李素凱，劉夢(mèng)燕，劉露，李冬冬，陳笑宇，楊錦竹*，王偉

(1.吉林大學(xué)，吉林 長(zhǎng)春 130012；2.吉林省食品檢驗(yàn)所，吉林 長(zhǎng)春 130012)

0 引言

自由基可導(dǎo)致人體亞健康狀態(tài)[1]，嚴(yán)重甚至還可能引起高血壓和心血管等疾病[2-4]，并且自由基過多會(huì)加速機(jī)體細(xì)胞的壞死與凋亡，加快人類衰老[5]；隨著社會(huì)的進(jìn)步，人們對(duì)美的要求越來越高，而人類皮膚顏色的深淺主要取決于黑色素的含量與分布，在黑色素形成時(shí)，必須要有氧的存在[6]，所以，抗氧化作用對(duì)減少黑色素的合成有重要作用。因此，適當(dāng)補(bǔ)充抗氧化食品，清除自由基，是目前保健食品的市場(chǎng)熱點(diǎn)[7]。而參七軟膠囊是由丹參、三七、沙棘為原料而制成的抗氧化保健食品，三者據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道都擁有抗氧化的功能，因此對(duì)參七軟膠囊進(jìn)行抗氧化人體試食實(shí)驗(yàn)研究，觀察其抗氧化作用。

1 材料與方法

1.1 樣品

參七軟膠囊，由吉林修正生物工程有限公司生產(chǎn)，規(guī)格為0.5g/粒(相當(dāng)于三七生藥材1g，丹參生藥材0.5g，沙棘2g)，人體推薦量為每日2次，每次1粒。保存條件：常溫保存。

1.2 受試對(duì)象

受試者納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡在45-65歲；身體健康狀況良好，無明顯腦、心、肝、肺、腎、血液疾患，無長(zhǎng)期服藥史；獲得知情同意，自愿參加試驗(yàn)。受試者排除標(biāo)準(zhǔn)：年齡在18歲以下或65歲以上者；妊娠或哺乳期婦女，過敏體質(zhì)或?qū)Ρ臼茉嚇悠愤^敏者；合并有心、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重疾病，精神病患者；未按規(guī)定食用受試樣品，或資料不全，影響功效或安全性判斷者。

1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組

依據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》2003 版、國食藥監(jiān)?；痆2012]107號(hào)文件《關(guān)于印發(fā)抗氧化功能評(píng)價(jià)方法等9個(gè)保健功能評(píng)價(jià)方法的通知》規(guī)定，每組受試者不少于50例，考慮到研究期間受試者20%脫落，每組計(jì)劃入組60例，共計(jì)入組120例。受試者按MDA、SOD、GSH-Px水平隨機(jī)分為試食組和對(duì)照組，盡可能考慮影響結(jié)果的主要因素如年齡、性別、生活飲食習(xí)慣等，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)，以保證組間的可比性。借助SAS統(tǒng)計(jì)軟件，產(chǎn)生120例(試驗(yàn)組和安慰劑對(duì)照組)受試者所接受處理的隨機(jī)安排，即列出流水號(hào)為001-120所對(duì)應(yīng)的治療分配(即隨機(jī)編碼表)。

1.4 食用劑量及時(shí)間

1粒/次，2次/日。給藥周期：3個(gè)月。

1.5 主要儀器、試劑

血常規(guī)XT-2000I；尿常規(guī)；UF-1000I；血生化；貝克曼庫爾特AU5800；腹部彩超；VIVIB7GE；心電；日本光電；胸片；日本島津。

1.6 觀察指標(biāo)

一般狀況：包括精神、睡眠、飲食、大小便、血壓等。安全性觀察：血、尿、便常規(guī)檢查；肝、腎功能檢查；胸片、心電圖、腹部彩超(治前檢查一次)。功效性觀察：過氧化脂質(zhì)含量、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過酶氧化物。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

凡自身對(duì)照資料可以采用配對(duì)t檢驗(yàn)，兩組均數(shù)比較采用成組t檢驗(yàn)，后者需進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，對(duì)非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)方差齊后，用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)；若轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)仍不能滿足正態(tài)方差齊要求，改用t’檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn)；但變異系數(shù)太大(如CV>50%)的資料應(yīng)用秩和檢驗(yàn)。在試驗(yàn)前組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的前提下，可進(jìn)行試驗(yàn)后組間比較。

2 結(jié)果

2.1 一般情況

本次臨床試驗(yàn)共觀察120例，其中試食組60例，對(duì)照組60例。8例脫落均為未按照要求復(fù)查，治療組脫落4例，對(duì)照組脫落4例，見表1、2、3、4。

