 聚氯乙烯細管，使苗池水體微微轉(zhuǎn)動，日水流量1.5～3.0個量程，中央排水篩管更換為40目網(wǎng)套。夜間排水適當減量，早晨投喂鹵蟲無節(jié)幼體前排水15 cm，投餌后將水位提至60 cm。36～40日齡，進水口更換為直徑50 mm 聚氯乙烯鴨嘴噴管，加大水流量，使苗池水體轉(zhuǎn)動，日水流量3～4個量程，中央篩管套20目網(wǎng)套。40日齡后，撤去中央篩管網(wǎng)套，中央篩管孔徑為2.5 mm，日水流量4～6個量程。10日齡后開始清底，10～23日齡隔日清底1次，23日齡后每日清底1次，吸污時用餌料引誘魚苗，使其遠離吸污器，避免對魚苗造成損傷。

1.5.2 投餌

育苗餌料系列為S型輪蟲→L型輪蟲→鹵蟲無節(jié)幼體→鹵蟲成體→配合餌料(圖2)。

圖2 綠鰭馬面鲀?nèi)斯び琊D料系列Fig.2 The food series of drab filefish T. septentrionalis in artificial seedling production

仔魚3日齡開始投餌，開口餌料為S型褶皺臂尾輪蟲(Brachionusplicatilis)，日投喂2～6次，保持池中輪蟲密度約0.5～1.0個/mL。第7～20日齡日投喂L型輪蟲2～3次，每次投喂密度約為10～20個/mL。18～34日齡投喂鹵蟲無節(jié)幼體，日投喂3～5次，投喂量視魚苗消化道充塞度及育苗池中餌料生物數(shù)量而定。28～37日齡投喂鹵蟲成體，早晚各1次。30日齡后開始馴化投喂顆粒配合飼料(海童牌，三通生物工程有限公司)，初始采用少量多次的投餌方法，馴化成功后每日投喂4～6次。輪蟲和鹵蟲投喂前經(jīng)裂壺藻(Schizochytriumlimacinum)營養(yǎng)強化6～12 h。投喂輪蟲期間向育苗池中添加小球藻液，密度為30萬～50萬個/mL，使水體保持微綠色。

1.5.3 分苗與倒池

仔魚發(fā)育至20～30日齡時分苗，生長均勻的苗池可直接采用虹吸法稀疏密度，大小分化嚴重的苗池進行規(guī)格分選，分池培育，每20～40 d倒池1次。分選時用不銹鋼撈網(wǎng)，以免掛住仔魚的背鰭或腹鰭棘刺。魚苗培育至全長5 cm時達到出池規(guī)格，每次倒池或出池時計數(shù)。

1.5.4 水質(zhì)調(diào)控及病害防治

輪蟲和鹵蟲無節(jié)幼體營養(yǎng)強化時加10 mg/L鹽酸土霉素抑菌，投喂前用50 mg/L甲醛浸泡處理20 min，鹵蟲成體經(jīng)50 mg/L甲醛和2 mg/L醋酸銅溶液浸泡處理20 min后洗凈投喂。每日向育苗水體中添加10～20 mg/L光合細菌以調(diào)節(jié)水質(zhì)。

1.5.5 胚胎及魚苗生物學觀測

選取3個育苗池進行定量研究，胚胎期進行連續(xù)觀察，仔稚魚期每2～3 d隨機取30尾魚苗，間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽40 mg/L麻醉后觀測。樣品置于解剖鏡(桂光GL-6745T)下，觀察測定胚胎及魚苗的生長發(fā)育變化。胚胎與30日齡前魚苗用解剖鏡所聯(lián)電荷耦合元件(CCD)相機拍照，30日齡后魚苗用數(shù)碼相機(FUJIFILM X-A10)拍照，用解剖鏡聯(lián)機軟件(S-EYE 2.0)測量魚苗全長。試驗期間隨時觀察育苗池內(nèi)仔稚魚攝食與生活習性變化。

1.5.6 數(shù)據(jù)處理與分析

胚胎孵化率和魚苗全長用平均數(shù)±標準差表示。采用SPSS 23.0軟件進行獨立樣本t檢驗，比較2種集卵方法孵化率差異的顯著性，P<0.05表示差異顯著。用Origin 9.1作親魚培育水溫變化圖及魚苗全長變化圖，用Adobe photoshop 3.0進行胚胎及魚苗“臨界期”圖片的處理。

