何天久， 付 梅， 吳巧玉， 楊 航, 鄧仁菊

(1.貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所， 貴陽(yáng) 550006； 2.貴州省農(nóng)作物技術(shù)推廣總站， 貴陽(yáng) 550001)

甘薯是繼馬鈴薯與木薯之后的世界第三大薯類作物，是發(fā)展中國(guó)家主要的碳水化合物來(lái)源[1]。我國(guó)甘薯種植面積與產(chǎn)量均居世界首位，目前種植面積在 550萬(wàn)hm2左右，占世界種植面積的75%左右[2]。甘薯是貴州省重要的糧食農(nóng)作物之一，貴州省內(nèi)甘薯種植面積常年維持在27萬(wàn)hm2以上，主要分布在海拔較低的遵義、銅仁、黔東南等地區(qū)[3]。

種質(zhì)資源是植物遺傳改良的物質(zhì)基礎(chǔ)，近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)甘薯種質(zhì)資源進(jìn)行了大量研究，采用各種方法和技術(shù)對(duì)收集保存的甘薯種質(zhì)資源進(jìn)行分類鑒定， 其中形態(tài)標(biāo)記依然是主要的分類研究方法[4]。采用形態(tài)學(xué)來(lái)區(qū)分遺傳變異和種屬之間的差別方法最直接簡(jiǎn)便[5]。黃萍等[3]利用形態(tài)標(biāo)記聚類法把15 個(gè)甘薯品種分成2個(gè)類群；宋吉軒等[6]采用形態(tài)標(biāo)記方法，研究了23份紫薯材料間的遺傳多樣性，將種質(zhì)資源分為三類；李慧峰等[4]利用形態(tài)標(biāo)記聚類分析法將136份廣西地方甘薯種質(zhì)資源可被分為四類。貴州種植甘薯歷史悠久，但品種相對(duì)單一，新品種選育仍是制約貴州甘薯產(chǎn)業(yè)的發(fā)展因素。因此，為豐富貴州甘薯種植資源，從全國(guó)引進(jìn)33份優(yōu)質(zhì)甘薯品種進(jìn)行形態(tài)聚類分析，對(duì)這些品種的主要性狀進(jìn)行鑒定分類，以期篩選優(yōu)良的適合貴州種植的品種，為貴州甘薯育種提供材料保證。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)材料從西南大學(xué)及其他省份引進(jìn)甘薯材料33份(表1)，種植于貴州省農(nóng)科院生物技術(shù)研究所種植圃。

表1 甘薯材料名稱及來(lái)源

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2020年5月在貴州省農(nóng)科院試驗(yàn)基地種植，施微生物菌肥20 kg·(667 m2)-1,復(fù)合肥(N-P-K=15-15-15)15 kg·(667 m2)-1,小區(qū)面積3 m2,薯苗株距30 cm,行距1 m，重復(fù)3次,隨機(jī)區(qū)組排列。

1.2.2形態(tài)學(xué)表型性狀調(diào)查

按農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) NY/T 2939-2016[7]觀察、測(cè)量、記載 20項(xiàng)甘薯種質(zhì)資源形態(tài)學(xué)性狀，取平均值。形態(tài)標(biāo)記編碼(見(jiàn)表2)。

表2 甘薯形態(tài)標(biāo)記及編碼

1.2.3數(shù)據(jù)分析

對(duì)調(diào)查的性狀進(jìn)行編碼，運(yùn)用DPS 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)對(duì)形態(tài)學(xué)性狀調(diào)查數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，采用唐起義等[8]歐式距離和類平均法(UPGMA)進(jìn)行聚類分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 甘薯形態(tài)學(xué)性狀測(cè)量編碼結(jié)果

根據(jù)參數(shù)的測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)，不同甘薯品種20個(gè)性狀指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果如表3所示。從表3可看出，各資源的葉尖形狀、葉色表現(xiàn)出的多樣性最差，所有材料葉尖形狀都表現(xiàn)出葉尖銳，葉色綠。薯形表現(xiàn)出的多樣性最豐富，有8種，有球形(材料為5、9、15)、短紡錘(材料為20、23)、紡錘(材料為7、13、14、17、22、25、32)、上膨紡(材料為11、21、26、33)、下膨紡(材料為6、18、23、27、29)、長(zhǎng)筒形(材料為12、19、30)、長(zhǎng)紡錘(材料為1、2、4、10、16、28)；葉脈色表現(xiàn)出的遺傳多樣性，此組為6種；頂葉色、葉緣類型、薯皮主色、薯肉主色表現(xiàn)出的遺傳多樣性為5種；葉缺刻數(shù)表現(xiàn)出的遺傳多樣性為4種；其余形狀表現(xiàn)出的遺傳多樣性較差。

