伏開新

（灌云縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 灌云 222200）

腫瘤（tumor）目前已經(jīng)成為臨床中的常見病，而腫瘤的發(fā)生與機(jī)體免疫功能密切相關(guān)[1]。人體的免疫細(xì)胞種類較多，其中外周血T 淋巴細(xì)胞以及自然殺傷細(xì)胞（NK）具有重要的作用。T 淋巴細(xì)胞在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及抗腫瘤過程中具有識別、標(biāo)記以及清除腫瘤細(xì)胞的效果，而自然殺傷細(xì)胞不僅能起到抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)的效果，同時(shí)在自身免疫性疾病的發(fā)生、發(fā)展中均有所參與[2-4]。因此，通過對淋巴細(xì)胞亞群的評估，有利于臨床醫(yī)師了解患者機(jī)體的免疫情況，進(jìn)一步提高腫瘤診斷的準(zhǔn)確性[5]。本研究主要分析腫瘤患者外周T 淋巴細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞比例檢測的臨床價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018 年1 月-2020 年12 月灌云縣人民醫(yī)院收治的216例腫瘤患者作為研究組，另選取同期200 名正常體檢人員作為對照組。研究組中男性122例，女性94例；年齡18～75 歲，平均年齡（53.39±8.45）歲；疾病類型：肝癌64例、肺癌40例、胃癌58例、乳腺癌23例、鼻咽癌31例；對照組中男性113 名，女性87 名；年齡18～76 歲，平均年齡（54.05±8.36）歲。兩組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有研究對象知情同意并簽署知情同意書。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ①研究組患者均經(jīng)影像學(xué)、病理檢查等確診，對照組均為健康者；②年齡≥18 歲。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①存在嚴(yán)重臟器功能障礙者；②精神病史或認(rèn)知障礙者。

1.3 方法 清晨抽取所有研究對象空腹?fàn)顟B(tài)下肘靜脈血5 ml，經(jīng)抗凝處理后送檢。檢測時(shí)從試管中提取100 μl 抗凝血，避光加入20 μl 不同熒光標(biāo)記的單克隆抗體，經(jīng)過充分混合均勻后在室溫下避光標(biāo)記染色，持續(xù)20 min。再加入2 ml 溶血素，靜待10 min，以1000 r/min的速率持續(xù)離心5 min，棄去上清液。加入洗滌劑500 μl 重懸細(xì)胞，通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。

1.4 觀察指標(biāo) ①比較兩組外周血T 淋巴細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD19+）以及NK細(xì)胞；②比較研究組不同腫瘤類型、年齡、性別外周血T 淋巴細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以（）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析；計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組外周血T 淋巴細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞比例比較 研究組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+以及CD19+水平低于對照組，NK細(xì)胞比例水平高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而兩組CD8+比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組外周血T 淋巴細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞比例比較（，%）

表1 兩組外周血T 淋巴細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞比例比較（，%）

2.2 研究組不同腫瘤類型外周血T 淋巴細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞比較 不同腫瘤類型CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD19+、NK細(xì)胞比例水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而不同腫瘤類型CD8+水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），其中鼻咽癌CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于其他腫瘤，NK細(xì)胞比例水平高于其他腫瘤；乳腺癌CD4+/CD8+水平低于其他腫瘤；胃癌CD3+水平高于其他腫瘤，CD19+水平低于其他腫瘤，見表2。

表2 研究組不同腫瘤外周血T 淋巴細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞比例比較（，%）

表2 研究組不同腫瘤外周血T 淋巴細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞比例比較（，%）

2.3 研究組不同年齡段外周血T 淋巴細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞比例比較 ＜60 歲CD3+、CD4+水平低于≥60 歲，NK細(xì)胞比例水平高于≥60 歲，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而不同年齡段CD8+、CD4+/CD8+以及CD19+水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表3。

表3 研究組不同年齡段外周血T 淋巴細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞比較（，%）

表3 研究組不同年齡段外周血T 淋巴細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞比較（，%）

2.4 研究組不同性別外周血T 淋巴細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞比例比較 男性CD3+、CD4+水平低于女性，NK細(xì)胞比例水平高于女性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而不同性別CD8+、CD4+/CD8+以及CD19+水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表4。

