亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        山東省水貂養(yǎng)殖場流感病毒防控及感染情況調(diào)查

        2021-11-10 11:19:46薛瑞雪陳峰藺曉月張棟王苗利王貴升周業(yè)森
        中國畜禽種業(yè) 2021年10期
        關(guān)鍵詞:水貂流感病毒禽流感

        薛瑞雪 陳峰 藺曉月 張棟 王苗利 王貴升* 周業(yè)森

        (1,山東省動物疫病預(yù)防與控制中心 250100;2,青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院 266109)

        A 型流感病毒屬于正黏病毒科流感病毒屬,是一種有囊膜的單股負(fù)鏈RNA 病毒。根據(jù)血凝素(Hemagglutinin,HA)與神經(jīng)氨酸酶(Neuraminidase,NA)的抗原性差異,目前將A 型禽流感病毒分為18 種HA 亞型和11 種NA 亞型,其中大部分亞型流感病毒來源于禽類[1]。自1994 年我國首次報道雞群中分離出H9N2亞型禽流感病毒以來[2],該亞型流感病毒在我國廣泛存在,持續(xù)困擾養(yǎng)禽業(yè)[3,4]。

        水貂是一種常見的經(jīng)濟動物,水貂養(yǎng)殖業(yè)也是山東省畜牧業(yè)的重要組成部分。近幾年國內(nèi)外關(guān)于水貂感染流感病毒的報道日益增多,2015 年,我國東部地區(qū)兩個水貂場爆發(fā)了H5N1亞型禽流感病毒,給當(dāng)?shù)仞B(yǎng)貂業(yè)造成較大的經(jīng)濟損失[5]。而H9N2亞型禽流感病毒在水貂群傳播過程中,有的毒株已獲得適應(yīng)哺乳動物突變,使其更容易感染水貂及人類[6]。因此,禽流感病毒在給水貂業(yè)帶來巨大經(jīng)濟損失的同時還存在潛在的公共衛(wèi)生風(fēng)險,所以,加強對水貂流感病毒的監(jiān)測和防控可避免造成公共衛(wèi)生安全隱患。

        1 調(diào)查方法

        1.1 網(wǎng)上問卷調(diào)查

        網(wǎng)上設(shè)置調(diào)查內(nèi)容:養(yǎng)殖場地點、飼料種類、養(yǎng)殖環(huán)境、免疫接種等問題。將問題發(fā)送給山東省主要的水貂養(yǎng)殖戶填寫調(diào)查問卷。經(jīng)過30d 共收集不同地市養(yǎng)殖戶114 家,對調(diào)查結(jié)果進(jìn)行整理、匯總,得到相關(guān)數(shù)據(jù)。

        1.2 樣品采集及檢測

        1.2.1 樣品及主要試劑

        2020 年8 月~12 月從威海、泰安、菏澤、濰坊水貂養(yǎng)殖場共采集181 份發(fā)病水貂肺臟器官。

        Prime Script One Step RT-PCR kit Ver.2、RNA 抽提試劑TRIzol、Gel Extraction Mini Kit、pMD18-T 克隆載體、Top 10 感受態(tài)細(xì)胞、DL2000 DNA Marker 均購自TaKaRa 公司;A型流感病毒熒光定量RT-PCR 檢測試劑盒;H9亞型、H7亞型和H5亞型禽流感分型熒光定量RT-PCR 檢測試劑盒購自世紀(jì)元亨動物防疫技術(shù)有限公司。

        1.2.2 樣品檢測

        取適量各病料組織置于離心管中,加入適量的pH 7.2 的PBS 研磨成勻漿,反復(fù)凍融3 次,8000 r/min 離心5 min,取各病料上清液200 μl,按照RNA 提取試劑盒說明書從病料中提取RNA,以其為模板,采用A 型流感病毒熒光定量RT-PCR檢測試劑盒對121 份樣品進(jìn)行檢測。

        1.2.3 引物設(shè)計

        根據(jù)GenBank 收錄的有關(guān)流感病毒序列,用Primer 5.0 設(shè)計流感病毒HA 和NA 擴增引物(表1)。引物由上海生工生物工程技術(shù)有限公司合成。

