李 寧，卓 娜，白銀鎖，武玉平，王建國(guó)，高如軍，任 佳，王懷樹(shù)*

（1.杭錦旗綠美農(nóng)牧業(yè)開(kāi)發(fā)有限責(zé)任公司，內(nèi)蒙古 鄂爾多斯 017400；2.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，甘肅 蘭州 730070；3.內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010031；4.杭錦旗家畜改良工作站，內(nèi)蒙古 鄂爾多斯017400）

甘草是我國(guó)干旱、半干旱地區(qū)的重要植物資源之一，其根莖長(zhǎng)期以來(lái)在世界范圍內(nèi)被用作草藥和天然甜味劑[1]。隨著科學(xué)技術(shù)的日益發(fā)展，其作用不僅僅局限于醫(yī)藥領(lǐng)域，在食品行業(yè)及畜牧行業(yè)都有非?？捎^的利用前景，其地下部分可以用來(lái)入藥，地上的根及根莖和殘?jiān)糠挚梢越?jīng)過(guò)粉碎加工作為禽畜飼料飼喂動(dòng)物[2]。甘草的活性成分主要包括黃酮類、異黃酮類、查爾酮類、甘草酸、三萜皂苷和多糖類[3]，這些化合物具有許多有用的藥理特性，包括抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、抗炎、抗病毒、抗菌、抗癌活性、保肝和保護(hù)心臟等作用[4]。大量研究表明，甘草提取物在免疫功能和抗氧化功能中起著重要的調(diào)節(jié)作用[1,5]。王永力等[6]用甘草莖葉替代稻草加工制成顆粒飼料后飼喂巴楚山羊，研究甘草莖葉對(duì)羊生產(chǎn)性能及血液性狀的影響。結(jié)果表明，甘草莖葉按照 25%左右的比例添加，能有效調(diào)節(jié)山羊的消化系統(tǒng)機(jī)能。劉俊峰等[7]通過(guò)在飼料中添加150 mg/kg甘草皂苷飼喂卡拉庫(kù)爾羊。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，甘草皂苷能提高血液中免疫球蛋白IgA和IgG的含量。車麗濤等[8]在飼糧中添加400 mg/kg的甘草次酸，可提高青年母豬的養(yǎng)分消化率及血清生殖激素濃度，改善繁殖性能，提高抗氧化能力。近年來(lái)，對(duì)于甘草的研究大多集中在甘草提取物和甘草藥渣等方面，對(duì)甘草粉的研究少有報(bào)道，而且有關(guān)甘草粉對(duì)生長(zhǎng)育肥豬的作用報(bào)道也很少。因此，本試驗(yàn)擬研究甘草粉對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能、血液中生化指標(biāo)、免疫及抗氧化功能的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用甘草為杭錦旗梁外甘草，采購(gòu)于當(dāng)?shù)厥袌?chǎng)，經(jīng)測(cè)定其中干物質(zhì)含量（89.2%），總灰分（3.8%），酸不溶灰分（0.7%），主要活性成分為甘草苷（1.6%）和甘草酸（3.1%）等。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗(yàn)在內(nèi)蒙古自治區(qū)鄂爾多斯市杭錦旗綠美豬場(chǎng)進(jìn)行，試驗(yàn)前對(duì)供試豬舍進(jìn)行全面清掃消毒。試驗(yàn)采用單因素隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，將初始體重 （77±1.86）kg、遺傳基礎(chǔ)相近的 72頭雜交（杜洛克×長(zhǎng)白×大白）育肥豬，按照公母各半，隨機(jī)分為 4個(gè)處理，每個(gè)處理 3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)（欄）6頭豬，預(yù)試期7 d，試驗(yàn)期 50 d。在預(yù)試期內(nèi)，給所有試驗(yàn)豬飼喂相同的基礎(chǔ)飼糧，同時(shí)觀察豬的行為和健康狀態(tài)，以便及時(shí)做出調(diào)整。預(yù)試期結(jié)束后，對(duì)照組仍飼喂基礎(chǔ)日糧，甘草處理組（試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組）分別飼喂在基礎(chǔ)日糧中添加0.1%、0.3%和0.6%甘草粉的試驗(yàn)飼糧。試驗(yàn)豬由專人每日飼喂 2次 （早上8點(diǎn)和下午6點(diǎn)各1次）。試驗(yàn)期間記錄每日耗料量及試驗(yàn)豬健康狀況。飼糧參照 NRC（2012）豬的營(yíng)養(yǎng)需要并結(jié)合所在豬場(chǎng)生產(chǎn)實(shí)際配制，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 樣品采集