2 結(jié) 果

2.1 親魚繁殖與早期胚胎發(fā)育

自2018年11月開始，對所獲220尾親魚進行人工馴化與越冬培育，2019年2月上旬，開始采用控溫與餌料營養(yǎng)強化等人工促熟技術，實現(xiàn)親魚自然產(chǎn)卵受精，親魚培育水溫見圖3。親魚自3月底開始少量產(chǎn)卵，4月中旬至5月中旬，水溫在19.5～22.0 ℃時，親魚達到產(chǎn)卵高峰期，高峰期持續(xù)時間超過20 d，6月上旬，水溫24.0 ℃時，親魚產(chǎn)卵結(jié)束。親魚繁殖期比自然海區(qū)提前約2個月，共獲初孵仔魚約332萬尾。

綠鰭馬面鲀卵子為黏性卵，初產(chǎn)卵子黏性極強，卵內(nèi)有多個大小不等的油球。試驗測得受精卵在水溫(22.5±1.5) ℃、鹽度31～33、溶解氧>5 mg/L、pH 7.9～8.3條件下，經(jīng)46～48 h后孵出，胚胎發(fā)育過程見表1和圖4。試驗共獲得初孵仔魚約332萬尾，聚乙烯網(wǎng)板集卵法平均孵化率為(71.0±6.2)%，顯著高于推底排水口集卵法[(60.1±6.7)%](P<0.05)(表2)。

表2 2種集卵方法孵化率比較

圖4 綠鰭馬面鲀的胚胎發(fā)育Fig.4 Embryonic development of drab filefish T. septentrionalisa.卵膜舉起; b.胚盤形成; c.卵裂開始; d.2細胞; e.4細胞; f.8細胞; g.16細胞; h.32細胞; i.64細胞; j.桑葚胚; k.高囊胚; l.低囊胚; m.原腸早期; n.原腸中期; o.原腸末期; p.神經(jīng)胚; q.胚孔封閉; r.眼泡形成; s.肌節(jié)形成; t.柯氏囊期; u.尾芽出現(xiàn); v.晶體形成; w.肌肉效應; x.孵化出膜; y.初孵仔魚.a.membrane lift; b.blastodisc formation; c.cleavage initiation; d.2-cell; e.4-cell; f.8-cell; g.16-cell; h.32-cell; i.64-cell; j.morula; k.high blastula; l.low blastula; m.early gastrula; n.middle gastrula; o.late gastrula; p.neurula; q.blastopore closed; r.formation of optic vesicle; s.formation of saromere; t.Kupffer′s vesicle; u.formation of tail bud; v.formation of eye len; w.muscular contraction; x.hatching; y.newly hatched larva.

