王 斌，譚 鑫，鄒仕庚，彭運智，曹永長,，劉旭晨，陳 峰*

（1.華南農(nóng)業(yè)大學動物科學學院，廣東廣州 510642；2.溫氏食品集團股份有限公司，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部動物營養(yǎng)與健康養(yǎng)殖重點實驗室，廣東云浮 527300；3.中山大學生命科學學院，廣東廣州 510275）

蛋白質(zhì)資源短缺是我國畜禽養(yǎng)殖業(yè)面臨的重要問題，如何有效利用現(xiàn)有資源并開發(fā)新型蛋白質(zhì)原料是畜牧行業(yè)健康、可持續(xù)發(fā)展的關(guān)鍵任務[1]。除豆粕外，目前在蛋雞飼料中常用的非常規(guī)蛋白資源包括雜粕（菜籽粕、棉籽粕和花生粕等）、谷物加工副產(chǎn)物、植物及其副產(chǎn)物、糟粕類等[2]。近年來，隨著規(guī)?；B(yǎng)殖技術(shù)的成熟[3]，昆蟲（如黑水虻幼蟲、蠅蛆、黃粉蟲和蟑螂）等可持續(xù)性蛋白質(zhì)原料越來越受到行業(yè)關(guān)注[4-6]。

黑水虻（Hermetia illucens，Black Soldier Fly，BSF）天然存在于自然界，人工飼養(yǎng)和養(yǎng)殖成本低廉[7]。其幼蟲蟲干蛋白質(zhì)和脂肪含量分別為32%～48% 和12%～34%[8-13]，還含有豐富的鈣（5%～8%）、中鏈脂肪酸和抗菌肽等生物活性物質(zhì)[14]，對動物生長、免疫和生產(chǎn)性能均具有顯著提高的作用[15-16]。研究表明黑水虻蟲粕替代部分豆粕對蛋雞的生產(chǎn)性能并無負面影響[17-18]，黑水虻是聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織（FAO）認可和推薦的重要飼用昆蟲[19]。目前的研究主要探討了黑水虻蟲對產(chǎn)蛋高峰期（24～45 周）和產(chǎn)蛋后期（64～74 周）蛋雞的影響[17,20]，但對于在產(chǎn)蛋高峰后期（46～53 周齡）的作用效果尚不明確?？紤]到產(chǎn)蛋高峰后期是蛋雞生產(chǎn)性能承前啟后的關(guān)鍵階段。因此，本試驗旨在研究黑水虻蟲干對46～53 周齡蛋雞生長性能、蛋品質(zhì)、器官指數(shù)和血清指標的影響，為黑水虻蟲干在畜禽飼料中的應用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 黑水虻蟲干產(chǎn)品由廣州無兩生物科技有限公司提供，其營養(yǎng)成分含量如表1 所示。黑水虻蟲干的表觀代謝能值參考Schiavone 等[21]的測定結(jié)果和前期試驗數(shù)據(jù)（未發(fā)表）進行估算，設定為18.0 MJ/kg。

表1 黑水虻蟲干粉的營養(yǎng)成分（風干基礎）%

1.2 試驗設計 試驗采用單因子隨機設計，選取45 周齡生產(chǎn)性能相近的京粉1 號蛋雞1 152 只，隨機分為對照組、3% 和6% 黑水虻蟲干組，每組6 個重復，每個重復64 只雞。預試期1 周，試驗期8 周（46～53 周齡）。試驗飼糧參考NRC（1994）和《雞飼養(yǎng)標準》（NY/T 22-2004）進行配制。試驗飼糧組成及營養(yǎng)成分見表2。

表2 試驗飼糧組成及營養(yǎng)成分（風干基礎）

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗在溫氏蛋業(yè)公司勝洲蛋雞場1 舍開展。試驗動物采用4 層階梯籠養(yǎng)的其中一層進行飼養(yǎng)，每籠8 只雞。全封閉雞舍，自動環(huán)控和光照，光照時間達到每天16 h，溫度22℃左右，相對濕度50%～90%。試驗期間雞只每天定量飼喂、自由飲水，每天飼喂2 次（09:00 和15:00），撿蛋和清糞各1 次，并進行常規(guī)免疫和欄舍消毒。