從每個(gè)重復(fù)中挑選2頭（公母各1頭）中等體重的試驗(yàn)豬，通過(guò)前腔靜脈對(duì)每頭豬空腹采集血樣10 mL。將新鮮血液靜置30 min，隨后以3000 g離心10 min，用2 mL離心管收集血清。儲(chǔ)存于 -20℃的冰箱中，做進(jìn)一步分析。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo)測(cè)定。試驗(yàn)豬分別于試驗(yàn)期第1 d和第50 d早上空腹12 h后稱重。試驗(yàn)期間統(tǒng)計(jì)每個(gè)重復(fù)的耗料量，計(jì)算每頭豬平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.4.2 血清免疫和生化指標(biāo)。血清免疫和生化指標(biāo)采用邁瑞B(yǎng)S-420全自動(dòng)生化儀測(cè)定血清中尿素氮（UREA）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、血糖（GLU）、免疫球蛋白 A（IgA）、免疫球蛋白 G（IgG）、免疫球蛋白 M（IgM）含量及谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）活性。檢測(cè)步驟按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4.3 血清抗氧化指標(biāo)。采用華衛(wèi)德朗DR-200BS酶標(biāo)分析儀試劑盒（錫華衛(wèi)德朗儀器有限公司）檢測(cè)血清中總抗氧化能力（TAOC）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽-過(guò)氧化物酶（GSH-PX） 、過(guò)氧化氫酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）含量。檢測(cè)步驟按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.5 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用 Excel 2019進(jìn)行初步整理，運(yùn)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，用單因素方差分析（one-way ANOVA）進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)，并用Duncan氏法進(jìn)行各組間的多重比較。結(jié)果均采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 甘草對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅱ組的末重顯著（P＜0.05）高于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅲ組；試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組平均日增重顯著（P＜0.05）高于對(duì)照組。試驗(yàn)Ⅱ組平均日采食量顯著（P＜0.05）高于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅲ組；對(duì)照組的料重比顯著（P＜0.05）高于試驗(yàn)Ⅰ組；試驗(yàn)Ⅲ組平均日增重和料重比與對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05）。

表2 甘草對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 甘草對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血清生化指標(biāo)的影響

由表4可知，試驗(yàn)Ⅱ組血清TP、GLB含量顯著高于（P＜0.05）其他3個(gè)組；對(duì)照組血清GLU含量顯著低于（P＜0.05）甘草處理組。試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅲ組血清ALT含量顯著（P＜0.05）高于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅰ組，對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅰ組之間無(wú)顯著（P＞0.05）差異。各處理組血清 ALB、TC、TG、UREA 和 AST 差異不顯著（P＞0.05）。

表3 甘草對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血清生化指標(biāo)的影響

表4 甘草對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

2.3 甘草對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表4可知，試驗(yàn)Ⅰ組血清SOD和GSH-PX含量顯著（P＜0.05）高于對(duì)照組、試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅲ組。試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅱ組血清CAT含量顯著（P＜0.05）高于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅲ組。試驗(yàn)Ⅰ組血清MDA顯著（P＜0.01）低于對(duì)照組與試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅲ組。育肥豬飼糧中添加甘草對(duì)各處理組血清TAOC含量無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

2.4 甘草對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血清免疫指標(biāo)的影響

由圖 1可見(jiàn)，試驗(yàn)Ⅰ組血清IgG含量顯著 （P＜0.05）高于對(duì)照組與試驗(yàn)Ⅱ組、試驗(yàn)Ⅲ組。試驗(yàn)Ⅱ組血清IgM含量顯著（P＜0.05）高于對(duì)照組與試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅲ組。育肥豬飼糧中添加甘草對(duì)血清中IgA影響較小，各處理組之間差異不顯著 （P＞0.05）。

圖1 甘草對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血清免疫指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 甘草對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響

