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        光合細(xì)菌和生物炭對(duì)污染土壤中鉻的穩(wěn)定化效果及小白菜生長(zhǎng)的影響

        2021-11-09 03:49:12任曉斌白紅娟衛(wèi)燕紅馬瑞賈萬利楊官娥
        關(guān)鍵詞:中鉻小白菜菌株

        任曉斌,白紅娟*,衛(wèi)燕紅,馬瑞,賈萬利,楊官娥

        (1.中北大學(xué)環(huán)境與安全工程學(xué)院,太原 030051;2.山西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院,太原 030001)

        隨著鉻酸鹽生產(chǎn)、電鍍、制革等工業(yè)活動(dòng)的發(fā)展[1],越來越多的鉻廢棄物、鉻渣排入土壤中。鉻在土壤中最常見的化合物是以三價(jià)和六價(jià)形態(tài)存在,而六價(jià)鉻一般不易被土壤中的有機(jī)物和膠體吸附,其在土壤中活性較高,與三價(jià)鉻相比更容易被植物吸收,而且其還會(huì)通過食物鏈影響人類健康。三價(jià)鉻主要以等形式存在于環(huán)境中,相比六價(jià)鉻,三價(jià)鉻流動(dòng)性小,對(duì)環(huán)境的危害較弱[2?3]。因此,近幾年環(huán)境介質(zhì)中六價(jià)鉻污染的去除受到眾多學(xué)者關(guān)注[4?7]。

        對(duì)于鉻污染土壤,現(xiàn)在主要的修復(fù)方法有電動(dòng)修復(fù)法、化學(xué)還原法和微生物修復(fù)法。其中微生物修復(fù)法是一種環(huán)境友好、成本低的治理技術(shù),具有較好的發(fā)展前景。許多微生物如枯草芽孢桿菌(Bacillus sub?tilis)、蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)[8?9]已被分離出來并發(fā)現(xiàn)對(duì)Cr(Ⅵ)污染土壤有良好的修復(fù)效果。熊智慧等[10]的研究發(fā)現(xiàn),接種Alcaligenessp.qz?1改善了鉻脅迫下玉米的生長(zhǎng)特性,增加了玉米根部對(duì)鉻的吸收,降低了鉻對(duì)玉米的毒害。杜艷影等[11]通過實(shí)驗(yàn)證實(shí),S.oneidensisMR?1 在對(duì)Cr(Ⅵ)進(jìn)行還原的同時(shí)也伴有少量的吸附作用。

        生物炭(Biochar)是近年來新興的一種新型高效土壤改良材料,含碳豐富,可增加農(nóng)田土壤碳匯,提高土壤肥力。而且其孔隙度和比表面積較大,具有很好的吸附性能,能夠?yàn)槲⑸锾峁└街d體,也為微生物的生長(zhǎng)提供碳源和營(yíng)養(yǎng)源,對(duì)土壤重金屬污染的鈍化具有良好的效果。研究表明,施加生物炭可以顯著降低土壤重金屬活性[12],并減少農(nóng)作物對(duì)重金屬的吸收[13]。此外,生物炭改良土壤后不會(huì)造成二次污染,也不易發(fā)生反彈,即生物炭對(duì)土壤重金屬的修復(fù)具有持久性[14]。因此,利用微生物和生物炭聯(lián)合修復(fù)重金屬污染土壤受到了眾多學(xué)者的重視,夏夢(mèng)蓮等[6]的研究發(fā)現(xiàn),巴氏芽孢桿菌菌液與生物炭復(fù)合修復(fù)鉻污染土壤的效果要優(yōu)于菌液和生物炭的單獨(dú)修復(fù)。姜慶宏等[7]的研究發(fā)現(xiàn),利用生物炭?藤黃微球菌復(fù)合材料修復(fù)Cr(Ⅵ)污染土壤,能有效降低土壤中Cr(Ⅵ)含量,而且對(duì)玉米的促生效果顯著。

