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        淺談高校家兔胃切除外科實(shí)驗(yàn)研究探討

        2021-11-06 06:54:54王鴻驍楊國(guó)淋
        今日畜牧獸醫(yī) 2021年10期
        關(guān)鍵詞:動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)手術(shù)

        魏 玲,王鴻驍,楊國(guó)淋?

        (1.南充職業(yè)技術(shù)學(xué)院農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)系 637131;2.川北醫(yī)學(xué)院 637000)

        實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是生物醫(yī)學(xué)研究不可缺少的材料和手段,生命科學(xué)的發(fā)展常常需要使用動(dòng)物模型來作為臨床研究的基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)于人類研究生命科學(xué)具有重要的意義,是生命科學(xué)研究條件中的首要要素,其中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的選擇和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果直接影響到研究課題的確立和研究成果的水平[1]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是培養(yǎng)學(xué)生外科手術(shù)操作能力、科研能力、科研思維必不可少一門課程,能夠更好地將理論與實(shí)踐結(jié)合,使學(xué)生在實(shí)踐中進(jìn)行科研創(chuàng)新。大學(xué)生開放性實(shí)驗(yàn)是在綜合運(yùn)用該課程所學(xué)的知識(shí)基礎(chǔ)上,以學(xué)生為主體,按實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行操作,在老師的指導(dǎo)下由學(xué)生獨(dú)立完成,從而培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)踐能力和創(chuàng)新精神。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物疾病模型廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)研究,建立的很多動(dòng)物模型已經(jīng)廣泛被應(yīng)用于治療人體疾病,如胃食管反流模型,胃潰瘍動(dòng)物模型,Ⅱ型糖尿病模型,急性心肌梗塞動(dòng)物模型,家兔肺炎衣原體感染模型等[2-6]。胃是人體重要的消化器官之一,是食物的中轉(zhuǎn)站和臨時(shí)倉庫,是人體消化道中最龐大的部分,目前關(guān)于胃的研究很多,家兔的胃切除模型常常被用于研究家兔的功能研究。嚴(yán)杰等[7]人采用電針家兔足陽明經(jīng)頭面“四白學(xué)”,軀干“梁門”穴,下肢“足三里”穴,觀察其對(duì)胃黏膜損傷的防御性保護(hù)作用,從而證實(shí)了足陽明經(jīng)與胃具有相關(guān)性。郭濤等[8]通過研究幽門螺桿菌及其培養(yǎng)上清液粗提蛋白對(duì)兔離體胃壁細(xì)胞酸分泌的影響,證實(shí)了幽門螺桿菌及其分泌的空泡毒素(VacA)可能通過下調(diào)壁細(xì)胞H+-k+ ATP酶表達(dá)水平來抑制組胺刺激的壁細(xì)胞酸分泌。羅小林等[9]通過觀察家兔不同胃切除手術(shù)術(shù)后殘胃黏膜的病理改變,分析殘胃病變的發(fā)生率和病變程度,討論不同術(shù)式的優(yōu)劣性。Vera等[10]以125i標(biāo)記的豬胃動(dòng)素為示蹤劑配體,采用直接結(jié)合技術(shù)對(duì)兔胃竇和十二指腸平滑肌組織胃動(dòng)素受體進(jìn)行了研究。

        本文以家兔為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型對(duì)部分胃切進(jìn)行開放性探索實(shí)驗(yàn)研究,旨在培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力,同時(shí)開拓學(xué)生的科研思維,也為開展此類實(shí)驗(yàn)的研究者提供一定的參考意義。

        1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與材料

        家兔10只,雌雄兼有,12月齡,3.0±0.2kg,由川北醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。麻醉劑:3%戊巴比妥鈉;常規(guī)手術(shù)器械:方盤、腰盤、3號(hào)刀柄、有齒鑷、無齒鑷、組織剪、彎頭止血鉗、直頭止血鉗、腸鉗、持針鉗、三角針、圓針、刀片、保定器、綁定器、碘伏、酒精、棉球等由川北醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心實(shí)驗(yàn)室提供。主要實(shí)驗(yàn)器械如圖1所示

        圖1 實(shí)驗(yàn)器械

        2 家兔胃切操作流程

        手前家兔先禁食禁水12h,整個(gè)手術(shù)在屏障系統(tǒng)的無菌實(shí)驗(yàn)室完成,要求學(xué)生嚴(yán)格按照無菌原則進(jìn)行外科手術(shù)實(shí)驗(yàn),避免手術(shù)過程中感染,手術(shù)嚴(yán)格模擬臨床手術(shù)過程中的注意事項(xiàng)和操作。實(shí)驗(yàn)分為10個(gè)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)小組,每組由4人組成,包括主刀、一助、器械護(hù)士和麻醉師,分工明確,知曉職責(zé)。在手術(shù)開始前學(xué)生生要重點(diǎn)學(xué)習(xí)家兔的生物學(xué)特性、知道胃在解剖學(xué)上的位置、無菌知識(shí)、手術(shù)器械的分類和使用、動(dòng)物福利等理論知識(shí)。對(duì)家兔的保定、抓取、耳緣靜脈注射等實(shí)驗(yàn)?zāi)苁炀毑僮鳌<彝梦盖谐龑?shí)驗(yàn)手術(shù)流程主要包括:①家兔保定;②耳緣靜脈注射麻醉;③開口;④ 結(jié)扎;⑤胃切除;⑥縫合;⑦術(shù)后護(hù)理。