甘草莖葉營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高，適當(dāng)比例代替部分優(yōu)質(zhì)飼草或精料，可增加養(yǎng)殖效益[9]。研究表明，甘草具有保護(hù)消化系統(tǒng)的作用，以此達(dá)到提高飼料利用率的效果[10]。雙金等[11]在育肥豬飼糧中添加1%甘草浸膏副產(chǎn)品，豬日增重提高 23.32%～23.59%，料重比降低10.74%～10.90%。而本研究結(jié)果表明，隨著甘草在育肥豬飼糧中添加量的增加，甘草處理組的平均日增重和料重比顯著高于對(duì)照組，隨著飼糧中甘草粉添加量的增加，平均日增重和平均日采食量有先升高后降低的趨勢(shì)，而添加0.1%甘草粉對(duì)末重和平均日增重影響最顯著，說(shuō)明添加0.1%的甘草粉能提高生長(zhǎng)育肥豬的生產(chǎn)性能。有研究表明，甘草中含有甘草酸，甘草酸是甘草的甜味物質(zhì)，甘草酸的甜度為蔗糖的250倍[12]，豬喜食甜食，因此飼糧中添加甘草可以提高生長(zhǎng)育肥豬的平均日增重和平均日采食量。

3.2 甘草對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血清生化指標(biāo)的影響

血液是動(dòng)物的重要組成部分。血液中生理生化指標(biāo)的變化可以反映動(dòng)物機(jī)體或器官的代謝和健康狀況[13]。血清UREA和TP是反映動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸平衡的重要指標(biāo)，尤其是血清UREA含量直接反映了蛋白質(zhì)在體內(nèi)的吸收利用情況和肝腎功能狀況[14]。血清UREA含量升高表明體內(nèi)蛋白質(zhì)分解代謝增強(qiáng)、氮沉積減少，直接導(dǎo)致血液中TP含量的減少[15-16]。本試驗(yàn)研究表明，甘草處理組與對(duì)照組的血清UREA含量相比無(wú)顯著差異，試驗(yàn)Ⅲ組的血清TP、GLB含量顯著高于對(duì)照組與其他兩個(gè)試驗(yàn)組。表明飼糧中添加適量的甘草可以提高動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)的利用率，增加血液中氮的沉積，這可能是由于甘草中甘草皂苷的影響[17]。

在生理正常值范圍內(nèi)，動(dòng)物血清GLU含量的高低反映腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收作用的強(qiáng)弱[13]。本試驗(yàn)研究表明，甘草處理組血清GLU含量呈先增加后降低趨勢(shì)，其中試驗(yàn)Ⅰ組血清中GLU含量顯著高于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅱ、試驗(yàn)Ⅲ組，說(shuō)明添加適量甘草，能提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率進(jìn)而提高血清GLU含量。因此，飼糧中添加適量甘草可以提高育肥豬的消化率，從而間接提高血清中GLU含量，影響動(dòng)物的生長(zhǎng)性能。

TG和TC是評(píng)價(jià)動(dòng)物脂質(zhì)代謝的重要指標(biāo)。有研究證明，皂苷能降低血清中TC和TG含量[18]。而總膽固醇含量的上升表示脂代謝增強(qiáng)，說(shuō)明甘草可提高生長(zhǎng)育肥豬對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，從而促進(jìn)不飽和脂肪酸等重要物質(zhì)的合成[19]。本試驗(yàn)研究表明，試驗(yàn)Ⅰ組血清中TC和TG含量高于對(duì)照組。這表明飼糧中添加甘草可改善動(dòng)物脂肪沉積和代謝，可能與甘草中甘草皂苷、異甘草素和異甘草黃酮醇等參與了膽固醇在機(jī)體內(nèi)的代謝、轉(zhuǎn)運(yùn)等功能有密切關(guān)系[20]。

血清ALT和AST活性的高低是反映動(dòng)物機(jī)體應(yīng)激程度、蛋白質(zhì)合成與分解狀況、肝臟和心臟受損程度的敏感指標(biāo)[21]。本試驗(yàn)研究表明，甘草處理組與對(duì)照組在血清AST含量上無(wú)明顯差異。隨著甘草添加量的增加，甘草處理組血清ALT活性明顯上升且趨勢(shì)較為明顯，尤其是試驗(yàn)Ⅲ組，顯著高于對(duì)照組，表明添加0.6%甘草能降低機(jī)體的抗應(yīng)激能力；試驗(yàn)Ⅰ組與對(duì)照組沒(méi)有明顯差別，說(shuō)明飼料中添加0.1%的甘草不僅能提高體內(nèi)蛋白質(zhì)的利用率、提高育肥豬的消化率和增加血液中氮的沉積，還可以改善動(dòng)物脂肪沉積和代謝以及抗應(yīng)激能力。