        光合細(xì)菌是具有原始光能合成體系的原核生物,能在厭氧光照條件下進(jìn)行不放氧光合作用。特別是紫色非硫細(xì)菌中的球形紅細(xì)菌(Rhodobacter sphaeroi?des),其不僅能在厭氧光照條件下光能自養(yǎng)生長(zhǎng),而且還能在好氧黑暗條件下利用有機(jī)物生長(zhǎng),這種隨著生活環(huán)境而靈活改變代謝類型的特征,使其較其他微生物具有優(yōu)越性[15],同時(shí),該菌還是一種益生菌。LI等[16]和FAN 等[17]利用球形紅細(xì)菌修復(fù)鎘或鉛污染的土壤,修復(fù)后的土壤上種植的小麥根和葉中鎘和鉛的積累都有所減少。前期研究工作表明球形紅細(xì)菌H菌株能有效還原水中Cr(Ⅵ),其機(jī)制包括生物還原和積累[18]。但有關(guān)球形紅細(xì)菌H 菌株和生物炭聯(lián)合修復(fù)鉻污染土壤的研究鮮有報(bào)道,基于此,本研究采用球形紅細(xì)菌H菌株和生物炭為修復(fù)材料,模擬鉻污染土壤為研究對(duì)象,在H菌株處理過程中輔以添加生物炭,通過盆栽試驗(yàn)研究了H 菌株、生物炭及H 菌株與生物炭聯(lián)合對(duì)鉻污染土壤中鉻的穩(wěn)定化效果以及對(duì)小白菜生長(zhǎng)的影響,以期為光合細(xì)菌和生物炭在鉻污染土壤修復(fù)方面提供理論和實(shí)踐依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)材料

        試驗(yàn)土樣取自山西省太原市尖草坪區(qū)上蘭村,0~20 cm 土層,按照國(guó)際制土壤質(zhì)地分類屬于壤土。土樣取回實(shí)驗(yàn)室后去除雜質(zhì),風(fēng)干磨碎過2 mm 尼龍篩,將一定量的K2Cr2O(7分析純)溶解于去離子水中,攪拌均勻,配制成鉻濃度為50 mg·kg?1的土壤,平衡30 d,備用。試驗(yàn)所用光合細(xì)菌H 菌株系紫色非硫菌群紅細(xì)菌屬的球形紅細(xì)菌(Rhodobacter sphaeroides),由本實(shí)驗(yàn)室提供。研究所用生物炭購自江蘇華豐農(nóng)業(yè)生物工程有限公司,是由小麥秸稈在裂解爐600 ℃限氧環(huán)境下熱裂解2 h所得,將其磨細(xì)過1 mm篩備用,生物炭理化性質(zhì)由公司提供。供試作物選用四季小白菜。土壤和生物炭的基本性質(zhì)見表1和表2。

        表1 供試土壤的基本性質(zhì)Table 1 The basic properties of the tested soil

        表2 生物炭的理化性質(zhì)Table 2 Physical?chemical properties of biochar

        1.2 試驗(yàn)方法

        菌種培養(yǎng):在光合細(xì)菌液體培養(yǎng)基中接種一定量的指數(shù)生長(zhǎng)期的菌體培養(yǎng)液,置于人工氣候箱(溫度為30 ℃、光照強(qiáng)度為2 500 lx)培養(yǎng)至OD590nm為1.2,經(jīng)5 000 r·min?1離心分離30 min,棄上清液,加入等量超純水制備成菌懸液(1.0×109CFU·mL?1),備用。CK組不添加生物炭和菌懸液,用等量的超純水代替菌懸液。