表4 研究組不同性別外周血T 淋巴細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞比例比較（，%）

表4 研究組不同性別外周血T 淋巴細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞比例比較（，%）

3 討論

T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫是機(jī)體抵抗腫瘤細(xì)胞的主要方式之一，而通過外周血淋巴細(xì)胞亞群的檢測，能夠有效反映出機(jī)體的免疫狀態(tài)[6]。外周血T 淋巴細(xì)胞亞群中含有的細(xì)胞較多，目前醫(yī)學(xué)界研究較多的包括CD3+、CD4+以及CD8+。NK細(xì)胞在免疫調(diào)節(jié)中主要負(fù)責(zé)非特異性殺傷腫瘤細(xì)胞，在活化作用下，能夠促進(jìn)IFN-α、IFN-γ、IL-2 等細(xì)胞因子的分泌，起到抗腫瘤的效果，同時(shí)還能對吞噬細(xì)胞的功能進(jìn)行調(diào)節(jié)[7,8]。B細(xì)胞是機(jī)體產(chǎn)生抗體的主要細(xì)胞，在淋巴細(xì)胞表面存在多種跨膜抗白，其中CD19+主要負(fù)責(zé)對B細(xì)胞活化、增殖的調(diào)節(jié)，并能夠參與到B細(xì)胞的活化與信號傳導(dǎo)過程中[9,10]。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，研究組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+以及CD19+水平低于對照組，NK細(xì)胞比例水平高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而兩組CD8+比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），提示腫瘤患者普遍存在免疫抑制狀態(tài)，在該狀態(tài)下，機(jī)體識別與殺傷突變細(xì)胞的能力產(chǎn)生了一定的變化，導(dǎo)致免疫功能失調(diào)。在腫瘤細(xì)胞微環(huán)境中，含有大量能夠抑制CD4+細(xì)胞的免疫抑制因子，且CD8+細(xì)胞比例會(huì)有所上升，導(dǎo)致CD4+/CD8+下降，引發(fā)免疫抑制，出現(xiàn)免疫功能紊亂，機(jī)體難以有效清除腫瘤細(xì)胞，進(jìn)一步促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的增殖，為病情發(fā)展提供了條件[11，12]。當(dāng)T 淋巴細(xì)胞受到抑制時(shí)，NK細(xì)胞比例有明顯升高，證明NK細(xì)胞的免疫反應(yīng)能力增強(qiáng)，可能是由于細(xì)胞免疫功能促進(jìn)了NK細(xì)胞的增殖[13]。

本研究通過對不同腫瘤類型外周血T 淋巴細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞比例變化進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同腫瘤類型CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD19+、NK細(xì)胞比例水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而不同腫瘤類型CD8+水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），其中鼻咽癌CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于其他腫瘤，NK細(xì)胞比例水平高于其他腫瘤；乳腺癌CD4+/CD8+水平低于其他腫瘤；胃癌CD3+水平高于其他腫瘤，CD19+水平低于其他腫瘤，提示隨著惡性腫瘤的增殖、侵襲，組織來源、惡性程度等均會(huì)發(fā)生一定的變化，導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能也出現(xiàn)了不同的變化[14]。鼻咽癌細(xì)胞的表面特異性受體結(jié)構(gòu)具有一定的特殊性，與其他腫瘤的免疫逃逸機(jī)制有明顯區(qū)別，效應(yīng)性T細(xì)胞難以準(zhǔn)確識別、結(jié)合靶點(diǎn)，抑制了CD3+、CD4+等細(xì)胞的增殖[15-17]。此外，本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，＜60 歲CD3+、CD4+水平低于≥60 歲，NK細(xì)胞比例水平高于≥60 歲，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而不同年齡段CD8+、CD4+/CD8+以及CD19+水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；男性CD3+、CD4+水平低于女性，NK細(xì)胞比例水平高于女性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而不同性別CD8+、CD4+/CD8+以及CD19+水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），說明外周T 淋巴細(xì)胞亞群與NK細(xì)胞比例在不同年齡、性別的腫瘤患者中也存在一定的差異，臨床醫(yī)師應(yīng)結(jié)合患者實(shí)際情況進(jìn)行診斷，有利于提高腫瘤診斷的準(zhǔn)確性[18]。

綜上所述，外周血T 淋巴細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞比例檢測在腫瘤患者中具有較高的應(yīng)用價(jià)值，不僅能夠提高腫瘤的檢出率，還能為鑒別診斷提供一定的參考，同時(shí)也是評價(jià)臨床療效的重要指標(biāo)。