2.2 仔、稚、幼魚的生物學特性變化

在水溫21.5～24.0 ℃條件下，綠鰭馬面鲀?nèi)L的生長變化見圖5。對3口育苗池的觀察和定量研究表明，初孵仔魚全長(2.09±0.07) mm，體長(1.97±0.06) mm，總高(0.46±0.05) mm，體內(nèi)殘存大量卵黃囊，油球清晰可見。魚體透明，無色素分布，鰭膜薄，尾部彎曲，孵出約5 min后身體完全伸直，此時仔魚尚未開口，腸道末段直腸已分化，消化道尚未彎曲。仔魚均勻分布于池中，呈間歇性平游。1～3日齡，全長(2.30±0.05)～(2.50±0.08) mm，仔魚卵黃囊及油球逐步縮小，游泳能力增強。3日齡，仔魚口裂初步形成，消化道形成一個彎曲，并逐漸加粗，可以攝食少量輪蟲，但消化能力較弱，鏡檢發(fā)現(xiàn)其消化道內(nèi)存在少量呈活體狀態(tài)的輪蟲。4日齡，全長(2.55±0.07) mm，仔魚卵黃囊吸收殆盡，仔魚油球消失，背鰭棘刺雛形出現(xiàn)，體內(nèi)鰾原基出現(xiàn)，仔魚口裂增大，攝食輪蟲量增大。6～7日齡，全長(2.68±0.19)～(2.72±0.10) mm，體表色素加深，背鰭棘刺明顯，鰾器官充氣，仔魚開始集群并表現(xiàn)出趨光性。8～18日齡，(2.96±0.17)～(5.72±0.48) mm，仔魚生長加快，體表色素分布廣泛，體色加深，以燒杯取樣觀察，可見生長發(fā)育良好、活力強的魚苗觸底明顯。18～20日齡，全長(5.72±0.48)～(7.43±0.80) mm，仔魚體表出現(xiàn)絨毛狀鱗片分化。仔魚生長速率加快，個體間開始出現(xiàn)大小分化。仔魚消化和攝食能力增強，可以攝食少量鹵蟲無節(jié)幼體。20～28日齡，全長(7.43±0.80)～(17.28±3.40) mm，仔魚保持快速生長，游泳能力顯著增強，出現(xiàn)集群逆水游動的習性。仔魚攝食成功率高，食量顯著增大，28日齡左右可攝食鹵蟲成體。32日齡，全長(19.67±4.61) mm，仔魚外形接近成魚，可大量攝食鹵蟲成體，部分魚苗可少量攝食人工配合餌料，魚苗間開始出現(xiàn)殘食。40日齡，全長(38.83±3.28) mm，多數(shù)魚苗的形態(tài)已與成魚相似，全身被鱗，反應迅速，可大量攝食人工配合餌料，魚苗間殘食嚴重。40日齡以后，若魚苗生長發(fā)育整齊，水環(huán)境穩(wěn)定，無病原感染，一般不會出現(xiàn)大量死亡。

圖5 綠鰭馬面鲀早期階段的生長Fig.5 The growth of drab filefish T. septentrionalis during the early life stages

2.3 仔、稚魚的“臨界期”

試驗結(jié)果顯示，綠鰭馬面鲀早期階段存在“開口期”、“開鰾期”、“輪蟲—鹵蟲幼體轉(zhuǎn)換期”、“斷活餌期”(魚苗食性由生物餌料向配合餌料轉(zhuǎn)換期)4個“臨界期”(圖6)。仔魚開口期前后(3～4日齡)會出現(xiàn)明顯死亡，此為第1“臨界期”；仔魚“開鰾期”(6～9日齡)極易出現(xiàn)大量死亡，死亡率有時高達90%以上，此為第2“臨界期”；仔魚由攝食輪蟲到攝食鹵蟲幼體過渡階段(18～20日齡)會出現(xiàn)部分死亡，魚苗表現(xiàn)為空胃，漂浮于水面上，游動無力、側(cè)翻或集群打旋，此為第3“臨界期”；稚魚“斷活餌期”，即由攝食鹵蟲等鮮活餌料向攝食人工配合餌料的轉(zhuǎn)換期，此時魚苗易出現(xiàn)相互殘食，表現(xiàn)為大苗攻擊啄食小苗的眼睛等部位，而且此時苗種極易感染淀粉卵渦鞭蟲(Amyloodiniumocellatum)等寄生蟲病原而大量死亡，此為第4“臨界期”。

圖6 綠鰭馬面鲀“臨界期”的形態(tài)Fig.6 The morphology of drab filefish T. septentrionalis in the “critical period”a.3日齡，全長(2.50±0.10) mm; b.8日齡，全長(2.96±0.17) mm; c.20日齡，全長(7.43±0.80) mm; d.40日齡，全長(38.83±3.28) mm. 比例尺=1 mm.a.3 dph (day post hatching), TL(2.50±0.10) mm; b.8 dph, TL(2.96±0.17) mm; c.20 dph, TL(7.43±0.80) mm; d.40 dph, TL(38.83±3.28) mm; TL.total length； scale=1 mm.