        將平衡好的土壤平均分裝到塑料花盆中(規(guī)格為上口徑20 cm,下口徑12 cm,高8 cm),每盆中的土壤質(zhì)量為1 kg,將生物炭和制備好的菌懸液按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)加入到土壤中,混合均勻,具體設(shè)計(jì)見表3。將每個(gè)花盆用保鮮膜密封,并在人工氣候箱中(溫度為30 ℃、光照強(qiáng)度為2 500 lx)培養(yǎng)30 d,試驗(yàn)過程中每隔2 d加入超純水保持土壤含水率為60%(烘干?稱量法測(cè)定),1個(gè)月后,測(cè)定土壤中酶活性、H菌株的數(shù)量以及鉻的形態(tài)含量。

        表3 不同處理組中生物炭和菌株的添加量Table 3 Correspondence table of biochar and strain addition amount in different treatment groups

        1.3 盆栽試驗(yàn)

        選取飽滿、大小一致的小白菜種子浸種、催芽后均勻種植于上述花盆中,每盆定植5 棵白菜,間隔均勻,每組3 個(gè)平行,試驗(yàn)過程中每隔2 d 加入超純水保持土壤含水率為60%(烘干?稱量法測(cè)定),隨機(jī)置于室內(nèi)自然光下生長(zhǎng),40 d后收獲小白菜。先用自來水將植株沖洗干凈,再用去離子水潤(rùn)洗,吸干表面水分后分成地上部分和地下部分,保存,待測(cè)。

        1.4 測(cè)定項(xiàng)目與方法

        土壤酶活性的測(cè)定參照文獻(xiàn)[19]中的方法:過氧化氫酶活性采用高錳酸鉀滴定法測(cè)定;脲酶活性采用苯酚鈉?次氯酸鈉比色法測(cè)定;轉(zhuǎn)化酶活性采用二硝基水楊酸比色法測(cè)定;堿性磷酸酶活性采用磷酸苯二鈉比色法測(cè)定。

        菌液和土壤中H菌株的數(shù)量測(cè)定:采用稀釋平板培養(yǎng)法計(jì)數(shù)。

        土壤中5 種形態(tài)鉻的提取方法及測(cè)定:稱取部分烘干土樣,采用Tessier 連續(xù)提取法[20],分別提取可交換態(tài)、碳酸鹽結(jié)合態(tài)、鐵錳氧化物結(jié)合態(tài)、有機(jī)質(zhì)結(jié)合態(tài)、殘?jiān)鼞B(tài),土壤樣品用 HNO3?HCl?HClO4電熱板消解,采用ICP?OES 進(jìn)行鉻含量的測(cè)定。生物可利用性=(可交換態(tài)+碳酸鹽結(jié)合態(tài))/5種形態(tài)總和×100%

        對(duì)CK、T6 處理組采用X 射線光電子能譜儀分析C(rⅥ)污染土壤修復(fù)前后的元素組成與價(jià)態(tài)變化;利用XRD 衍射分析儀分析Cr(Ⅵ)污染土壤修復(fù)前后的晶體結(jié)構(gòu)。

        植株中鉻含量的測(cè)定:收獲植株的根、莖、葉于105 ℃下殺青0.5 h,75 ℃烘干至恒質(zhì)量,稱取適量的地上部分和根系干質(zhì)量,用HNO3∶HClO4=4∶1進(jìn)行消解,消解液中鉻含量采用電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀(ICP?OES)測(cè)定。采用轉(zhuǎn)移系數(shù)(TF)表示鉻在小白菜各部位中的遷移特性。TF=植株地上部分的鉻含量(mg·kg?1)/植株根系的鉻含量(mg·kg?1)

        小白菜的株高和根長(zhǎng):收獲小白菜后,用自來水清洗植株和根部,測(cè)量3次株高和根長(zhǎng),并取平均值。

        植物中葉綠素含量的測(cè)定采用丙酮浸提法[21]??扇苄蕴呛康臏y(cè)定采用苯酚硫酸法[22]。

        1.5 數(shù)據(jù)處理與分析

        試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2010 和Origin 8.5軟件分析與作圖,并使用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析,采用Duncan 雙因素方差分析進(jìn)行處理間差異顯著性檢驗(yàn)。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 不同處理對(duì)鉻污染土壤中酶活性和H 菌株數(shù)量的影響