表1 年齡分布情況(歲)

表2 身高分布情況(cm)

表3 體重分布情況(kg)

2.2 對(duì)功效指標(biāo)的影響

見表4、5、6、7。

表4 性別分布情況

表5 試食實(shí)驗(yàn)前后血清中超氧化物歧化酶活性變化(±s,μ/mL)

表5 試食實(shí)驗(yàn)前后血清中超氧化物歧化酶活性變化(±s,μ/mL)

注：P1試食組試食前后自身比較；P2對(duì)照組試食前后自身比較；P3試食組與對(duì)照組試食前比較；P4試食組與對(duì)照組試食后比較。

組別 試食前人數(shù)試食后人數(shù) 試食前SOD 試食后SOD P1 P2 P3 P4試食組 60 56 67.41±10.44 73.26±9.28 0.000 0.149 0.761 0.010對(duì)照組 60 56 67.92±7.53 68.98±8.06

表6 人體試食實(shí)驗(yàn)前后血清中谷胱甘肽過氧化物酶活性變化(±s,μmol/L)

表6 人體試食實(shí)驗(yàn)前后血清中谷胱甘肽過氧化物酶活性變化(±s,μmol/L)

注：P1試食組試食前后自身比較；P2對(duì)照組試食前后自身比較；P3試食組與對(duì)照組試食前比較；P4試食組與對(duì)照組試食后比較。

組別 試食前人數(shù) 試食后人數(shù) 試食前GSH-PX 試食后GSH-X P1 P2 P3 P4試食組 60 56 131.39±30.19 148.20±30.34 0.000 0.437 0.778 0.005對(duì)照組 60 56 132.81±24.68 131.58±31.43

表7 人體試食實(shí)驗(yàn)前后血清中丙二醛含量的變化(±s，nmol/mL)

表7 人體試食實(shí)驗(yàn)前后血清中丙二醛含量的變化(±s，nmol/mL)

注：P1試食組試食前后自身比較；P2對(duì)照組試食前后自身比較；P3試食組與對(duì)照組試食前比較；P4試食組與對(duì)照組試食后比較。

組別 試食前人數(shù) 試食后人數(shù) 試食前MDA 試食后MDA P1 P2 P3 P4試食組 60 56 5.87±1.65 4.19±1.63 0.000 0.698 0.891 0.000對(duì)照組 60 56 5.83±1.23 6.02±1.81

表8 體溫分布情況(℃)

2.3 對(duì)人體安全指標(biāo)的影響

表9 心率分布情況(次/分)

表10 收縮壓分布情況(mmHg)

表11 舒張壓分布情況(mmHg)

表12 血常規(guī)、肝功能、腎功能情況

表14 便常規(guī)情況(例)

表15 心電情況(例)

表16 彩超和X線情況(例)

3 討論

經(jīng)過查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)報(bào)道丹參抗氧化功能的文章有1000多篇，三七有接近500篇，沙棘有200多篇文章報(bào)道其抗氧化性，有豐富的理論支撐。為了證明三者合用的人體效果，本試驗(yàn)將120例符合要求的受試者，隨機(jī)分為試食組和對(duì)照組，試食組60例，對(duì)照組60例。釆用自身對(duì)照及組間對(duì)照法，試食組食用參七軟膠囊，對(duì)照組為空白對(duì)照，療程90天。最終去掉8例脫落，得到112例結(jié)果。觀察組和對(duì)照組的試食前比較：SOD、MDA、GSH-PX差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀察組的試食前后對(duì)比，SOD和GSH-PX活性顯著上升，MDA含量顯著下降。對(duì)照組的試食前后對(duì)比，SOD，MDA和GSH-PX均無明顯變化。觀察組和對(duì)照組的試食后比較，觀察組SOD和GSH-PX活性顯著高于對(duì)照組，觀察組MDA含量顯著低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。并且試食組受試者服用參七軟膠囊后，血紅蛋白、紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血清總蛋白、白蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、肌獻(xiàn)、尿素氮及尿常規(guī)、便常規(guī)等各項(xiàng)檢驗(yàn)指標(biāo)基本在正常范圍。心率、血壓無明顯影響。胸片、心電圖、彩超檢查基本在正常范圍，也未觀察到受試者在服用參七軟膠囊后有過敏及其他不良反應(yīng)。說明本品對(duì)試食者有抗氧化作用并且對(duì)身體健康無不良影響。