2.4 苗種培育結(jié)果

共布池初孵仔魚約332萬尾，經(jīng)60 d育苗生產(chǎn)，共培育出苗種41.7萬尾，育苗總成活率12.6%。其中全長2～3 cm苗種13.7萬尾，3～5 cm苗種20.0萬尾，5～8 cm苗種8.0萬尾(表3)。苗種培育后期由于部分育苗池感染淀粉卵渦鞭蟲導致苗種大量死亡，個別池最終成活率低于10%。

表3 綠鰭馬面鲀育苗結(jié)果

3 討 論

3.1 親魚馴養(yǎng)與促熟產(chǎn)卵

對野生綠鰭馬面鲀親魚進行人工馴養(yǎng)的目的，是使其能夠逐漸適應人工養(yǎng)殖環(huán)境，在池養(yǎng)條件下開始攝食，并且性腺能夠正常發(fā)育成熟。在自然海域中，綠鰭馬面鲀的生活適宜溫度13～25 ℃，越冬適溫13～15 ℃，適宜鹽度33.5～35.0[12]，是一種雜食性魚類，主要以底棲貝類為食，兼食珊瑚和軟體動物[13]。以往生產(chǎn)實踐證明，在室內(nèi)水泥池循環(huán)水養(yǎng)殖條件下，投喂冰鮮小蝦，控制水溫11～16 ℃，經(jīng)半年左右的人工馴養(yǎng)可使綠鰭馬面鲀完全適應室內(nèi)養(yǎng)殖環(huán)境。

親魚培育水溫對其產(chǎn)卵期、產(chǎn)卵量的影響尤為顯著[14-15]。綠鰭馬面鲀在一個繁殖周期內(nèi)，首先需經(jīng)歷低溫期，性腺才能發(fā)育成熟，本試驗在越冬期將親魚培育水溫降至最低(12～13 ℃)，于2月初開始升溫，繁殖期比自然海域提前約2個月。若想更早繁殖，可進一步提早親魚培育水溫的調(diào)控時間。此外，在升溫促熟過程中發(fā)現(xiàn)，水溫高于21 ℃時，親魚性成熟變慢，逐步降溫至19～20 ℃時，親魚順利成熟產(chǎn)卵，因此，促熟期親魚培育水溫不宜超過21 ℃，否則易導致性腺退化。

親魚促熟除通過升溫來實現(xiàn)，還可采用營養(yǎng)強化、光周期調(diào)控、注射催產(chǎn)劑等措施[16-20]，人工注射催產(chǎn)劑通常被認為是簡單有效的促熟方式，可以同步獲得足量受精卵，解決雌雄魚發(fā)育不同步、后期雄魚精液不足所帶來的魚卵孵化率低等問題。本試驗中，筆者也曾嘗試通過注射催產(chǎn)劑、人工擠卵受精的方式獲得受精卵，但未取得理想效果。主要原因在于：(1)催產(chǎn)劑注射劑量尚未確定；(2)綠鰭馬面鲀肝臟大，覆蓋于性腺之上，外皮粗糙且厚，擠卵時很難準確感覺到卵巢的位置及其內(nèi)部卵子的流動，給擠卵操作帶來困難。

3.2 分苗

苗種培育過程中，定期分苗是重要的技術環(huán)節(jié)。在多數(shù)魚類人工育苗階段，尤其是肉食性魚類，普遍存在同類殘食的行為，為早期育苗過程中苗種存活率及商品魚苗品質(zhì)的重要影響因素之一[21]，如花鱸(Lateolabraxmaculatus)[22]和紅鰭東方鲀(Takifugurubriges)[23]等魚類均有此行為。綠鰭馬面鲀魚苗在22～28日齡期間，伴隨著仔魚開始大量攝食鹵蟲無節(jié)幼體，生長高峰期出現(xiàn)，表現(xiàn)出明顯的大小差異，并有大殘食小現(xiàn)象發(fā)生。此時需及時根據(jù)苗種規(guī)格進行分池，將育苗池中個體較大的魚苗挑出，集中放至新育苗池中培育，同時對苗種密度過高的育苗池進行分池稀疏，避免苗種間的規(guī)格差異及種內(nèi)殘食。通常大魚苗喜歡攻擊啄食小魚苗的眼睛、尾鰭下部或腹部兩側(cè)，造成大量小魚苗受傷死亡，使后期培育難以順利進行。

