李瑞娟，梁 娜，馮 芳，梁思嘉，姜國均，高紅梅

（1.河北新華科極獸藥集團有限公司 051430；2.河北農(nóng)業(yè)大學 071000；3.石家莊市畜產(chǎn)品和獸藥飼料質量檢測中心 050000）

仔豬早期斷奶后易產(chǎn)生腹瀉、生長緩慢、免疫力下降等多器官、系統(tǒng)的應激連鎖反應，臨床上多以斷奶仔豬基礎日糧中單一或者聯(lián)合添加一定劑量的抗生素能預防或緩解病原菌引起的應激反應。然而，長期、大量的不合理添加導致藥殘、細菌耐藥性日益增強，使得抗生素對各種細菌性疾病的治療效果下降，甚至給人類健康帶來威脅。

因此，越來越多抗生素性質的藥物性飼料添加劑被禁用，例如，2016年7月農(nóng)業(yè)部公告第2428號發(fā)布禁令，停止硫酸黏菌素用于動物促生長。天然植物飼料因具有安全、無毒副作用、無殘留且能提高飼料利用效率等優(yōu)點而被廣泛使用。本試驗從天然植物飼料原料中篩選的中藥組方，研究其對仔豬斷奶后引起應激反應的效果，例如生長性能下降、腹瀉、免疫功能等，為斷奶仔豬新產(chǎn)品的開發(fā)與市場推廣提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物

試驗選用河北某種豬場150頭“杜×長×大”三元斷奶仔豬，斷奶日齡為出生30天，體況良好，體重范圍8±0.5kg。

1.1.2 試驗藥品、試劑、儀器設備

復方中草藥添加劑由河北新華科極獸藥集團提供，配方組成：黃芪、白術、茯苓、甘草等，仔豬日糧由河北方田飼料有限公司提供。酶標儀（RT2100C）美國雷杜公司；電子天平等。豬瘟疫苗購自廣東永順生物制藥有限公司（批號20180716）；豬瘟抗體ELIS檢測試劑盒購自天津索羅門生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 試驗分組及處理

試驗分組及處理詳見表1。將試驗仔豬隨機分為5組，每組30頭。試驗A組為基礎日糧對照組，B組、C組、D組分別拌料添加3g/kg、4g/kg、5g/kg復方中草藥添加劑1周，試驗E組拌料添加30mg/kg的硫酸粘菌素，連續(xù)添加7d，試驗期至60日齡結束。常規(guī)免疫，在34日齡，60日齡按試驗計劃進行樣本采集和處理，稱量各豬只體重，計算料重比。

表1 試驗動物分組及處理

1.2.2 試驗日糧營養(yǎng)及管理

參加試驗仔公豬于23日齡去勢，30日齡時斷奶后，仔豬從產(chǎn)房轉入保育舍，進入試驗周期至60日齡結束，盡量安排同窩仔豬在同一欄內(nèi)，防止互咬，欺生現(xiàn)象，其余標準均相同。保育舍為高床全漏糞網(wǎng)床模式，舍內(nèi)每天清掃兩次，保持豬舍衛(wèi)生、空氣、環(huán)境溫、濕度適宜。試驗用仔豬基礎日糧及營養(yǎng)水平均按NRC（1998）標準配置，見表2。

表2 試驗基礎日糧配方

1.2.3 測定指標及方法

1.2.3.1 豬瘟抗體效價檢測

按試驗計劃分別于34日齡、48日齡和60日齡靜脈采血2mL，析出血清，用ELISA試劑盒檢測其血清抗體水平，其操作方法和判定標準，均按說明書操作。

1.2.3.2 生長性能測定

34日齡、60日齡時稱重，分別計算出初始平均體重、期末平均體重、平均增重；稱量并記錄每欄、每日飼料消耗量，計算料重比；觀察并記錄仔豬食欲、精神狀態(tài)、糞便狀態(tài)、發(fā)病、死亡情況。