        表1 全基因擴增引物

        1.2.4 目的基因的RT-PCR 擴增與克隆測序分析

        取各病料上清液200 μl,按照TRIzol 說明書方法提取樣品總RNA。一步法RT-PCR 反應(yīng)體系總體積為50 μl:2x1 Step Buffer 25 μl,Prime Script 1 Step Enzyme Mix 2 μl,引物(10 μmol/L)各2 μl,RNA 2 μl,RNase Free ddH2O 17 μl。反應(yīng)條件為:50 ℃30 min,95℃3 min,1 個循環(huán);94 ℃30 s,53℃30 s,72 ℃1 min,32 個循環(huán);72 ℃10 min。PCR 產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測。膠回收產(chǎn)物克隆至pMD18-T 克隆載體由上海生工生物工程技術(shù)有限公司測序中心進(jìn)行測序鑒定。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 水貂飼料種類

        養(yǎng)殖場飼喂飼料的種類有生鮮料,熟化后加工飼料和顆粒料。而生鮮料由于沒有經(jīng)過熟化,常可作為一些病毒細(xì)菌的傳染源。其中流感病毒可通過飼喂未熟制加工過的生鮮飼料感染水貂。對濰坊、日照、菏澤、威海、濱州5 個地市114 家水貂養(yǎng)殖場進(jìn)行了調(diào)查問卷,由圖1 可知,在水貂飼料中生鮮料所占比例較大,尤其是濰坊地區(qū)生鮮飼料所占比例最大,而濰坊地區(qū)不靠近海,生鮮飼料主要以禽類產(chǎn)品為主,這也為禽流感病毒在水貂中的傳播帶來了更大的可能。

        圖1 不同地市生鮮料使用情況

        2.2 養(yǎng)殖場養(yǎng)殖模式、周圍環(huán)境有害傳播媒介及應(yīng)對措施

        經(jīng)調(diào)查,大部分水貂養(yǎng)殖屬于院舍式養(yǎng)殖模式,周圍活動的野鳥也會為流感病毒的傳播帶來可能。由圖2 可知,養(yǎng)殖場周圍有野鳥活動的養(yǎng)殖場36 家,占總養(yǎng)殖場數(shù)量的31.58%,這些養(yǎng)殖場在棚舍內(nèi)放置藥餌對鳥類進(jìn)行誘殺(占8.77%),有些養(yǎng)殖場使用專用料蓋遮擋(占5.26%),也有些噴灑專用藥物(占7.02%),這措施在一定程度上減少了鳥類對水貂健康養(yǎng)殖的影響。但仍有一部分水貂養(yǎng)殖場未采取相應(yīng)的措施(占10.53%),這將增加水貂感染的可能性。

        圖2 養(yǎng)殖場周圍環(huán)境及采取措施

        2.3 發(fā)病水貂處理方式

        由圖3 可知,水貂發(fā)病后仍有部分養(yǎng)殖場未經(jīng)消毒直接銷售,給流感病毒的傳播帶來可能。但大部分養(yǎng)殖場都會處理,如無害化處理或消毒后再銷售,這說明大部分養(yǎng)殖戶有較強的疫病控制意識。

        圖3 發(fā)病水貂處理方式

        2.4 流感疫苗免疫接種

        經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn),當(dāng)前大多數(shù)養(yǎng)殖場的免疫只針對犬瘟熱和細(xì)小病毒,且目前沒有針對水貂流感的商品化疫苗。沒有疫苗保護增加了水貂感染流感病毒發(fā)病的可能。

        2.5 臨床樣品流感病毒檢測

        采用A 型流感病毒熒光定量RT-PCR 檢測試劑盒對181份樣品進(jìn)行檢測,檢測結(jié)果顯示有2 份為流感病毒陽性,這兩份病料來源于一個養(yǎng)殖場。經(jīng)H9亞型、H7亞型和H5亞型禽流感分型熒光定量RT-PCR 檢測試劑盒檢測顯示均為H9亞型禽流感病毒。

        2.6 HA 和NA 基因遺傳進(jìn)化分析

        為進(jìn)一步分析本次鑒定毒株的遺傳進(jìn)化關(guān)系,依據(jù)國內(nèi)外流行毒株及國內(nèi)外參考毒株核苷酸序列的同源性,使用MegAlign 軟件繪制了HA 基因(圖4)和NA 基因(圖5)的系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹。結(jié)果表明,該株病毒的HA 和NA 基因均屬于Y280-like 毒株,為H9N2亞型禽流感病毒。