1.4 檢測指標及方法

1.4.1 生產(chǎn)性能指標 試驗期間限定雞只每天的采食量為103 g。每天以重復為單位記錄產(chǎn)蛋量、蛋重和雞蛋破損情況。試驗前（46 周初）和試驗末（53 周末）對雞只稱重，并計算平均蛋重、產(chǎn)蛋率、平均日產(chǎn)蛋量、料蛋比、正品蛋率和次品蛋率。其中，次品蛋是指砂殼蛋、畸形蛋、鋼殼蛋、陰陽蛋、水紋蛋、雞糞蛋等；正品蛋是指除次品蛋、軟殼蛋、破殼蛋以外的其余蛋。平均蛋重=總蛋重/總蛋數(shù)；產(chǎn)蛋率=統(tǒng)計期內(nèi)的總產(chǎn)蛋數(shù)/實際飼養(yǎng)日蛋雞只數(shù)的累加×100%；平均日產(chǎn)蛋量=（平均蛋重×產(chǎn)蛋率）/100%；次品蛋率=次品蛋數(shù)/總蛋數(shù)×100%；正品蛋率=（正品蛋數(shù)/總蛋數(shù)）×產(chǎn)蛋率。

1.4.2 蛋品質(zhì)指標 試驗結(jié)束時，從每個重復中隨機收集蛋樣10 枚（n=60），用于測定蛋品質(zhì)。采用SONOVA 蛋品質(zhì)分析儀（Egg AnalyzerTM，Orka）測定雞蛋蛋重、蛋白高度、哈氏單位和蛋黃顏色。用蛋殼強度測定儀（Orka）測定蛋殼強度；用游標卡尺測定蛋殼厚度。蛋黃在分離蛋清后進行稱重；蛋殼在清洗、晾干后進行稱重。

1.4.3 器官指數(shù) 在試驗結(jié)束時，每個重復隨機選擇2只健康的蛋雞（n=12），處死后打開腹腔，取心臟、肝臟、脾臟和腎臟進行稱重。器官指數(shù)=器官重量/雞只體重。

1.4.4 血液指標 在試驗結(jié)束時，每個重復隨機選擇1只健康的蛋雞（n=6），翅靜脈采血2～3 mL，靜置分層后離心，取上清并儲存在-20℃。隨后，使用日立7180全自動生化分析儀對血清生化指標進行測定。采用酶免ELISA 試劑盒測定血清中免疫球蛋白IgA 水平。

1.5 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)表示為平均值±標準誤，采用SAS 8.0 軟件ANOVA 方法對數(shù)據(jù)進行分析，顯著數(shù)據(jù)以Duncan's 方法進行多重比較。P＜0.05 表示數(shù)據(jù)差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 飼糧添加黑水虻蟲干對蛋雞生產(chǎn)性能的影響 由表3 可知，與對照組相比，飼糧添加3%和6%黑水虻蟲干對蛋雞46～49、50～53、46～53 周的體重、產(chǎn)蛋率、平均日產(chǎn)蛋量和料蛋比均無顯著影響。3%黑水虻蟲干組46～49、50～53、46～53 周的平均蛋重高于對照組（P＜0.05），且在50～53、46～53 周高于6%黑水虻蟲干組（P＜0.05）。與對照組相比，添加6%黑水虻蟲干提高了50～53 周的正品蛋率（P＜0.05）；3%黑水虻蟲干組與對照組和6%黑水虻蟲干組均無顯著差異。與對照組相比，飼糧添加3%和6%黑水虻蟲干降低了50～53 周和46～53 周的次品蛋率（P＜0.05）；6%添加組與3%添加組間無顯著差異。

表3 黑水虻蟲干對46～53 周齡蛋雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 飼糧添加黑水虻蟲干對蛋雞蛋品質(zhì)的影響 由表4可知，與對照組相比，飼糧添加3%和6%黑水虻蟲干對53 周齡蛋雞的平均蛋重、殼重、蛋殼強度、蛋殼厚度、哈氏單位和蛋白高度無顯著影響。與對照組相比，飼糧添加3%和6%黑水虻蟲干提高了蛋雞的蛋黃顏色（P＜0.05），2 個添加組之間無顯著差異。