料重比計算方法：試驗期內(nèi)所消耗標準飼料量（kg）/同期增重（kg）

1.2.3.3 仔豬腹瀉率的測定

試驗期間每天早上8:30觀察并記錄仔豬糞便情況。

腹瀉率計算方法：{(每欄仔豬腹瀉頭數(shù)×腹瀉天數(shù))/(每欄仔豬總頭數(shù)×試驗天數(shù))}×100%。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析與處理

采用SPSS22.0進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析，采用單因素方差分析法對試驗斷奶仔豬的增重進行統(tǒng)計分析，以Mean±SD表示，根據(jù)發(fā)病記錄的頭次數(shù)，分別統(tǒng)計計算腹瀉率。

2 結果與分析

2.1 復方中草藥飼料添加劑對斷奶仔豬豬瘟疫苗免疫應答的影響

首先，根據(jù)標準品的OD值做標準曲線，結果如圖1所示，R2為0.9833，表明線性關系良好，并由此標準曲線計算各樣品的豬瘟抗體的含量。

圖1 豬瘟抗體標準曲線圖

結果詳見表3，34日齡時，各試驗組之間豬瘟抗體水平相近，差異不顯著（P>0.05）。48、60日齡時，C組（4g/kg）和D組（5g/kg）豬瘟抗體水平均極顯著高于A組（空白對照）、B組（3g/kg）和E組（硫酸粘菌素）（p<0.01）。C組（4g/kg）和D組（5g/kg）組間抗體水平相近，差異不顯著（p>0.05）。表明，C組（4g/kg）、D組（5g/kg）本復方中草藥添加劑能極顯著升高仔豬豬瘟疫苗的抗體水平，增強免疫效果，且隨劑量增加抗體水平隨之增加。

表3 復方中草藥飼料添加劑對斷奶仔豬豬瘟抗體效價的影響 （單位：pg/ml）

注：此表同列內(nèi)不同小寫字母之間表示差異顯著(P<0.05)；不同大寫字母之間表示差異極顯著(P<0.01)。

2.2 復方中草藥飼料添加劑對仔豬生長性能及腹瀉率指標的影響

結果詳見表4。34日齡時，各試驗組之間仔豬平均體重差異不顯著（P>0.05）。到60日齡時，平均體重和試驗期平均增重指標，C組（4g/kg）、E組（硫酸粘菌素）均高于A組（空白對照）、B（3g/kg）組，差異顯著（p<0.05），B組與A組相比，無顯著差異（P>0.05）；料重比指標，C組（4g/kg）、D組（5g/kg）和E組（硫酸粘菌素）的料重比顯著低于A組（空白對照）（p<0.05），C組（4g/kg）與E組（硫酸粘菌素）無顯著差異（P>0.05）；腹瀉率指標，B、C、D、E組顯著低于A組（P<0.05），其中C組（4g/kg）與E組（硫酸粘菌素）極顯著降低腹瀉率（p<0.01），兩組效果相當。試驗表明，添加4g/kg中草藥添加劑可降低料重比15.85%，腹瀉率降低31.35%。

表4 復方中草藥飼料添加劑對斷奶仔豬生長性能及腹瀉率指標的影響

3 討論與結論

對比各組試驗數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，以拌料方式給予本組方4g/kg，連續(xù)7天，料重比與腹瀉率均顯著下降，且與藥物性飼料添加劑硫酸粘菌素組差異不顯著；與空白對照組相比，料重比降低15.85%，腹瀉率降低31.25%。在提升免疫效果方面，4g/kg，5g/kg劑量本組方均能提升斷奶仔豬豬瘟疫苗的抗體效價水平，增強免疫效果，且呈現(xiàn)出一定的量效關系。

本研究結果表明了由本公司研發(fā)的黃芪、白術、茯苓、甘草等組成的復方中草藥添加劑的促生長效果與已禁用的藥物飼料添加劑硫酸黏菌素相當，可以替代藥物飼料添加劑硫酸黏菌素，作為新型飼料添加劑用于仔豬斷奶應激促生長的臨床應用，通過提高斷奶仔豬疫苗免疫后的抗體水平而增強其免疫功能，另外，對仔豬斷奶后的腹瀉也有較好保健作用。