高海霞

（山東省利津縣動物疫病防治監(jiān)控中心山東東營 257400）

肉雞養(yǎng)殖中球蟲疾病的出現(xiàn)主要是由于艾美耳球蟲屬導(dǎo)致的一種寄生蟲疾病，球蟲疾病的出現(xiàn)主要會導(dǎo)致肉雞腸道出現(xiàn)炎癥病變的癥狀，導(dǎo)致肉雞腸道出現(xiàn)出血性腸道炎癥，下痢以及死亡等癥狀，實(shí)際生產(chǎn)過程中，雛雞養(yǎng)殖階段的發(fā)病率和死亡率相對較高，嚴(yán)重降低了肉雞養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益和可持續(xù)發(fā)展能力，阻礙了我國家禽養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。據(jù)相關(guān)資料顯示，每年全球肉雞養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)中對于球蟲疾病防治主要是通過抗生素和化學(xué)合成藥物的使用以及免疫疫苗的注射，其經(jīng)濟(jì)成本達(dá)到30 億美元以上，由于抗生素和化學(xué)合成藥物的長時(shí)間大劑量的使用會導(dǎo)致球蟲蟲株出現(xiàn)耐藥性以及肉產(chǎn)品中出現(xiàn)藥物殘留的情況，一定程度上制約了肉雞養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展，所以球蟲免疫疫苗的科學(xué)應(yīng)用受到廣大肉雞養(yǎng)殖戶的關(guān)注。球蟲免疫的活疫苗主要包括強(qiáng)毒疫苗和弱毒疫苗兩個(gè)種類，在肉雞球蟲疾病防治中獲得了一定的效果，但是也存在一定的缺陷。本文將對肉雞球蟲活疫苗在肉雞生產(chǎn)中的應(yīng)用研究進(jìn)展進(jìn)行介紹，以期為肉雞球蟲疾病的良好防治以及我國家禽養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供幫助。

1 肉雞球蟲疾病強(qiáng)毒疫苗的研究

球蟲疾病活疫苗主要是通過球蟲活卵囊制作的球蟲疫苗，現(xiàn)階段在肉雞實(shí)際生產(chǎn)中使用的主要是強(qiáng)毒活疫苗、弱毒活疫苗、晚熟系球蟲疫苗以及早、中、晚熟系聯(lián)合球蟲疫苗4 個(gè)種類，其中前兩種的應(yīng)用更為廣泛。強(qiáng)毒疫苗的球蟲蟲株是指從自然感染球蟲疾病的肉雞腸道組織或者糞便中分離出來后再通過單卵囊分離純化技術(shù)制作單個(gè)球蟲種株，后續(xù)按照一定的比例進(jìn)行蟲株的混合后使用適量的穩(wěn)定劑進(jìn)行穩(wěn)定，最后形成強(qiáng)毒球蟲活疫苗。試驗(yàn)研究通過在肉雞飲水或者飼料中接種少量的混合肉雞球蟲卵囊活疫苗后發(fā)現(xiàn)肉雞獲得了良好的球蟲疾病免疫防治效果。后續(xù)試驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)，相比于肉雞飲水或者飼料中首次添加大劑量的球蟲卵囊強(qiáng)毒疫苗，通過多次逐漸增加強(qiáng)毒疫苗的添加，對雛雞進(jìn)行反復(fù)的輕微感染，對于雛雞的生長發(fā)育沒有不良效果，同時(shí)可以保障雛雞獲得良好的球蟲疾病免疫防治效果。研究發(fā)現(xiàn)通過單球蟲品種強(qiáng)毒疫苗對肉雞進(jìn)行滴鼻點(diǎn)眼免疫的防治方式，或者第一次免疫大劑量添加以及二次免疫配合可以保障肉雞獲得良好的球蟲疾病防治效果，激活肉雞機(jī)體對于球蟲疾病的體液免疫效果[1]。