        2.1 家兔的保定

        右手抓住家兔頸背部皮膚,輕輕提起,左手托住其臀部,使其呈坐位姿勢(shì),類似于懷抱嬰兒(抓取的過程注意不要直接抓取家兔的耳朵),然后用家兔專用固定器保定家兔,讓其四肢伸展俯爬在固定器上如圖2。

        圖2 家兔的保定

        2.2 耳緣靜脈麻醉

        首先使用精度為0.1g的電子稱重家兔,然后按1.0mL/kg計(jì)算濃度為3%戊巴比妥鈉麻醉劑量。在所需部位先揪除毛發(fā),然后先碘伏后用酒精棉球擦拭使耳緣靜脈血管突出,左手拇指和食指在上部,中指、無名指和小指在耳緣下部,夾住家兔的耳朵固定。右手持注射器使針頭由靜脈中末端針尖斜面朝上進(jìn)針注射麻醉劑,具體操作示意圖見圖3-4。

        圖3 耳緣靜脈消毒

        圖4 耳緣靜脈注射

        2.3 開口

        待家兔完全麻醉后,將其四肢和頭部固定在家兔固定板上,為避免動(dòng)物麻醉過程中發(fā)生窒息,可將舌頭拉伸至嘴角。然后在手術(shù)部位用剃毛刀除毛,將肋弓上邊緣到臍平面的毛剃干凈,裸露皮膚進(jìn)行碘伏消毒,然后鋪設(shè)創(chuàng)巾,由助手將皮膚繃緊,主刀手慢慢的進(jìn)行開口,沿腹白線割開皮膚,再沿著腹白線切開肌肉暴露腹腔,尋找合適的胃組織,一般選取胃底,體部血管少的部位。具體操作如圖5-8。

        圖5 家兔固定

        圖6 除毛

        圖7 割開皮膚后

        圖8 腹腔中暴露的胃

        2.4 家兔胃切除和縫合

        家兔切口找到合適的胃組織后,先做牽引線,無需打結(jié),需穿過漿膜和肌層,一助用止血鉗對(duì)側(cè)夾起胃組織隔開胃壁并做好紗布止血準(zhǔn)備,防止胃糜涌出,防止割到血管,然后將胃糜倒入腰盤之中,進(jìn)行取材,切2cm2胃組織于盤上留樣。然后進(jìn)行胃縫合,縫合包括胃壁縫合,肌肉縫合,皮膚縫合3個(gè)部分。根據(jù)縫合原則,胃壁縫合采用康奈爾縫合,然后依次進(jìn)行肌肉縫合和皮膚縫合,肌肉縫合采用連續(xù)縫合方式,皮膚縫合采用間斷縫合方式,具體操作流程見圖9-16。

        圖9 做牽引線

        圖10 夾取胃組織

        圖11 割開胃壁

        圖12 取材

        圖13 胃組織

        圖14 胃壁縫合

        圖15 肌肉縫合

        圖16 皮膚縫合

        2.5 術(shù)后護(hù)理

        家兔胃切除手術(shù)完成后,待動(dòng)物蘇醒,將其放在清潔的專業(yè)兔籠中飼養(yǎng),溫度維持在25℃左右,在術(shù)后12h內(nèi)飲水里面加入20%葡萄糖或維生素C,之后按照正常飼養(yǎng)條件每日定時(shí)喂養(yǎng),每日觀察動(dòng)物健康狀況,一周后記錄動(dòng)物的存活率。

        3 小結(jié)與討論

        本實(shí)驗(yàn)經(jīng)術(shù)后良好的護(hù)理 10只家兔全部存活,存活率達(dá)到100%。在開展家兔胃切除實(shí)驗(yàn)中需要注意以下幾點(diǎn):①麻醉的種類和劑量,動(dòng)物的體型和種類的不同,對(duì)麻醉的耐受程度也有很大的差異,因此要對(duì)動(dòng)物的體型和種類選擇麻醉劑的種類和劑量,手術(shù)過程中如果家兔出現(xiàn)呼吸加快或者蘇醒的狀況則表明麻醉深度不夠,要補(bǔ)充麻醉藥物,在手術(shù)過程中還需注意檢測(cè)家兔心跳及呼吸情況;②兔胃切除開口不宜過大,一般在5cm左右,如果開口過大一方面不利于家兔傷口愈合,而另一方面容易引起后期感染;③重視動(dòng)物福利,實(shí)驗(yàn)過程中要遵守3R原則,術(shù)后應(yīng)得到良好護(hù)理,家兔膽小怕驚,對(duì)聲音敏感,耐寒不耐熱,耐干不耐濕,術(shù)后護(hù)理必須提供清潔安靜的飼養(yǎng)環(huán)境是保證動(dòng)物術(shù)后恢復(fù)和存活率的重要保證。

        家兔胃切實(shí)驗(yàn)手術(shù)中包含了動(dòng)物外科手術(shù)的基本知識(shí),學(xué)生通過本外科實(shí)驗(yàn)?zāi)茉诶碚摰幕A(chǔ)上更加深入掌握該技能,使學(xué)生能夠充分理解手術(shù)前的準(zhǔn)備、手術(shù)過程中的無菌觀念、麻醉方法及麻醉時(shí)出現(xiàn)意外的處理、手術(shù)的切口和縫合方法等知識(shí),通過動(dòng)物活體實(shí)驗(yàn)可以激發(fā)學(xué)生的同情心理,學(xué)生充分體會(huì)到動(dòng)物福利,3R原則等抽象概念,本研究為開展類似實(shí)驗(yàn)研究的師生提供了一定的參考價(jià)值。

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