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        燕麥麩油單脂對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血液流變學(xué)的影響

        2021-11-06 13:11:24賀雪峰郝麒麟尚志輝張洪然許秀舉
        現(xiàn)代食品 2021年17期
        關(guān)鍵詞:麥麩高脂主動(dòng)脈

        ◎ 賀雪峰,郝麒麟,孫 治,尚志輝,孫 悅,張洪然,許秀舉,戈 娜

        (1.內(nèi)蒙古三主糧天然燕麥產(chǎn)業(yè)股份有限公司,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010010;2.包頭醫(yī)學(xué)院,內(nèi)蒙古 包頭 014040;3.內(nèi)蒙古三主糧燕麥研究院,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010010)

        動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis,AS)是最常見的心腦血管系統(tǒng)疾病,好發(fā)于中老年人群中,是威脅人類健康和生存質(zhì)量的“隱形殺手”之一,同時(shí)也是高血壓、冠心病、腦卒中等心腦血管疾病的病理基礎(chǔ)。而血脂代謝紊亂和血液流變學(xué)改變是AS重要的發(fā)病機(jī)制[1]?,F(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn),適量攝入單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸可以降低血清膽固醇和低密度脂蛋白,進(jìn)而改變血液流變力學(xué),從而有效降低動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的危險(xiǎn)性[2]。三主糧集團(tuán)科研團(tuán)隊(duì)前期完成燕麥麩油單脂超臨界CO2萃取,并應(yīng)用燕麥麩油干預(yù)大鼠高脂模型,發(fā)現(xiàn)其可降低大鼠血清總膽固醇(Total cholesterol,TG)、甘油三酯(triglycerides,TC)和低密度脂蛋白(Low density lipoprotein,LDL)水平,升高(高密度脂蛋白High-density lipoprotein,HDL)含量,起到調(diào)節(jié)血脂的作用[3]。

        本研究以高脂飼料結(jié)合腹腔注射維生素D3(VD3)喂養(yǎng)方式建立AS大鼠模型[4],并同步給予燕麥麩油單脂進(jìn)行干預(yù),觀察了不同劑量的燕麥麩油單脂對(duì)AS大鼠主動(dòng)脈病理學(xué)、血液流變學(xué)等的影響及其對(duì)AS大鼠肝臟脂肪變性的改善作用,以期為燕麥麩油單脂的進(jìn)一步開發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)樣品

        60只SPF級(jí)雄性SD大鼠,體重180~200 g,購于斯貝福(北京)生物技術(shù)有限公司,批號(hào):SCXK(京)2019-0010;普通飼料和高脂飼料購于斯貝福(北京)生物技術(shù)有限公司;燕麥麩油單脂(以下簡稱燕麥麩油),三主糧集團(tuán)股份公司自主研制。

        1.2 實(shí)驗(yàn)方法

        1.2.1 動(dòng)物分組

        60只SPF級(jí)雄性SD大鼠,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,應(yīng)用隨機(jī)數(shù)字表進(jìn)行完全隨機(jī)分組,具體如表1。

        表1 大鼠分組及干預(yù)情況表

        1.2.2 標(biāo)本采集

        喂養(yǎng)8周后,禁食不禁水12 h,3%戊巴比妥鈉行腹腔麻醉。腹主動(dòng)脈取血,3 000 r·min-1×15 min離心血清;分離肝臟及主動(dòng)脈,將部分肝臟和主動(dòng)脈組織進(jìn)行固定,其余部分均儲(chǔ)存于-80 ℃冰箱備用。

        1.2.3 臟器指數(shù)的測(cè)定

        實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,對(duì)大鼠進(jìn)行稱重,并稱量肝臟重量,計(jì)算臟器指數(shù):