3.3 餌料投喂

魚苗的最終成活率與餌料投喂密切相關，綠鰭馬面鲀仔魚口裂極小，3日齡仔魚口裂僅為0.15 mm，因此，開口餌料的選擇是決定仔魚能否安全度過第1個“臨界期”(0～3日齡)的重要因素。有研究人員曾選擇長牡蠣(Crassostreagigas)卵或幼體作為仔魚的開口餌料，培育過程中發(fā)現(xiàn)，若投喂未受精的長牡蠣卵，卵粒會很快下沉，仔魚難以攝食到。此外，長牡蠣受精卵胚胎發(fā)育約24 h便會形成具幾丁質(zhì)殼的D形幼蟲，仔魚難以消化，且餌料營養(yǎng)價值大大降低，嚴重制約仔魚的成活率。定量研究發(fā)現(xiàn)，若用小型褶皺臂尾輪蟲(S型輪蟲)作為開口餌料，仔魚4日齡的攝食發(fā)生率可達70%以上，同時可避免投喂長牡蠣受精卵所帶來的水質(zhì)敗壞問題。

饑餓作為一種異常的攝食生理狀態(tài)，被大多數(shù)人認為是導致早期階段仔魚大量死亡的主要原因。Blaxter等[24]1963年提出不可逆點的概念，指的是仔魚耐受饑餓時長的臨界點，抵達該臨界點的饑餓狀態(tài)下的仔魚，盡管仍然可以生存一段時間，但50%的個體已經(jīng)到達一種虛弱、沒有能力恢復正常攝食的狀態(tài)。因此，在苗種培育過程中應密切關注仔魚的發(fā)育情況，及時進行第1次投餌，保證仔魚順利度過“開口期”。仔魚開鰾期(6～9日齡)是第2個“臨界期”，極易出現(xiàn)大量死亡，此時要及時進行餌料轉(zhuǎn)換，一般仔魚開口后投喂S型輪蟲3～4 d，6～7日齡即可開始增加投喂L型輪蟲，并做好輪蟲的營養(yǎng)強化，以保證仔魚開鰾期的營養(yǎng)需求。仔魚在“輪蟲—鹵蟲食性轉(zhuǎn)換期”前后(20～25日齡)，生長速度明顯加快，常會出現(xiàn)營養(yǎng)不足的現(xiàn)象，這在夜間表現(xiàn)尤為明顯，清晨有時會發(fā)現(xiàn)仔魚大量死亡。此時可在黎明前后或夜間增加投餌1次，保證仔魚攝入足夠的營養(yǎng)以度過第3個“臨界期”。為保證稚魚順利度過第4個“臨界期”——“斷活餌期”，30日齡即可開始少量投喂配合餌料，稚魚最初接受程度不高，易形成殘餌沉積，引起水質(zhì)敗壞，導致仔魚感染細菌性疾病，因此應進行少量多次的投餌馴化，同時減少鹵蟲幼體的投喂量，增加投喂鹵蟲成體，使魚苗減少殘食，順利轉(zhuǎn)換配合餌料。

3.4 水環(huán)境管理

水環(huán)境是影響魚苗成活率的關鍵因素之一[25-28]。試驗過程中發(fā)現(xiàn)，控制育苗池水溫20 ℃，晝夜溫差小于0.5 ℃，微流水，會顯著提高仔魚“開口期”以前(0～3日齡)的成活率。仔魚“開鰾期”前后(6～9日齡)，游泳器官尚未分化，鰭膜嫩弱，且伴隨著鰾器官的劇烈變化，此時仔魚對水環(huán)境變化極為敏感，若培育水溫高于23 ℃，充氣量、換水量過大，會導致仔魚“開鰾期”成活率顯著降低。因此，在仔魚10日齡之前，應保持水環(huán)境穩(wěn)定，培育水溫應以19.5～21.0 ℃為佳，控制育苗池微流水、微充氣，使魚苗平穩(wěn)度過前2個“臨界期”。魚苗進入“輪蟲—鹵蟲食性轉(zhuǎn)換期”后(18～20日齡)，攝食量增加，代謝廢物增多，增加水流量，以每日1.0～1.5個量程為宜，但水流不宜過大，否則會導致部分體弱的仔魚在排水口處旋轉(zhuǎn)集群，繼而死亡。排水量的增大，易造成餌料流失，可在投喂鹵蟲無節(jié)幼體前降低水位10～15 cm，投餌后再隨水流緩慢升起。魚苗進入“斷活餌期”(35～40日齡)后，尤其是配合餌料馴化前期，魚苗的排泄和殘餌的分解，使得水中氨氮等代謝廢物急劇增加，此時應增加水流量到每日3～4個量程，并及時清底，保持水環(huán)境良好，使魚苗平穩(wěn)度過“斷活餌期”。在苗種培育后期，水溫應逐漸升高，以21～24 ℃為宜。