表4 黑水虻蟲干對53 周齡蛋雞蛋品質(zhì)的影響

2.3 飼糧添加黑水虻蟲干對蛋雞器官指數(shù)的影響 由表5 可知，與對照組相比，飼糧添加3% 和6% 黑水虻蟲干組分別降低了蛋雞肝臟指數(shù)、心臟指數(shù)和脾臟指數(shù)（P＜0.05），且2 個添加組間無顯著差異。此外，飼糧添加3%和6%黑水虻蟲干對腎臟指數(shù)無顯著影響。

表5 黑水虻蟲干對53 周齡蛋雞器官指數(shù)的影響 %

2.4 飼糧添加黑水虻蟲干對蛋雞血清指標的影響 由表6 可知，與對照組相比，飼糧添加3%和6%黑水虻蟲干提高了血清中葡萄糖含量（P＜0.05），且2 個添加組間無顯著差異。與對照組相比，飼糧添加6% 黑水虻蟲干提高了血清中白蛋白和免疫球蛋白lgA 含量（P＜0.05），降低血清中肌酸激酶含量（P＜0.05）；3%黑水虻蟲干組的這3 個指標與對照組和6%添加組均無顯著差異。6%黑水虻蟲干組蛋雞血清中乳酸脫氫酶含量高于對照組和3% 添加組（P＜0.05），且3% 黑水虻蟲干組與對照組無顯著差異。此外，飼糧添加3%和6%黑水虻蟲干對總蛋白質(zhì)、球蛋白、白/球比、總膽固醇、高密度膽固醇、低密度膽固醇、甘油三酯、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷酰轉(zhuǎn)肽酶、堿性磷酸酶、總膽紅素、肌酐、尿素和尿酸的含量無顯著影響。

表6 黑水虻蟲干對53 周齡蛋雞血清指標的影響

3 討論

3.1 黑水虻蟲干對蛋雞生產(chǎn)性能的影響 本研究發(fā)現(xiàn)，在產(chǎn)蛋高峰后期（46～53 周齡）添加3%～6%黑水虻蟲干可顯著提高京粉1 號蛋雞的平均蛋重、正品蛋率，降低次品蛋率，對產(chǎn)蛋率和料蛋比無顯著影響。黑水虻蟲干的應用效果受脫脂水平的影響。張金金等[22]研究表明，在60～69 周齡蛋雞飼糧中添加2%～3%全脂黑水虻蟲干提高蛋雞的產(chǎn)蛋性能。部分脫脂黑水虻蟲干也有類似作用。在20～40 和64～74 周齡蛋雞上的研究表明，飼糧中分別添加7.3%～14.6% 和12%～23% 部分脫脂黑水虻蟲干對蛋雞的生產(chǎn)性能無負面影響，可提高產(chǎn)蛋率和產(chǎn)蛋量[17,23]。然而，在24～45 周齡添加17% 高度脫脂黑水虻蟲干會降低羅曼褐蛋雞的產(chǎn)蛋率、采食量和產(chǎn)蛋量[18]。由此說明，黑水虻蟲干的脂肪可能對于提高蛋雞的生產(chǎn)性能具有有益作用，一方面是因為其脂肪的表觀消化率較高，另一方面其脂肪組成中含有約12%的月桂酸，具有一定的抗菌、抗應激和免疫活性作用[8]。