        臟器指數(shù)=臟器濕重(g)/體質(zhì)量(g)×100%

        1.2.4 肝臟和主動(dòng)脈病理學(xué)觀察

        將0.9 cm×0.9 cm×0.5 cm新鮮肝大葉組織及自主動(dòng)脈根部起留取約2 cm,固定于10%中性甲醛溶液,經(jīng)脫水、包埋、切片,采用HE染色,中性樹膠封片,光學(xué)顯微鏡下觀察其病理學(xué)變化。

        1.2.5 血液流變學(xué)指標(biāo)檢測(cè)

        應(yīng)用血流變儀測(cè)定血液流變學(xué)指標(biāo):血黏度(全血黏度(包括低切、中切、高切)、血漿黏度)、紅細(xì)胞壓積、血小板黏附率。

        1.3 數(shù)據(jù)處理

        采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x—±s)表示,多組均數(shù)間比較采用one-way ANOVA分析,組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)ɑ=0.05。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 各組大鼠生長發(fā)育狀況及肝臟指數(shù)的變化

        實(shí)驗(yàn)期間,飼喂普通飼料的正常對(duì)照組大鼠毛發(fā)光澤柔順,行動(dòng)靈活,體重正常增長;而飼喂高脂飼料的各組大鼠則毛發(fā)略黃,行動(dòng)遲緩,糞便硬度也較飼喂普通飼料的對(duì)照組高;而各燕麥麩油干預(yù)組大鼠體毛、糞便性狀均較AS模型組有不同程度的改善。此外,模型組大鼠與正常組相比,周體重有明顯上升,肝臟指數(shù)顯著增大,且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05);而各劑量燕麥麩油干預(yù)組與陽性藥物辛伐他丁組大鼠體重增長均較AS模型組明顯變緩,且肝臟指數(shù)均明顯低于AS組(P<0.05),與正常組相趨近(圖1和表2)。

        圖1 各組大鼠周體重變化曲線圖

        表2 各組大鼠肝臟指數(shù)變化情況表(x—±s,n=8)

        2.2 燕麥麩油對(duì)AS大鼠血液流變學(xué)的影響

        如表3所示,AS模型組大鼠與正常對(duì)照組相比,全血黏度(低切、中切、高切)、血漿黏度、紅細(xì)胞壓積、血小板黏附率均顯著升高(P<0.05);而經(jīng)中、高劑量燕麥麩油及辛伐他汀干預(yù)后,與AS模型組相比,大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)顯著降低,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

        表3 各組大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)變化情況表(x—±s,n=8)

        2.3 燕麥麩油對(duì)AS大鼠主動(dòng)脈病理學(xué)改變的影響

        光學(xué)顯微鏡下正常組血管內(nèi)皮完整、分界清楚。AS模型組大鼠可見不同程度的動(dòng)脈粥樣硬化病理改變,血管壁有脂質(zhì)沉積,脂肪含量明顯增加;內(nèi)膜出現(xiàn)不同程度增厚,平滑肌細(xì)胞增生,平滑肌細(xì)胞、彈力纖維和膠原纖維排列紊亂;大量內(nèi)皮損傷脫落,不完整,局部管壁向管腔內(nèi)突出,形成斑塊。與AS模型組相比,辛伐他汀組血管壁中脂質(zhì)沉積明顯減少,血管內(nèi)皮較完整,分界清楚;燕麥麩油各劑量干預(yù)組內(nèi)膜增生程度、血管內(nèi)皮完整性、內(nèi)皮損傷脫落以及血管壁中脂質(zhì)沉積均得到一定程度的改善,尤以高劑量組效果顯著,見圖2。

        圖2 HE染色觀察各組主動(dòng)脈病理學(xué)變化圖(400×)

        2.4 燕麥麩油干預(yù)對(duì)AS大鼠肝臟組織病理學(xué)改變的影響

        如圖3所示,正常對(duì)照組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)清晰,肝細(xì)胞索呈放射狀排列,肝組織無明顯脂肪變性,核圓且多以單核居于細(xì)胞中央。相較正常組大鼠肝組織,AS模型組大鼠肝細(xì)胞體積增大且可見不同程度的脂肪變性,肝索排列紊亂,肝臟組織內(nèi)可見大小不等的脂肪空泡。而燕麥麩油各劑量組及辛伐他丁組肝組織結(jié)構(gòu)及脂肪變都得到不同程度的改善。