表3 甘薯形態(tài)標(biāo)記量化值

2.2 甘薯形態(tài)標(biāo)記的聚類分析

利用DPS軟件采用歐式距離和類平均法進(jìn)行聚類分析，33份迷你甘薯材料20項(xiàng)主要性狀的聚類分析結(jié)果見(jiàn)圖1。在歐式距離為9.71處，可以33份甘薯材料可以分為兩大類群，第Ⅰ類群包括31份甘薯材料；第Ⅱ類群只有2份材料為紫云紅心和云南昭通(紅皮)。第Ⅰ類群在歐式距離8.33處，可將第Ⅰ類群分為兩個(gè)亞類。第1亞類包括23份甘薯種質(zhì)資源，分別為：渝紅心4號(hào)、9-14-27、廣薯87、渝薯6號(hào)、徐薯22、渝198、秦5、徐18、湛薯12、渝薯38、渝薯12、濟(jì)薯26、渝68、四川仁壽、蘇8、渝98、黔8、云南昭通(黃皮)、渝33、渝17、海南、龍9、一點(diǎn)紅，此組品種大部分具有以下特征：葉尖形狀銳，葉色綠，葉緣色綠，葉柄帶紫，頂葉色綠或黃綠。第2亞類包括8份甘薯材料，分別為：萬(wàn)薯5號(hào)、濟(jì)薯29、商19、渝50、濟(jì)薯30、萬(wàn)薯10號(hào)、西瓜紅、煙25，此類品種在頂葉色、葉脈色、薯皮主色和薯肉色與第1類群差別較大。

圖1 甘薯形態(tài)標(biāo)記的聚類分析

第Ⅱ類包括2份材料，為紫云紅心和云南昭通(紅皮)。主要表現(xiàn)為：頂葉色黃綠、頂葉形狀三角、頂葉葉緣色綠、葉片形狀三角形、葉尖銳、葉色綠、葉緣綠、葉柄綠上部帶紫、莖主色節(jié)點(diǎn)紫、節(jié)間長(zhǎng)中等。

3 結(jié)論與討論

本研究通過(guò)形態(tài)學(xué)性狀對(duì)33份引進(jìn)貴州種植的甘薯種質(zhì)資源進(jìn)行形態(tài)標(biāo)記聚類分析，在歐式聚類9.71處，將這些材料可分為兩大類，同一類群的性狀相差小，歐氏距離相近; 類群間的性狀差異較大，歐氏距離相差大。

作物形態(tài)學(xué)形狀在生產(chǎn)上更直觀、便捷表現(xiàn)個(gè)體的，在傳統(tǒng)育種中仍是一項(xiàng)重要的研究手段。但是在鑒定性狀時(shí)容易受主觀意識(shí)的影響，對(duì)于一些不好區(qū)分性狀特征如頂葉色：褐綠和紫綠和一些薯形的判斷，不同的人對(duì)材料進(jìn)行編碼時(shí)容易出現(xiàn)偏差。羅文彬等[9]研究認(rèn)為特別是在品種非常相似時(shí)，傳統(tǒng)的形態(tài)特征很難鑒定種質(zhì)資源及其來(lái)源，容易將不同品種混雜。因此，根據(jù)形態(tài)標(biāo)記的相似性對(duì)甘薯種植資源進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析，一定程度上能反映品種資源之間親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近，但易受自然環(huán)境因素和人為因素的影響，難以準(zhǔn)確闡明甘薯品種資源間的遺傳差異，還需要結(jié)合其他的研究方法對(duì)材料進(jìn)行親緣關(guān)系分析[10]。

遺傳標(biāo)記技術(shù)由經(jīng)典的形態(tài)學(xué)研究發(fā)展到 DNA 分子標(biāo)記的研究，極大地彌補(bǔ)了形態(tài)學(xué)研究的不足[11]。近年來(lái)有多項(xiàng)研究表明, 分子標(biāo)記和形態(tài)學(xué)性狀可在植物分類、品種鑒別和遺傳多樣性分析中起到互補(bǔ)作用, 尤其對(duì)種子真實(shí)性鑒定、同種異名和異種同名鑒別[12]。因此, 綜合形態(tài)學(xué)信息和 DNA 標(biāo)記信息能有效提高品種特異性鑒定的準(zhǔn)確性[13]。