        土壤中的酶活性與土壤肥力水平密切相關(guān),本研究對(duì)鉻污染土壤中修復(fù)后的酶活性和培養(yǎng)30 d 的H菌株的數(shù)量進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果見表4。與CK 組相比,只添加H菌株時(shí),4種酶活性在T2處理組增加效果最顯著,只添加生物炭時(shí),T4 處理組效果最佳,可見,H 菌株和生物炭均有助于土壤酶活性的提高。當(dāng)利用二者聯(lián)合修復(fù)后,鉻污染土壤中4 種酶活性均顯著升高,過氧化氫酶變化趨勢(shì)表現(xiàn)為T6>T7>T5>T10>T11>T9、脲酶為T6>T7>T5>T10>T11>T9、轉(zhuǎn)化酶為T6>T7>T11>T10>T5>T9、堿性磷酸酶為T6>T7>T10>T11>T5>T9。T6 處理組變化最顯著(P<0.05),過氧化氫酶、脲酶、轉(zhuǎn)化酶和堿性磷酸酶活性比CK組分別升高了58.72%、98.25%、136.58%和61.03%。結(jié)果表明H菌株和生物炭的聯(lián)合作用對(duì)土壤酶活性有顯著影響(P<0.05)。另外,H 菌株添加到鉻污染土壤中30 d后,菌落數(shù)量有所減少。

        表4 不同處理對(duì)鉻污染土壤中酶活性和H菌株數(shù)量的影響Table 4 Effects of different treatment groups on enzyme activity and number of H strain in chromium contaminated soil

        2.2 不同處理對(duì)污染土壤中鉻形態(tài)分布的影響

        圖1 是不同處理對(duì)污染土壤中鉻形態(tài)分布的影響。由圖1 可知,H 菌株和生物炭單一及聯(lián)合施用都會(huì)改變土壤中鉻的形態(tài)分布,CK 組土壤中鉻以殘?jiān)鼞B(tài)和可交換態(tài)為主。經(jīng)修復(fù)劑處理后,各處理組土壤中鉻的碳酸鹽結(jié)合態(tài)和可交換態(tài)含量降低,殘?jiān)鼞B(tài)和有機(jī)結(jié)合態(tài)含量增加,鐵錳氧化物結(jié)合態(tài)含量變化較小。單加H 菌株時(shí),T2 處理組效果最好,生物可利用性比CK 組降低了11.39%;單加生物炭時(shí),T4 處理組效果最佳,生物可利用性比CK 組降低了10.31%;當(dāng)H 菌株和生物炭聯(lián)合修復(fù)時(shí),T5、T6、T7、T9、T10 和T11 處理與CK 組相比,生物可利用性分別降低了13.03%、17.42%、15.11%、11.47%、14.41%和12.93%,可見,生物可利用性在H菌株和生物炭的聯(lián)合作用下顯著降低,并且T6處理修復(fù)效果最好(P<0.05)。

        2.3 機(jī)理分析

        為了探究H 菌株和生物炭對(duì)鉻污染土壤的修復(fù)機(jī)制,對(duì)修復(fù)前后的土壤進(jìn)行XPS 分析和XRD 分析。圖2a和圖2b分別為鉻污染土壤修復(fù)前后的XPS全譜圖和修復(fù)后土壤中Cr 元素的XPS 窄譜圖。由圖2 可以看出,修復(fù)前后土壤中主要含C、O、Cr和N 元素,Cr元素(580.7 eV)為Cr(Ⅵ),且修復(fù)后的土壤在578.5 eV 處有新峰出現(xiàn),該峰已被證實(shí)是Cr2O3的峰,說明在Cr(Ⅵ)污染土壤的修復(fù)過程中,部分Cr(Ⅵ)被還原為Cr(Ⅲ)。

