摘要：隨著混合毒品使用的泛濫，近年來出現(xiàn)了多種毒品混合使用的現(xiàn)象，如“搖頭丸”和“K粉”，因此開發(fā)同時(shí)檢測(cè)多種毒品組分的分析方法對(duì)禁毒工作顯得尤為重要。本文使用超高效液相色譜建立了一種快速測(cè)定人體尿樣中安非他明和氯胺酮的檢測(cè)方法。該方法具有操作簡(jiǎn)便、高效快速和靈敏度高的特點(diǎn)，可以廣泛應(yīng)用于司法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室。

關(guān)鍵詞：安非他明 氯胺酮 超高效液相色譜 尿液

安非他明是一種常見的苯胺類中樞神經(jīng)興奮劑，主要作用于中樞神經(jīng)和交感神經(jīng)，屬于中樞神經(jīng)興奮類毒品【1】。由于其易于合成，見效快、藥力維持時(shí)間長(zhǎng)，因此于20世紀(jì)90年代開始在全球范圍內(nèi)泛濫，非買合成、買賣安非他明已經(jīng)成為了日益嚴(yán)重的社會(huì)問題，聯(lián)合國(guó)禁毒署認(rèn)為其將有可能取代海洛因和鴉片成為21世紀(jì)全球?yàn)E用最為廣泛的毒品。根據(jù)衛(wèi)生部、國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局關(guān)于《苯丙胺類興奮劑濫用及相關(guān)障礙的診斷治療指導(dǎo)原則》安非他明在體內(nèi)代謝主要由肝臟完成，約70%經(jīng)肝臟代謝完成，其余30%隨尿液排出體外【2-5】。

氯胺酮，俗稱“K粉”，是一種常用的外科手術(shù)用注射麻醉藥，氯胺酮注射后會(huì)使人產(chǎn)生一種夢(mèng)幻感并導(dǎo)致精神亢奮，所以也被濫用作為毒品。氯胺酮自20世紀(jì)90年代進(jìn)入中國(guó)以來，主要在酒吧、舞廳等娛樂場(chǎng)所被濫用。氯胺酮主要在肝臟內(nèi)完成生物代謝、生產(chǎn)去甲氯胺酮，再經(jīng)進(jìn)一步代謝用腎臟排出體外，有2.5%的氯胺酮以原型形式經(jīng)由尿液排出。2001年5月，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局將氯胺酮列入二類精神藥品管理【2-5】。

隨著毒品的泛濫，多種毒品混合使用的現(xiàn)象愈發(fā)增多。近年來多次出現(xiàn)合并濫用毒品現(xiàn)象，因此開發(fā)同時(shí)檢測(cè)人體組織中的多種毒品含量的檢測(cè)技術(shù)對(duì)禁毒工作具有重要意義。尿液因其易于活動(dòng)而成為經(jīng)常被檢測(cè)的對(duì)象，但尿液基質(zhì)存在成分復(fù)雜、干擾成分多，需經(jīng)過復(fù)雜前處理工作才能保證分析準(zhǔn)確度【6，7】。本文使用超高效液相色譜建立了一種快速測(cè)定人體尿樣中安非他明和氯胺酮的檢測(cè)方法。該方法具有操作簡(jiǎn)便、高效快速和靈敏度高的特點(diǎn)，可以廣泛應(yīng)用于司法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室。

1材料與方法

1.1 儀器、材料及試劑

液相色譜儀（島津LC-30A，包含CBM-20A系統(tǒng)控制器、LC-30AD高精度輸液泵、DGU-20A在線脫氣機(jī)、SIL-30AC自動(dòng)進(jìn)樣器、CTO-30A柱溫箱、SPD-20A紫外檢測(cè)器）;漩渦混合器（iKA，MS3 basic）;單通道移液器（Eppendorf，Reference 2）;三乙胺、磷酸二氫鉀、磷酸均為分析純購自上海安譜實(shí)驗(yàn)科學(xué)有限公司，乙腈購自Fisher Scientific，均為色譜純級(jí)，安非他明和氯胺酮標(biāo)準(zhǔn)品由遼寧省公安廳提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 液相色譜儀分析條件

色譜柱：Shim-packODSⅡ（3.0mmI.D.×100mm，2.2μm）

流動(dòng)相A：20mM磷酸二氫鉀/10mM三乙胺水溶液（磷酸調(diào)節(jié)PH=3.0），流動(dòng)相B：乙腈;流動(dòng)相比例：A/B=90/10（v/v）;流速：0.9mL/min;洗脫方式：等度洗脫;柱溫：35℃;紫外檢測(cè)波長(zhǎng)：290nm;進(jìn)樣量：10μL

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

取不同量的安非他明和氯胺酮標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液，使用超純水稀釋配制，配制濃度為0.2、0.5、1.0、2.0、5.0及10.0μg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，將配制好的標(biāo)準(zhǔn)溶液轉(zhuǎn)移至棕色樣品瓶于-4℃儲(chǔ)備保存。