3.2 黑水虻蟲干對蛋雞蛋品質(zhì)的影響 蛋殼重、蛋殼強度和蛋殼厚度均是反映蛋殼品質(zhì)的指標，蛋殼厚度和強度高的雞蛋，保鮮程度更高。哈氏單位、蛋白高度則反映出雞蛋新鮮度和蛋白質(zhì)量。本研究顯示，在產(chǎn)蛋高峰后期（46～53 周齡）添加3%～6% 黑水虻蟲干對京粉1號蛋雞的蛋重、蛋殼重、蛋殼強度、蛋殼厚度、哈氏單位和蛋白高度無顯著影響。同樣，在20～40、60～69、64～74 周齡蛋雞日糧中添加適量全脂或部分脫脂黑水虻蟲干對以上蛋品質(zhì)指標也無影響[17-18,22]。蛋黃顏色是消費者關(guān)注的蛋品質(zhì)指標，主要受飼料中維生素的影響。本研究中，飼糧中添加黑水虻蟲干可顯著提高蛋黃顏色。黑水虻蟲干中富含維生素多種維生素[24]，這可能是蛋黃顏色改善的原因之一。Secci 等[20]研究發(fā)現(xiàn)，在24～45 周齡蛋雞日糧中添加17% 高度脫脂黑水虻蟲干也可以提高雞蛋的蛋黃顏色以及蛋黃比率，也提高了蛋黃中γ-生育酚、葉黃素、β-胡蘿卜素和總胡蘿卜素含量。因此，黑水虻蟲干可能通過提高腸道對維生素E、維生素A 及其衍生物的消化吸收以及在蛋黃中的沉積，從而改善雞蛋的蛋品質(zhì)。

3.3 黑水虻蟲干對蛋雞器官和血清指標的影響 葡萄糖、蛋白質(zhì)和脂肪是機體主要的營養(yǎng)物質(zhì)，其在血清中的含量可一定程度反映蛋雞的營養(yǎng)狀況。本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加黑水虻蟲干提高了血清中葡萄糖、白蛋白含量，說明黑水虻蟲干可能通過提高營養(yǎng)物質(zhì)的吸收改善蛋雞的生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)。肌酸激酶、乳酸脫氫酶、肝臟代謝酶和腎臟代謝物質(zhì)可反映機體心臟、肝臟和腎臟功能，應激會導致這些物質(zhì)含量生理性或病理性增加。本研究首次得出，飼糧中添加黑水虻蟲干可降低肝臟指數(shù)和心臟指數(shù)，同時降低了血清中肌酸激酶含量、乳酸脫氫酶含量，表明黑水虻蟲干可能一定程度改善了蛋雞在該階段的器官功能。Bovera 等[23]和Marono 等[18]的研究也發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加黑水虻蟲干可提高血清球蛋白，降低血清白蛋白/球蛋白、血清膽固醇、甘油三酯和膽紅素含量。因此，黑水虻蟲干可能有益于提高蛋雞對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，并改善心臟、肝臟和腎臟的功能。

此外，本研究發(fā)現(xiàn)飼糧中添加黑水虻蟲干可以降低脾臟的器官指數(shù)，并提高血清中免疫球蛋白IgA 含量，這提示黑水虻蟲干可能參與調(diào)節(jié)腸道和機體的免疫功能及健康狀態(tài)。在蛋雞上尚未有相關(guān)研究報道，但在肉雞上的研究顯示，飼糧中添加黑水虻蟲干可以提高CD4+T細胞的頻率、血清溶菌酶的活性和脾臟淋巴細胞的增殖，從而增強細菌清除率和雞沙門氏菌感染后的存活率[16]。同樣，飼糧中添加黑水虻也可抑制仔豬腸道中某些有害菌（如鏈球菌）的生長[25]，并提高血液中單核細胞和中性粒細胞的含量[26]。另外，飼糧中添加黑水虻還可以提高血清中谷胱甘肽過氧化物酶和總體抗氧化能力[15]。而這些作用可能與黑水虻機體中豐富的中鏈脂肪酸、抗菌肽、甲殼素和鈣質(zhì)有關(guān)[15,27]。因此，一方面黑水虻蟲干可能通過抑制有害微生物的生長促進腸道上皮細胞對營養(yǎng)成分的吸收利用，另一方面黑水虻蟲干可能通過調(diào)控腸道中微生物組成、多樣性和代謝物產(chǎn)生[28]，改善腸道穩(wěn)態(tài)和免疫水平，促進機體各器官抗氧化、抗菌和抗病能力，最終達到改善蛋雞產(chǎn)蛋性能和蛋品質(zhì)的作用，但仍需進一步的研究去驗證。

4 結(jié)論

在本試驗條件下，飼糧中添加3%～6%黑水虻蟲干可以提高46～53 周齡蛋雞生產(chǎn)性能，改善蛋黃顏色，提高蛋雞免疫功能，改善機體的健康狀況。