3.5 育苗期的主要病害及防治

3.5.1 淀粉卵渦鞭蟲病

淀粉卵渦鞭蟲病又名淀粉卵甲藻病，主要寄生于綠鰭馬面鲀的體表，尤其是鰓部。淀粉卵渦鞭蟲附著于魚體鰓部，致使魚苗呼吸困難，最終缺氧而死。該病的病原體通常是由橈足類活餌及養(yǎng)殖水源帶到育苗池內(nèi)。該病具有發(fā)病快、致死率高、傳染性強的特征，被感染的魚苗24 h內(nèi)死亡率逾90%，通常表現(xiàn)為停止攝食、側(cè)翻、竄動等。鏡檢可發(fā)現(xiàn)仔魚鰓絲附著有大量圓點狀淀粉卵渦鞭蟲營養(yǎng)體，腸道內(nèi)無餌料。由于淀粉卵渦鞭蟲的生活史包含營養(yǎng)體、渦孢子、包囊3個階段[29]，很難有藥物可以同時殺死這3種狀態(tài)下的病原體，致使該病的徹底治療十分困難。在以往的養(yǎng)殖生產(chǎn)中，通常采用硫酸銅溶液全池潑灑的方法治療該病，但療效并不明顯。本試驗結(jié)果顯示，對于染病初期的小個體綠鰭馬面鲀仔魚(全長1.5～2.0 cm)，先用50 mg/L甲醛或1 mg/L二氧化氯溶液藥浴0.5～1.0 h后，加大換水量，再用0.5～1.0 mg/L醋酸銅溶液藥浴1～2 h，有一定的療效。當后期苗種全長超過3 cm時，藥浴醋酸銅質(zhì)量濃度可增加至2～4 mg/L。此外，增大充氣量或向池中添加50～100 mg/L雙氧水可緩解魚苗染病所導致的缺氧。

3.5.2 細菌性腸炎病

細菌性腸炎病多發(fā)于投喂人工配合餌料后，水質(zhì)不佳，殘餌過多，清池不及時易感染該病，發(fā)病的魚苗消化道無餌料且充血發(fā)炎，用5‰的鹽酸土霉素拌藥餌投喂仔魚療效較好。

3.5.3 腸梗塞

腸梗塞多發(fā)于綠鰭馬面鲀仔魚第3“臨界期”，餌料生物不足或鹵蟲無節(jié)幼體投喂不及時易誘發(fā)此病。此時饑餓的魚苗易誤吞水中小氣泡無法排出，造成腸梗塞。另外，投喂鹵蟲無節(jié)幼體時，若鹵蟲幼體與卵殼分離不徹底，會導致魚苗攝入卵殼，在腸道內(nèi)淤積，無法消化排出，最終致使魚苗腸梗塞而死亡。魚苗表現(xiàn)為游動失衡，腹部胸角處突出、呈三角狀，鏡檢可見腸道內(nèi)充滿卵殼和氣泡。減少腸梗塞發(fā)病的關鍵在于日常管理，除了保證投餌量充足，還應做好鹵蟲孵化后卵殼的分離，投餌后還要撇除浮在水體表面的鹵蟲卵殼。

4 結(jié) 論

綠鰭馬面鲀野生親魚經(jīng)冬春季節(jié)的人工馴化和生殖調(diào)控，可進行早繁育苗。親魚自2019年3月底開始產(chǎn)卵，4月中旬—5月中旬達產(chǎn)卵高峰期(水溫19.5～22.0 ℃)，比自然海區(qū)提前約2個月。受精卵經(jīng)46～48 h后脫膜孵化[水溫(22.5±1.5) ℃]，平均孵化率達(71.0±6.7)%，育苗總成活率為12.6%。苗種早期階段存在“開口期”、“開鰾期”、“輪蟲—鹵蟲幼體轉(zhuǎn)換期”、“斷活餌期”4個“臨界期”，其間需在餌料系列選擇、水環(huán)境調(diào)控、防病等方面采用相應的管理對策，以提高育苗成活率。