1.2.3尿液樣品制備

采集健康人體尿液樣本儲(chǔ)備于-18℃冷藏、解凍后過0.22μm微孔濾膜后，取濾液稀釋10倍后用于超高效液相色譜分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 校準(zhǔn)曲線及精密度

在0.2-10.0μg/mL濃度范圍內(nèi)，兩種目標(biāo)組分線性相關(guān)性良好，相關(guān)系數(shù)R均在0.9999以上。

為考察儀器精密度，本研究分別對(duì)兩種目標(biāo)組分濃度為0.5、2.0、10.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行6次重復(fù)性考察（結(jié)果以相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD計(jì)）。結(jié)果表明：安非他明在三個(gè)濃度級(jí)別的保留時(shí)間RSD范圍為0.0346%-0.388%之間，峰面積RSD范圍為0.611%-2.56%之間;氯胺酮在三個(gè)濃度級(jí)別的保留時(shí)間RSD范圍為0.0355%-0.0829%之間，峰面積RSD范圍為0.378%-4.30%之間，匯總結(jié)果見表1及表2。

2.2 方法回收率及檢出限

選擇在健康人體尿液中添加低中高三種濃度的安非他明和氯胺酮標(biāo)準(zhǔn)品，采用前文所述前處理方法處理樣品，每一濃度平行處理3份，計(jì)算回收率和方法學(xué)精密度，回收率范圍為84.73%-106.40%，RSD范圍為1.31%-4.12%，結(jié)果滿足分析要求，結(jié)果見表3。

為考察儀器對(duì)兩種目標(biāo)組分的靈敏度，使用溶劑和空白尿樣基質(zhì)分別配制濃度為0.5μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，連續(xù)分析6針以計(jì)算儀器靈敏度并考察尿液基質(zhì)對(duì)儀器響應(yīng)值的影響，如表4所示，尿液基質(zhì)對(duì)儀器靈敏度影響較小，通過溶劑標(biāo)液和基質(zhì)標(biāo)液計(jì)算出的儀器檢出限、定量限相差不大。

2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)論

本研究使用超高效液相色譜儀結(jié)合紫外檢測(cè)器，測(cè)定尿樣中安非他明和氯胺酮兩種常見毒品。該方法簡(jiǎn)單快速，避免了復(fù)雜的前處理過程。利用超高效液相色譜儀實(shí)現(xiàn)短時(shí)間內(nèi)快速分析兩種目標(biāo)物，具有分析速度快、靈敏度高的特點(diǎn)，能夠用于涉嫌吸毒人員檢測(cè)和興奮劑快速篩查。

參考文獻(xiàn)：

[1]龔冶，黃泓杰，黃敘金，代勇.反相高效液相色譜法測(cè)定“K粉”檢材法及其應(yīng)用[J].四川警察學(xué)院學(xué)報(bào)，2018，30（05）：10-13.

[2]熊冰，周長(zhǎng)春，盧大喬，金億里.吸食氯胺酮致泌尿系統(tǒng)損害12例分析[J].浙江實(shí)用醫(yī)學(xué)，2012，17（04）：272-273+277.

[3]張成功，趙倩，陳波，馬銘.液-液-液三相液相微萃取-高效液相色譜法檢測(cè)尿樣中的安非他明和氯胺酮[J].色譜，2007（05）：641-645.

[4]吳燕，韓光宇，徐湛.徐州市區(qū)應(yīng)征青年嗎啡/甲基安非他明檢測(cè)結(jié)果分析[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2010，48（29）：112+137.

[5]張成功，趙倩，陳波，馬銘.液-液-液三相液相微萃取-高效液相色譜法檢測(cè)尿樣中的安非他明和氯胺酮[J].色譜，2007（05）：641-645.

[6]韋超，楊懷，蔣衛(wèi)華. 尿樣中甲基安非他明GC-MS分析[A]. 中國(guó)質(zhì)譜學(xué)會(huì)有機(jī)質(zhì)譜專業(yè)委員會(huì).中國(guó)有機(jī)質(zhì)譜學(xué)第十三屆全國(guó)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C].中國(guó)質(zhì)譜學(xué)會(huì)有機(jī)質(zhì)譜專業(yè)委員會(huì)：《分析測(cè)試學(xué)報(bào)》編輯部，2005：3.

[7]邢麗梅，譚家鎰，趙彥軍.尿中甲基安非他明二硝基苯甲酰衍生化GC-ECD分析[J].中國(guó)法醫(yī)學(xué)雜志，2005（01）：44-45.

作者簡(jiǎn)介：夏久智（1985.07-），男，碩士，中級(jí)，盤錦市公安局刑事技術(shù)支隊(duì)。