        圖3 各組大鼠肝組織病理學(xué)變化圖(400×)

        3 討論

        隨著心腦血管疾病患病率的快速上升,作為其主要病理基礎(chǔ)的動(dòng)脈粥樣硬化更是受到人們的關(guān)注,因此明確AS形成機(jī)制及早期防治的研究更成為功能性食品開發(fā)、臨床營養(yǎng)學(xué)及心腦血管疾病研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)問題。由于血脂異常沉積于動(dòng)脈內(nèi)膜,伴隨平滑肌細(xì)胞增殖,纖維基質(zhì)成分增加,加之受各種因子和活性代謝產(chǎn)物的影響和調(diào)節(jié),刺激泡沫細(xì)胞形成,后者不斷產(chǎn)生和堆積,促使產(chǎn)生脂質(zhì)條紋,并逐步形成粥樣硬化性斑塊,最終導(dǎo)致動(dòng)脈管壁增厚、變硬、官腔狹窄等典型AS病理改變[5]。而其病因多與機(jī)體“脂質(zhì)浸潤、血液黏稠度改變、炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激損傷、血栓形成和血小板聚集”等因素有關(guān)[6]。

        本研究以高脂飼料配合腹腔注射VD3喂養(yǎng)方式形成AS大鼠模型,主要觀察燕麥麩油對(duì)AS大鼠血液流變學(xué)以及主動(dòng)脈的影響。研究結(jié)果表明,適量燕麥麩油干預(yù)能有效改善血液流變學(xué)指標(biāo),即降低全血黏度、血漿黏度、紅細(xì)胞壓積、血小板黏附率,并能有效改善主動(dòng)脈病變;同時(shí),對(duì)各干預(yù)組大鼠肝臟脂肪變性情況及前期燕麥麩油調(diào)節(jié)血脂的作用[3]進(jìn)行聯(lián)合分析,均顯示燕麥麩油可能通過改善血液流變學(xué)、調(diào)節(jié)脂代謝而對(duì)AS起到一定的拮抗作用。

        早在20世紀(jì)末,就有學(xué)者通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明了燕麥油脂可以有效抑制高脂膳食小鼠的血清TC值增高,這與前期的研究相吻合[7]。近年來,隨著人們對(duì)健康飲食重視程度的提高,對(duì)燕麥油脂功效的研究也日漸增加。燕麥麩油含有豐富的不飽和脂肪酸,其中亞油酸含量最高[8],而亞油酸是業(yè)界公認(rèn)的具有降血脂功效的不飽和脂肪酸,可調(diào)節(jié)脂代謝紊亂,減輕高脂血癥對(duì)動(dòng)脈內(nèi)膜的毒性和損害作用,保護(hù)動(dòng)脈,進(jìn)而降低AS的形成概率[9-10]。

        眾所周知,長期高脂膳食不僅會(huì)引起機(jī)體血脂水平增高,增加AS斑塊形成概率,同時(shí)也會(huì)使體內(nèi)脂肪大量堆積,引發(fā)脂代謝異常,導(dǎo)致機(jī)體體重增加,臟器細(xì)胞脂肪變性[11]。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,AS模型組大鼠體重增長迅速,肝臟指數(shù)明顯增大,肝臟組織發(fā)生不同程度脂肪變性,可見大小不等的脂肪空泡,而經(jīng)燕麥麩油單脂干預(yù)后可以明顯改善高脂飲食帶來的不良變化。

        4 結(jié)論

        攝入適量的燕麥麩油單脂能有效改善AS大鼠血液流變學(xué)異常,調(diào)節(jié)血脂,進(jìn)而減輕肝臟脂肪變性,減輕主動(dòng)脈脂質(zhì)沉積,對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展具有一定的預(yù)防作用。

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