孫瑩 梁國棟 姜志虎

1.青島元信檢測技術(shù)有限公司 山東青島 266000 2.青島元素科技有限公司 山東青島 266000

高效液相色譜技術(shù)提出時間是在上世紀六七十年代，是一種分離分析技術(shù)，隨著時代發(fā)展，科學(xué)技術(shù)水平提高，色譜技術(shù)不斷改進完善，應(yīng)用范圍也在擴大。這一技術(shù)應(yīng)用具備高分離速率、高分離效率以及高靈敏度特點，在不同領(lǐng)域中均有所應(yīng)用，例如化學(xué)、醫(yī)學(xué)以及工業(yè)等。藥物應(yīng)用與人們生命安全息息相關(guān)，需要對藥品制造不同環(huán)節(jié)實現(xiàn)全面化的動態(tài)分析與監(jiān)測，包括藥品研制、生產(chǎn)、經(jīng)營以及使用，提高藥品使用安全性以及有效性。基于這一情況，高效液相色譜技術(shù)在藥物分析中的應(yīng)用是十分重要的。

1 高效液相色譜基本情況概述

1.1 發(fā)展背景

這一技術(shù)的應(yīng)用最早開始在上世紀60年代，主要功能是分離與分析，使用優(yōu)勢為選擇性以及靈敏度，并且可以實現(xiàn)結(jié)構(gòu)相似藥物以及代謝物質(zhì)的同時分析。在色譜技術(shù)中較為常見的是高效液相色譜技術(shù)，這一技術(shù)應(yīng)用彌補了傳統(tǒng)液相色譜技術(shù)中柱效低的弊端，縮短分離時間，逐漸成為高效以及快速的分離技術(shù)。其中反相高效液相色譜技術(shù)優(yōu)勢更加明顯，試劑成本較低，方法應(yīng)用簡便并且使用范圍較廣，現(xiàn)階段，這一技術(shù)已經(jīng)成為體內(nèi)藥物分析中的重要方式，也是評價其他體內(nèi)藥物分析方式的重要對比條件[1]。

1.2 技術(shù)分類

這一技術(shù)的應(yīng)用在機理角度主要劃分為以下幾種：首先是吸附色譜法，通過吸附劑的使用，將其作為固定相的色譜方式；液液色譜方式，這種方式是將固定相與流動相作為兩種互補相融的色譜方式，其中組分因與離子交換劑親和力并不相同，實現(xiàn)有效分離；空間排斥色譜方式，需要將固定相作為相應(yīng)孔徑范圍多孔性物質(zhì)；親和色譜方式，這一技術(shù)主要是利用生物分子之間的專一性作用，在生物樣品中分離以及分析一部分特殊物質(zhì)；手性色譜方式，一部分有機物質(zhì)結(jié)構(gòu)中存在不對稱碳原子，這種藥物具有旋光性，其立體結(jié)構(gòu)具有差異性，藥物效果以及毒副作用也不相同。

2 高效液相色譜技術(shù)在藥物分析中的應(yīng)用分析

2.1 鑒別階段

高效液相色譜技術(shù)中，不同參數(shù)條件，也會產(chǎn)生不同的出峰順序，保留時間以及組分結(jié)構(gòu)性質(zhì)等差異性，不同的藥物在結(jié)構(gòu)以及性質(zhì)出峰順序也會存在差異，實際分析中，需要結(jié)合定性參數(shù)數(shù)據(jù)，將其應(yīng)用在藥物鑒別階段這種。在我國相應(yīng)藥物鑒別規(guī)定中，含量測定相對的色譜圖，樣品主峰保留時間需要與對照樣品主峰的時間保持相同[2]。

2.2 雜質(zhì)檢查階段

伴隨技術(shù)水平不斷提高，藥物分析工作人員針對高效液相色譜技術(shù)在藥物雜質(zhì)檢查中的應(yīng)用效果進行深入研討，建立了相應(yīng)的措施。通過對不同藥物雜質(zhì)檢查方式確定，也凸顯了使用優(yōu)勢，檢查方法較為簡便，具有可行性，并且專屬性較強，在藥物檢測領(lǐng)域中獲得了較大發(fā)展。相關(guān)研究人員通過合成新的雜質(zhì)對照樣品，確定其結(jié)構(gòu)，測定雜質(zhì)，研究相應(yīng)雜質(zhì)中的校正因子，通過此種方式建立一種高效液相色譜測定新方式，針對含量超過0.1%的雜質(zhì)實現(xiàn)結(jié)構(gòu)化鑒定。一些研究人員建立了右旋雜質(zhì)檢測方式，這一檢測方法專屬性相對較強，具有較好的重復(fù)性，結(jié)果較為準確，在手性藥物的雜質(zhì)分析中，具有較大幅度進步。

2.3 含量測定階段

通過高效液相色譜技術(shù)確定合成藥品以及制劑含量，能夠有效去除藥物雜質(zhì)以及制劑中的附加劑。研究人員使用這一技術(shù)測定舒心糖漿中阿魏酸含量，建立一種高效、具備靈敏度、準確性以及簡便性的分離方式。與此同時，這一技術(shù)在復(fù)方制劑藥物含量測定中也具有較為廣泛的應(yīng)用，現(xiàn)階段較為常見的是甘草酸含量測定以及復(fù)方葛斛膠囊這種葛根素含量測定等[3]。

2.4 體內(nèi)藥物分析階段

高效液相色譜技術(shù)應(yīng)用，相比于氣相色譜技術(shù)，不會受到樣品揮發(fā)、熱穩(wěn)定性以及相對分子質(zhì)量的影響，僅僅需要將樣品制成溶液就可以實現(xiàn)測定，在分析工作中比較適合用于高沸點、熱穩(wěn)定性能較差以及相對分子質(zhì)量較大的有機合成藥物中。研究人員通過建立快速以及準確性較高的測定方式，體現(xiàn)出較好的重復(fù)性和可靠性，在臨床前藥代動力學(xué)中，針對血藥濃度測定具有較好的應(yīng)用效果。一些研究人員使用定量分析方式，將其用于大鼠體內(nèi)藥物動力學(xué)研究中，這種分析方式具有較好特異性，分析時間段，靈敏度較高。

3 技術(shù)研究動向

檢測技術(shù)的應(yīng)用主要是檢測儀器不斷發(fā)展，將高效液相色譜檢測儀器不斷改進和優(yōu)化，提高藥物分析過程中的高靈敏度以及可操作性。在復(fù)雜樣品分析以及定量特定成分分離中，可以使用多種色譜方式，保證傳統(tǒng)高效液相色譜技術(shù)使用靈活性，分析優(yōu)勢具有更加廣闊的前景[4]。

4 結(jié)語

在藥物分析中應(yīng)用高效液相色譜技術(shù)可以提高藥物分析靈敏度和可靠性，檢測技術(shù)不斷進步，使用多種聯(lián)用技術(shù)可以解決更加多樣化的問題，在醫(yī)藥研究中發(fā)揮的作用也會越來越大。