劉秀菊， 李高馳， 陽紅梅， 林建春

（深圳市龍崗區(qū)婦幼保健院，廣東 深圳 518100）

精子的發(fā)育是一個激素依賴性的精密過程。抗米勒管激素（anti-Müllerian hormone，AMH）、抑制素B（inhibin B，InhB）和卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone，F(xiàn)SH）參與了精子的生成和發(fā)育，在男性生育方面發(fā)揮著重要作用[1-2]。本研究擬探討男性血清AMH、FSH、InhB與精子參數(shù)的相關(guān)性，并對比血清AMH、FSH、InhB在梗阻性和非梗阻性無精子癥中的差異，為臨床決策提供參考。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2014年1月—2017年12月深圳市龍崗區(qū)婦幼保健院生殖健康科男性患者97例，參考文獻[3]，根據(jù)精子參數(shù)和睪丸活檢結(jié)果，分為梗阻性無精子癥組[15例，年齡（30.2±5.1）歲）]、非梗阻性無精子癥組[12例，年齡（31.2±6.7）歲]、少弱精子癥組[70例，年齡（29.3±6.2）歲]。以122名精液質(zhì)量合格、正常生育后代的男性為對照組，年齡（32.1±7.3）歲。各組年齡差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 精子參數(shù)分析 收集所有研究對象禁欲2～7 d后手淫獲得的精液，置于無菌干燥取精杯中，1 h內(nèi)送檢，37 ℃溫育至液化后進行檢測。采用稱重法檢測精液量。采用CASAS-QH-Ⅲ精子動（靜）態(tài)圖像檢測系統(tǒng)（北京華方神火科技有限公司）進行精子參數(shù)（精子總數(shù)、精子濃度、精子活力、前向運動精子百分率）分析。無精子癥患者標(biāo)本以3 000×g離心10 min，在沉渣中尋找精子，若3次檢測均未找到精子，則為“無精子”。

1.2.2 血清AMH、FSH、InhB檢測 采集所有研究對象清晨空腹靜脈血3 mL，使用ARCHITECT i2000化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（美國雅培公司）及配套試劑、質(zhì)控品檢測FSH。采用雙抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測InhB、AMH，InhB檢測試劑和質(zhì)控品購自美國DSL公司，AMH檢測試劑和質(zhì)控品購自深圳亞輝龍公司。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計分析。正態(tài)分布的計量數(shù)據(jù)以±s表示，組間比較采用單因素方差分析。各項指標(biāo)之間的相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清AMH、FSH、InhB比較

與對照組和梗阻性無精子癥組比較，非梗阻性無精子癥組、少弱精子癥組血清AMH、FSH水平顯著降低（P<0.05），血清InhB水平顯著升高（P<0.05）。對照組與梗阻性無精子癥組之間各項指標(biāo)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

表1 各組血清AMH、FSH、InhB水平比較 ±s

表1 各組血清AMH、FSH、InhB水平比較 ±s

注：與對照組和梗阻性無精子癥組比較，*P<0.05。

images/BZ_61_261_1604_2215_1661.png梗阻性無精子癥組 15 8.91±3.75 4.21±2.15 135.65±41.25非梗阻性無精子癥組 12 6.23±2.95* 5.94±2.55* 86.54±27.65*少弱精子癥組 70 7.45±3.14* 5.26±2.98* 95.39±31.45*對照組 122 9.13±3.15 4.15±2.37 157.76±57.23

2.2 AMH、FSH、InhB與精子參數(shù)的相關(guān)性

AMH與精子總數(shù)、精子濃度、精子活力和前向運動精子百分率均呈正相關(guān)（P<0.05）；InhB、FSH與精子總數(shù)、精子濃度呈正相關(guān)（P<0.05），與精子活力、前向運行精子率無相關(guān)性（P>0.05）。見表2。