        圖3 是Cr(Ⅵ)污染土壤修復(fù)前后的XRD 圖,由圖3可知,修復(fù)前土壤中鉻主要以K2Cr2O7的形式存在,其衍射峰出現(xiàn)在2θ為26.7°和29.5°處,修復(fù)后Cr(Ⅵ)污染土壤在 2θ為 24.5°、33.6°、36.1°、39.9°和54.9°處出現(xiàn)了 Cr2O3沉淀峰,在2θ為 49.1°處還出現(xiàn)了 HCrO2的峰,這是造成土壤中Cr(Ⅲ)存在的主要原因。并且修復(fù)后土壤中K2Cr2O7含量減少,其中一部分轉(zhuǎn)化為Cr2O3。

        2.4 盆栽試驗(yàn)結(jié)果

        2.4.1 不同處理對(duì)鉻污染土壤中小白菜各組織鉻含量的影響

        不同處理對(duì)鉻污染土壤中小白菜各組織鉻含量的影響見表5。由表5 可知,各處理中根系的鉻含量要高于地上部分,即鉻主要在根中積累;經(jīng)修復(fù)劑處理后,小白菜各組織鉻含量均有所下降,相應(yīng)的轉(zhuǎn)移系數(shù)也在降低。在相同生物炭添加量條件下,H 菌株添加量為108CFU·g?1時(shí),小白菜地上部分和根系的鉻含量降低顯著(P<0.05),相同H 菌株添加量條件下,生物炭添加量為1%的效果較好,同時(shí),在H 菌株和生物炭的聯(lián)合作用下效果更加顯著(P<0.05),并且在T6 處理時(shí),兩者達(dá)到最佳配施量,與CK 組相比,地上部分和根系鉻含量分別降低了26.67%和14.84%。

        表5 不同處理對(duì)鉻污染土壤中小白菜各組織鉻含量的影響(mg·kg?1)Table 5 Effects of different treatment groups on the chromium content of pakchoi tissues in chromium contaminated soil(mg·kg?1)

        2.4.2 不同處理對(duì)鉻污染土壤中小白菜株高和根長(zhǎng)的影響

        不同處理對(duì)鉻污染土壤中小白菜株高和根長(zhǎng)的影響見圖4。由圖4可知,單加H 菌株時(shí),小白菜的株高和根長(zhǎng)隨著菌株添加量的增加先升高后降低,并且在添加量為 108CFU·g?1時(shí)效果最好,此時(shí)與 CK 組相比,株高和根長(zhǎng)分別增加了6.5%和5.92%;單加生物炭時(shí)也表現(xiàn)出相同的規(guī)律,在生物炭添加量為1%時(shí)效果最好,株高和根長(zhǎng)較CK 組提高了5.26% 和4.37%,生物炭添加量為3%的處理對(duì)小白菜生長(zhǎng)的促進(jìn)作用減弱,但始終高于CK 組。當(dāng)H 菌株和生物炭聯(lián)合修復(fù)時(shí),相同H 菌株添加量條件下,生物炭添加量為1%的效果要優(yōu)于3%,相同生物炭添加量條件下,H菌株添加量為108CFU·g?1時(shí)效果顯著(P<0.05),并且在H 菌株添加量為108CFU·g?1且生物炭添加量為1%時(shí),小白菜的株高和根長(zhǎng)增加最顯著(P<0.05),分別比CK組增加了13.25%和10.63%。