3.3 甘草對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

有研究表明，甘草可以提高動(dòng)物的抗氧化能力[22]。TAOC和SOD是動(dòng)物抗氧化狀態(tài)的常用指標(biāo)。機(jī)體在正常代謝過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生一些化學(xué)性質(zhì)極為活潑的含氧原子或原子團(tuán)，如超氧化物陰離子、過(guò)氧化氫和羥自由基等，它們能夠攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸，導(dǎo)致脂質(zhì)過(guò)氧化，產(chǎn)生脂質(zhì)過(guò)氧化物，破壞細(xì)胞膜蛋白構(gòu)象，損傷膜蛋白功能，從而破壞生物膜結(jié)構(gòu)與功能的完整性[23]。SOD、GSH-PX和CAT構(gòu)成了自由基清除系統(tǒng)的酶促體系，是抗氧化防御系統(tǒng)的重要組成部分，對(duì)機(jī)體的抗氧化起著重要作用[24]。機(jī)體內(nèi)SOD和GSH-Px酶活力的高低間接反映了機(jī)體清除自由基的能力，MDA則是主要的脂質(zhì)過(guò)氧化作用的終產(chǎn)物，從側(cè)面間接反映組織脂質(zhì)過(guò)氧化損傷程度。本試驗(yàn)研究表明，飼糧中添加0.1%的甘草粉能提高育肥豬抗氧化指標(biāo)，且可以顯著降低MDA含量，與王曉玲[25]等在母豬飼糧中添加甘草渣后發(fā)現(xiàn)其可提高繁殖母豬血清中SOD和GSH-PX的含量的研究結(jié)果一致。造成生長(zhǎng)育肥豬血清中抗氧化能力的增強(qiáng)可能是由于甘草粉中含有甘草黃酮的因素[5]。

3.4 甘草對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血清免疫指標(biāo)的影響

研究發(fā)現(xiàn)，甘草中含有多種提高動(dòng)物免疫力的活性成分及一些藥用成分[26]，用于畜牧業(yè)養(yǎng)殖中可增強(qiáng)動(dòng)物的免疫功能，提高抗病能力[27-28]。血清IgG、IgM和IgA是哺乳動(dòng)物體液免疫的關(guān)鍵成分，是血管外隔室抵御病原病毒和微生物的保障[17]。許多研究已經(jīng)證明了草藥和益生菌飼料添加劑具有增強(qiáng)對(duì)特定模型抗原的體液免疫應(yīng)答的潛力[29]。對(duì)此，在本試驗(yàn)中，我們測(cè)定了血液的免疫指標(biāo)。結(jié)果表明，飼糧中添加甘草可顯著提高豬血清中IgG和IgM的水平。這可能與甘草中含有甘草甜素和甘草酸等有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，甘草甜素和甘草酸等在激活某些免疫功能方面具有重要潛力，例如誘導(dǎo)干擾素的產(chǎn)生、增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞的活性以及通過(guò)增加白細(xì)胞介素-2的產(chǎn)生來(lái)調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞的生長(zhǎng)反應(yīng)[30]。在研究中，飼糧中添加0.1%的甘草在血清IgG中顯著性最為明顯，說(shuō)明在飼糧中添加0.1%甘草可以提高血清免疫指標(biāo)。

4 結(jié)果

在本試驗(yàn)條件下，在生長(zhǎng)育肥豬飼糧中添加甘草粉，提高了生長(zhǎng)育肥豬的抗氧化能力和免疫能力，改善了機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)的利用效率。綜合考慮，在飼糧中添加0.1%的甘草粉，可以提高生長(zhǎng)育肥豬的抗氧化及抗病能力，但不宜超量，否則會(huì)引起生長(zhǎng)抑制，最適添加量還需進(jìn)一步研究。