        圖4 H9N2 亞型禽流感病毒HA 基因系統(tǒng)進(jìn)化樹

        圖5 H9N2 亞型禽流感病毒NA 基因系統(tǒng)進(jìn)化樹

        經(jīng)與養(yǎng)殖場聯(lián)系發(fā)現(xiàn),該場水貂的飼喂方式為生鮮料飼喂,且養(yǎng)殖模式為庭院式養(yǎng)殖,未采取野鳥控制措施,并未免疫流感疫苗。這有可能是該養(yǎng)殖場飼喂了發(fā)病禽的生鮮料導(dǎo)致水貂感染流感病毒。

        3 討論

        流感病毒為RNA 病毒,基因組很容易發(fā)生變異,由于缺乏糾錯機制,在病毒復(fù)制過程中產(chǎn)生的錯誤一代代積累,使病毒發(fā)生質(zhì)的變異。目前國內(nèi)隨著水貂感染流感病例越來越多,流感在水貂中感染的情況已不容忽視。一方面,低致病性流感病毒感染后會造成幼貂存活率下降,高致病性禽流感病毒會造成高死亡率,經(jīng)濟損失嚴(yán)重[6]。另一方面,流感病毒長期對水貂感染適應(yīng)后會增強對哺乳動物的適應(yīng)性,對人類公共衛(wèi)生安全造成較大威脅。有研究發(fā)現(xiàn),禽源H9N2亞型流感病毒在水貂群傳播過程中已獲得Q226L 的突變,使得該病毒易與哺乳動物上呼吸道唾液酸受體結(jié)合,更容易感染人類[7]。而且,H5亞型流感病毒的T160A 突變也是禽流感病毒適應(yīng)哺乳動物的突變[8]。

        本次養(yǎng)殖場樣品檢測到的流感病毒HA 和NA 遺傳進(jìn)化分析顯示均屬于Y280-like 亞系,與近年其他省份禽源H9N2亞型流感病毒檢測結(jié)果一致[9-10]。提示本次水貂感染為禽源流感病毒感染所致。因此,應(yīng)加強水貂中流感病毒的監(jiān)測和防控,盡快建立水貂流感病毒的監(jiān)測機制,提高養(yǎng)殖戶的生物安全意識。

        猜你喜歡
        水貂流感病毒禽流感
        抗甲型流感病毒中藥活性成分的提取
        防治H7N9 禽流感 家長知多少
        啟蒙(3-7歲)(2017年4期)2017-06-15 20:28:55
        高原地區(qū)流感病毒培養(yǎng)的條件優(yōu)化
        流感病毒分子檢測技術(shù)的研究進(jìn)展
        水貂病毒性腸炎研究進(jìn)展
        不同鋅源及鋅水平對冬毛生長期水貂營養(yǎng)物質(zhì)消化率影響的研究
        全球水貂產(chǎn)量下降
        基于HRP直接標(biāo)記的流感病毒H1N1電化學(xué)免疫傳感器
        水貂的給藥方法
        雞大腸桿菌病并發(fā)禽流感的診治
        人妻忍着娇喘被中进中出视频| 国内偷拍国内精品多白86| 成人欧美一区二区三区黑人| 小荡货奶真大水真多紧视频 | 国产偷v国产偷v亚洲偷v| 国产又粗又猛又黄色呦呦| 亚洲国产精品情侣视频| 人妻少妇精品视频专区| 国内精品久久久久久无码不卡| 精品无码国产一二三区麻豆| 日本高清一区二区不卡| 国产精品免费无遮挡无码永久视频 | 国语对白做受xxxxx在| 亚洲国产精品无码久久电影| 一区二区三区不卡免费av| 中美日韩在线一区黄色大片| 强奷乱码中文字幕| 女同啪啪免费网站www| 99久久国产一区二区三区| 国产一级二级三级在线观看av| 丰满少妇被粗大的猛烈进出视频| 国产黑丝在线| 日韩精品高清不卡一区二区三区| 亚洲天堂成人av影院| 精品免费看国产一区二区| 亚洲成人免费无码| 日韩精品极品免费在线视频| 亚洲成a人片在线观看无码专区| 亚洲av无码一区二区三区系列| 在线看亚洲十八禁网站| 国产精品日韩av一区二区| 国产乱子伦农村xxxx| 免费毛片视频网站| 免费av在线 国产精品| 欧美激情综合色综合啪啪五月 | 在线精品免费观看| 日韩精品极品视频在线观看蜜桃| 国产一级二级三级在线观看视频| 欧美金发尤物大战黑人| 亚洲ⅤA中文字幕无码| 免费人妻精品一区二区三区|