        2.4.3 不同處理對(duì)鉻污染土壤中小白菜葉綠素和可溶性糖含量的影響

        不同處理對(duì)鉻污染土壤中小白菜葉綠素和可溶性糖含量的影響見圖5。由圖5 可知,一定濃度的H菌株可以促進(jìn)鉻污染土壤中小白菜葉綠素和可溶性糖含量升高,且最適添加量為108CFU·g?1,與CK 組相比,葉綠素和可溶性糖含量分別增加了10.81%和11.21%;而且添加適量的生物炭也會(huì)對(duì)小白菜的生長(zhǎng)有利,當(dāng)生物炭添加量為1%時(shí),表現(xiàn)出較好的效果,與CK組相比,小白菜的葉綠素和可溶性糖含量分別增加了9.84%和10.38%;當(dāng)H菌株和生物炭聯(lián)合修復(fù)時(shí),相同H菌株添加量條件下,生物炭添加量為1%時(shí)效果顯著,相同生物炭添加量條件下,H 菌株添加量為108CFU·g?1時(shí)效果顯著,并且在H 菌株添加量為108CFU·g?1和生物炭添加量為1%時(shí),小白菜的葉綠素和可溶性糖含量增加最顯著(P<0.05),分別比CK組增加了30.08%和17.39%。

        3 討論

        土壤酶參與土壤中各種生物化學(xué)過程,是判斷土壤生物化學(xué)過程強(qiáng)度及評(píng)價(jià)土壤肥力的重要指標(biāo)之一[23]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,H 菌株和生物炭及其聯(lián)合作用對(duì)土壤中的酶活性顯著提高,特別是在兩者共施條件下的促進(jìn)作用更加明顯,這與李琋等[24]利用微生物協(xié)同生物炭修復(fù)石油烴?鎘復(fù)合污染土壤得出的結(jié)論一致,可能原因是H菌株以加入的生物炭為能源在土壤中進(jìn)行細(xì)胞代謝,加快土壤中氮素循環(huán)和有機(jī)磷的水解,增加了全氮、速效氮和速效磷含量,進(jìn)而對(duì)脲酶和堿性磷酸酶活性產(chǎn)生了顯著影響。蔗糖酶活性可以表征土壤有機(jī)碳的轉(zhuǎn)化情況[19],本研究中,施用生物炭增加了蔗糖酶含量,有利于土壤有機(jī)質(zhì)的提高,促進(jìn)了過氧化氫酶的活性。同時(shí),鉻化學(xué)形態(tài)的改變對(duì)土壤酶活性也有不同程度的影響,結(jié)合圖1 可知,H 菌株和生物炭可以使土壤中鉻的生物毒性降低,因此有利于土壤中酶活性的升高。本研究結(jié)果也表明(表4),添加適量的生物炭會(huì)促進(jìn)H 菌株數(shù)量的增加,主要原因是生物炭獨(dú)特的結(jié)構(gòu)能夠?yàn)镠菌株提供有利的繁殖場(chǎng)所,且其含有的豐富營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有利于H菌株的生長(zhǎng)[25]。

        除此之外,微生物和生物炭還可以通過改變土壤中重金屬的形態(tài)分布來降低其生物有效性,進(jìn)而減少植物對(duì)重金屬的積累。張海波等[26]的研究發(fā)現(xiàn),菌糠生物炭可促進(jìn)土壤中的Pb、Cd 由活性較高的形態(tài)向較穩(wěn)定的形態(tài)轉(zhuǎn)化,降低Pb、Cd 的生物有效性,進(jìn)而減少甜菜各部位對(duì)Pb、Cd的吸收,促進(jìn)甜菜生長(zhǎng)。姜慶宏等[7]通過實(shí)驗(yàn)得出,藤黃微球菌和生物炭復(fù)合,對(duì)Cr(Ⅵ)污染土壤修復(fù)效果顯著,各個(gè)處理均減少了玉米地上、地下部分對(duì)鉻的吸收,降低了鉻通過食物鏈對(duì)人體產(chǎn)生的危害。本研究結(jié)果顯示,H 菌株和生物炭及其聯(lián)合作用下鉻污染土壤中小白菜各組織鉻含量均顯著減少,且鉻的5 種形態(tài)含量也發(fā)生明顯變化,即由不穩(wěn)定態(tài)鉻轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定態(tài)鉻。這和夏夢(mèng)蓮等[6]和李冉等[27]的研究結(jié)果類似。