表2 AMH、FSH、InhB與精子參數(shù)的相關(guān)性分析

3 討論

精子發(fā)育主要受下丘腦-垂體-性腺軸精密調(diào)控，也受睪丸內(nèi)微環(huán)境影響，F(xiàn)SH、AMH、InhB是重要的影響因素[4]。FSH是垂體分泌的糖蛋白激素，與睪丸生精小管支持細胞上的FSH受體結(jié)合，啟動G蛋白耦聯(lián)機制，通過磷酸蛋白酶A、B、C等信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑發(fā)揮作用[5]。AMH、InhB在成年男性體內(nèi)均由睪丸支持細胞分泌。AMH結(jié)合AMH Ⅱ型受體后，可激活SMAD 1，SMAD 5和SMAD 8信號通路，發(fā)揮作用。InhB由睪丸支持細胞直接分泌，不受促性腺激素釋放激素、雌激素、雄激素等影響，可更直接地反映睪丸內(nèi)精子發(fā)生情況[6-7]。在睪丸中，F(xiàn)SH能提高支持細胞雄激素結(jié)合蛋白水平，同時分泌抑制素。InhB可選擇性地抑制垂體分泌FSH。AMH受雄激素負向調(diào)節(jié)和FSH正向調(diào)節(jié)[8]。

成年男性AMH經(jīng)多因素調(diào)控后，可恒定維持在一個較低水平。AMH和男性生精能力的關(guān)系及其在男性生殖相關(guān)疾病中的差異是目前研究的熱點，也是一個頗有爭議的課題。彭龍平等[8]發(fā)現(xiàn)血清AMH與精子發(fā)生有關(guān)，能作為睪丸支持細胞功能的標(biāo)志物。但ANDERSEN等[8]提出精子減少癥患者和正常精子濃度者，或不育男性和可育男性血清AMH差異無統(tǒng)計學(xué)意義。這些爭議可能是由研究對象、研究方法和病例數(shù)不同造成的。本研究結(jié)果顯示，非梗阻性無精子癥組血清AMH明顯低于其他3組（P<0.05）；AMH與精子總數(shù)、精子濃度、精子活力和前向運動精子百分率均呈正相關(guān)（r值分別為0.227、0.215、0.111、0.120，P<0.05）。與ALFANO等[6]、熊哲等[10]的研究結(jié)果一致。AMH在睪丸生精過程中通過旁分泌方式調(diào)節(jié)支持細胞功能，也能直接反映生精小管上皮細胞的功能狀態(tài)。有研究發(fā)現(xiàn)，AMH只存在于生精小管和未成熟精子細胞中[11]，證實了這一觀點。LIU等[12]認為精漿AMH水平與精子濃度、活率和前向運動精子百分率成正比。NERY等[13]發(fā)現(xiàn)，精漿AMH有助于維持精子活力，可預(yù)測弱精子癥患者精子冷凍保存后精子活力恢復(fù)的情況。ANDERSEN等[8]、LIU等[12]和NERY等[13]均認為血清AMH與精子參數(shù)無相關(guān)性。

本研究還發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)SH與精子總數(shù)、精子濃度呈負相關(guān)（r值分別為-0.125、-0.236，P<0.05），InhB與精子總數(shù)、精子濃度呈正相關(guān)（r值分別為0.232、0.166，P<0.05），與楊昊等[14]、TUNC等[15]的研究結(jié)果一致，且已得到普遍認可。FSH基因和FSHR基因存在的單核苷酸多態(tài)性可能會影響FSH的表達和FSHR活性，導(dǎo)致男性精子發(fā)生障礙[5]。楊昊等[14]的研究結(jié)果顯示，精子參數(shù)不僅與睪丸功能有關(guān)，還與附睪、輸精管等附屬性腺功能有關(guān)。因此，在評價男性生精能力時，要綜合各指標(biāo)多方位、多層次衡量。

無精子癥分為梗阻性無精子癥和非梗阻性無精子癥。傳統(tǒng)的鑒別方法為輸精管造影、睪丸活檢等創(chuàng)傷性檢查。選用合適的生物標(biāo)志物進行無創(chuàng)性鑒別無精子癥是目前的研究熱點[4]。本研究發(fā)現(xiàn)，非梗阻性無精子癥組血清AMH、FSH、InhB水平顯著低于梗阻性無精子癥組（P<0.05）。熊哲等[10]指出，將AMH、FSH、InhB和睪丸體積綜合起來分析，能更好地判斷梗阻性和非梗阻性無精子癥，也能為無精子癥顯微取精提供有益指導(dǎo)。

綜上所述，血清AMH、FSH、InhB水平與精子參數(shù)有一定相關(guān)性，能為男性不育癥診治提供有價值的信息。但AMH、FSH和InhB都不能非常全面、精確地評價睪丸及其他附屬性腺功能。在評價男性生精能力時，要綜合各指標(biāo)進行全方位、多層次的評估，以免單一指標(biāo)造成偏差和失誤。