球蟲強(qiáng)毒免疫疫苗在肉雞養(yǎng)殖生產(chǎn)中發(fā)揮著重要的作用，但是也存在一定的風(fēng)險(xiǎn)和負(fù)面影響。首先球蟲強(qiáng)毒疫苗的制作和使用過程中不能使用抗球蟲藥物，若疫苗使用過程中操作不當(dāng)或者出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)等，可能引起雞群出現(xiàn)球蟲感染疾病。其次是強(qiáng)毒疫苗的混合蟲株中存在部分野生毒株，野生毒株沒有進(jìn)行任何的弱毒化處理，毒力感染能力較強(qiáng)，使用不當(dāng)容易導(dǎo)致雞群出現(xiàn)球蟲疾病感染。部分強(qiáng)毒疫苗的制作使用的是地方性球蟲蟲株，在別處的新雞場中使用可能導(dǎo)致球蟲疾病的暴發(fā)。

2 肉雞球蟲疾病弱毒疫苗的研究

肉雞球蟲弱毒疫苗的制作主要是通過在自然感染球蟲疾病的肉雞糞便中收集球蟲卵囊，通過使用單球蟲卵囊擴(kuò)增的方式來純化球蟲卵囊，后續(xù)通過降低球蟲蟲株的致病能力，降低蟲株對于宿主的危害程度，但保障蟲株可以導(dǎo)致肉雞機(jī)體產(chǎn)生足夠的免疫能力，最后按照合適的比例配合穩(wěn)定劑制作活疫苗?，F(xiàn)階段肉雞球蟲弱毒活疫苗降低蟲株毒性的方式主要有球蟲蟲株的早熟選育、雞胚組織的傳代培養(yǎng)以及理化處理等方式。早熟選育的弱化方式最早應(yīng)用于柔嫩艾美耳球蟲，研究發(fā)現(xiàn)柔嫩艾美耳球蟲的早熟株致病能力較弱，但是仍然可以保持良好的免疫原性，這一發(fā)現(xiàn)極大地推動了肉雞球蟲弱毒疫苗中早熟選育的研究進(jìn)程。后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)通過20 代球蟲蟲株的選育，可以獲得潛隱期減少16h 的巨型艾美耳球蟲蟲株，同時(shí)致病力顯著下降，具有良好的免疫原性[2]。

雞胚傳代的蟲株毒性弱化方式主要是將肉雞球蟲孢子化卵囊通過體外人工脫卵囊的方式獲得球蟲的子孢子，隨后將球蟲的子孢子接種在雞胚的絨毛尿囊膜上培養(yǎng)，通過后續(xù)的傳代培養(yǎng)后致病力顯著下降，并具有良好免疫原性的雞胚適應(yīng)性球蟲蟲株。試驗(yàn)研究中通過使用柔嫩艾美耳球蟲分離培養(yǎng)雞胚弱毒蟲株TA，經(jīng)過后續(xù)的連續(xù)傳代培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，TA 蟲株的致病能力顯著低于親本蟲株，進(jìn)行肉雞機(jī)體免疫后可以獲得良好的免疫效果，具備抵抗強(qiáng)毒蟲株供給的能力。理化處理蟲株毒性弱化處理的方式主要是通過物理和化學(xué)的手段處理蟲株以降低其致病力。例如常見的加熱、冷凍、化學(xué)試劑誘變以及輻射等方式處理球蟲卵囊，使得球蟲卵囊的致病能力下降，但保持良好的免疫原性。有研究發(fā)現(xiàn)通過使用化學(xué)誘變劑N-甲基-N-硝基-N-亞硝基胍處理柔嫩艾美耳球蟲蟲株后給肉雞進(jìn)行免疫防治，隨后使用強(qiáng)毒球蟲蟲株對肉雞進(jìn)行攻毒處理，發(fā)現(xiàn)肉雞沒有出現(xiàn)球蟲感染的情況，免疫保護(hù)率可以達(dá)到100%[3]。

弱毒疫苗相比強(qiáng)毒疫苗具有一定的優(yōu)勢，致病力顯著下降，提高了疫苗的安全水平，但是弱毒疫苗的研發(fā)和制作均需要更高的經(jīng)濟(jì)成本，同時(shí)弱毒疫苗也存在疫苗穩(wěn)定性和疫苗毒力返強(qiáng)等負(fù)面影響，均需要更深入的研究以獲取效果更為優(yōu)良的球蟲疫苗。