        多數(shù)研究表明[28?30],施用微生物和生物炭不僅可以降低重金屬生物有效性、提高土壤肥力,還可以促進(jìn)作物生長(zhǎng)并提高產(chǎn)量,并且兩者聯(lián)合修復(fù)的效果更好。MARYEM 等[31]的研究表明,在生物炭和細(xì)菌(Pseudomonas japonica和Bacillus cereus)聯(lián)合修復(fù)過的Cr(Ⅵ)污染土壤上種植小麥,小麥的株高和生物量顯著增加。也有研究證明,添加光合細(xì)菌與豬場(chǎng)糞污能提高生菜的生長(zhǎng)與品質(zhì)指標(biāo),相比單獨(dú)添加光合細(xì)菌和豬場(chǎng)糞污具有更好的效果[32]。本研究結(jié)果表明,添加H菌株和生物炭對(duì)鉻脅迫下小白菜的促生效果顯著,并且在T6 處理組小白菜的株高、根長(zhǎng)、葉綠素和可溶性糖含量均達(dá)到最大值,說明此時(shí)土壤孔隙中的H菌株和生物炭添加量基本趨于飽和,繼續(xù)添加不僅會(huì)加劇微生物之間的競(jìng)爭(zhēng),還會(huì)影響根系對(duì)礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素的吸收[33]。最適添加量條件下,微生物和生物炭可以提高土壤水分和養(yǎng)分的保持能力,增加土壤中有機(jī)質(zhì)的含量,從而促進(jìn)植物的生長(zhǎng)[34]。同時(shí),H菌株對(duì)Cr(Ⅵ)具有一定的生物還原作用[18],土壤中的部分Cr(Ⅵ)被有效還原為Cr(Ⅲ),降低了鉻的毒性,增強(qiáng)了合成葉綠素有關(guān)酶的活性;生物炭能夠吸附重金屬污染物,改善土壤環(huán)境[35],為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和棲息場(chǎng)所,促進(jìn)鉻脅迫下小白菜的生長(zhǎng),提高其葉綠素和可溶性糖含量。

        綜上所述,推測(cè)H 菌株和生物炭修復(fù)Cr(Ⅵ)污染土壤的機(jī)理如圖6 所示:首先,球形紅細(xì)菌H 菌株以生物炭為能源[36?37],增強(qiáng)了對(duì)土壤中某些碳源的利用能力,從而誘導(dǎo)自身產(chǎn)生Cr(Ⅵ)還原酶,并且將該酶排出體外,將土壤中的部分Cr(Ⅵ)還原為Cr(Ⅲ)[38],還原后的Cr(Ⅲ)主要以Cr2O3和少量HCrO2的形式存在于土壤環(huán)境中;另一方面,生物炭表面帶正電荷的官能團(tuán)對(duì)帶負(fù)電荷的六價(jià)鉻基團(tuán)(Cr2O2?7)具有靜電吸附作用[39],從而限制了重金屬離子的游離狀態(tài),降低了其生物有效性,改變了土壤中鉻的形態(tài)分布,使土壤中的鉻向穩(wěn)定態(tài)轉(zhuǎn)化,最終降低土壤的毒性,促進(jìn)小白菜的生長(zhǎng)。

        4 結(jié)論

        (1)球形紅細(xì)菌H 菌株和生物炭單一及聯(lián)合修復(fù)鉻污染土壤30 d 的研究表明,聯(lián)合處理組的修復(fù)作用明顯優(yōu)于單一處理組,使土壤中鉻的生物可利用性和毒性大幅度下降,土壤酶活性顯著升高,并且當(dāng)菌株添加量為108CFU·g?1和生物炭添加量為1%時(shí),修復(fù)效果最好。

        (2)盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明,添加H 菌株和施加生物炭均對(duì)小白菜的生長(zhǎng)有明顯的促生作用,且兩者聯(lián)合作用的效果更加顯著(P<0.05)。說明H 菌株和生物炭對(duì)鉻污染土壤和小白菜具有較好的修復(fù)和促生效果。

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