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摘要：飲用水與人民群眾生活息息相關(guān)，水質(zhì)安全切實(shí)關(guān)系到人們健康問(wèn)題。糞大腸菌群是總大腸菌群的一部分，其主要來(lái)源于人畜糞便。糞大腸菌群是判斷水體污染狀況的重要指標(biāo)，在環(huán)境質(zhì)量評(píng)介、環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)督等方面具有重要的意義[1]。本次研究抽調(diào)合肥市董鋪和三廠兩個(gè)取水點(diǎn)，2020年12月至2021年7月的樣本作為研究對(duì)象，通過(guò)研究原水中糞大腸桿菌的，探索其是否隨季節(jié)性變化。

關(guān)鍵詞：原水;糞大腸桿菌群;季節(jié)性變化;

1前言

糞大腸菌群是水質(zhì)污染的重要指標(biāo)之一，對(duì)于評(píng)價(jià)原水受生活污染和工業(yè)污染的程度和正確認(rèn)識(shí)原水的特征有重要的參考意義。從而為合理評(píng)價(jià)原水質(zhì)量和優(yōu)化水質(zhì)管理流程提供數(shù)據(jù)支撐。

測(cè)定糞水中大腸菌群的傳統(tǒng)方法有多管發(fā)酵法、濾膜法。多管發(fā)酵法不受水體濁度和濃度的影響適用于任何條件水樣的檢測(cè)，濾膜法適用于較清潔的水樣，但兩種方法的前期準(zhǔn)備工作量大、操作繁鎖、耗人力[1]。

酶底物法可彌補(bǔ)傳統(tǒng)檢測(cè)方法的不足，本次研究采用酶底物法測(cè)定原水中糞大腸桿菌群的含量，探究其隨季節(jié)變化的情況。

1.1水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)

水體的微生物污染是最早一批被提出的水質(zhì)污染問(wèn)題，認(rèn)識(shí)到水是疾病的載體對(duì)于控制水媒介傳染病具有重要意義[2]。

水中的致病性微生物往往由外界污染物引起，尤其是是人類(lèi)和其他變溫動(dòng)物動(dòng)物的排泄物，其生長(zhǎng)和繁殖可能導(dǎo)致霍亂、傷寒、腹瀉等腸道傳染病的傳播甚至大規(guī)模爆發(fā)。病原體包含可以引起疾病的細(xì)菌、病毒和原生動(dòng)物。[3]水中可能存在常見(jiàn)的病原菌包括有傷寒沙門(mén)氏菌、志賀氏、菌大腸桿菌等。這些細(xì)菌大量存在于人類(lèi)和其他常溫動(dòng)物的腸道和排泄物中，若水體因此被污染，在稀釋后也可通過(guò)技術(shù)手段測(cè)到糞大腸菌群。

在絕大多數(shù)情況下，大腸菌群并不具有健康風(fēng)險(xiǎn)，但是作為糞便污染的指示微生物，大腸菌群的存在提示了人體被糞便中其他病原體感染疾病的可能性[3]。

1.2糞大腸桿菌群檢測(cè)方法

發(fā)酵法：是通過(guò)將水樣注入已滅菌的放有微孔濾膜的濾器中，經(jīng)過(guò)抽濾。細(xì)菌即被截留在濾膜上，然后將濾膜貼于合適的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。

濾膜法：是將水樣注入已滅菌的放有微孔濾膜的濾器中，經(jīng)過(guò)抽濾。細(xì)菌即被截留在濾膜上，然后將濾膜貼于合適的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)[4]。

酶底物法：能彌補(bǔ)傳統(tǒng)的檢測(cè)方法存在的劣勢(shì)，且技術(shù)操作簡(jiǎn)潔，速度快，精度高，低消耗?？捎行岣咚|(zhì)中糞大腸菌群測(cè)定的準(zhǔn)確度，精密度以及檢驗(yàn)效率。

2實(shí)驗(yàn)部分

2.1實(shí)驗(yàn)原理

酶底物法采用大腸菌群細(xì)菌能產(chǎn)生?-半乳糖苷酶分解PG使培養(yǎng)液呈黃色，以及大腸埃希氏菌產(chǎn)生葡萄糖醛酸分解MUG使培養(yǎng)液在波長(zhǎng)366nm紫外光下產(chǎn)生熒光的原理來(lái)定量分析水樣中糞大腸菌群數(shù)[4]。

2.2實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)備

科立得試劑、97孔定量盤(pán)、100mL無(wú)菌取樣瓶、程控定量封口機(jī)、隔水式恒溫培養(yǎng)箱。

2.3實(shí)驗(yàn)過(guò)程

1.在生物潔凈室內(nèi)，將科立得試劑倒入裝有100mL水源的無(wú)菌取樣瓶中，蓋上蓋子搖勻;

2.待充分搖勻后試劑完全溶解后，將樣品混合液倒入97孔定量盤(pán)中，使用程序定量封口機(jī)進(jìn)行封口;

3.培養(yǎng)：將密封后的裝有樣品混合液的97孔定量盤(pán)，放入44.5℃隔水式恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h

4.查看結(jié)果：待培養(yǎng)結(jié)束后，取出定量盤(pán)，與陽(yáng)性比色盤(pán)對(duì)照，黃色》陽(yáng)性比色盤(pán)，則糞大腸菌群陽(yáng)性。數(shù)出陽(yáng)性孔格數(shù)，對(duì)照97孔MPN表，讀取結(jié)果。

2.4結(jié)果與分析

將實(shí)驗(yàn)所得具體數(shù)據(jù)導(dǎo)入繪圖軟件，分別繪圖得圖1和圖2。

觀察圖1可知，在冬季這一階段，董鋪原水中的糞大腸菌群數(shù)量較少，其原因可能是當(dāng)時(shí)處于冬季，氣溫較低，不利于原水中糞大腸菌群的繁殖，在春季有一個(gè)較大的上升過(guò)程，呈現(xiàn)出迅速爆發(fā)的趨勢(shì)，結(jié)合春季天氣溫度分析其中原因：春季開(kāi)始溫度回升，對(duì)于糞大腸菌群有一個(gè)較適宜的生長(zhǎng)環(huán)境，水中溫度、光照等因素較為溫度，數(shù)量有所上升。而后進(jìn)入夏季，溫度持續(xù)上升，觀察圖可知董鋪原水中的糞大一直保持一個(gè)溫度上升的趨勢(shì)，在夏季達(dá)到最大值，隨后又呈現(xiàn)出下降的趨勢(shì)，這與夏季汛期雨水量大，長(zhǎng)時(shí)間高溫有一定關(guān)聯(lián)。

觀察圖2可知，在冬季時(shí)期，三廠原水中的糞大腸菌群數(shù)量較少，其原因可能是當(dāng)時(shí)處于冬季，氣溫較低，不利于原水中糞大腸菌群的繁殖，在春季有一個(gè)較大的上升趨勢(shì)，分析其中原因：可能是春季開(kāi)始溫度回升，對(duì)于糞大腸菌群有一個(gè)較適宜的生長(zhǎng)環(huán)境，水中溫度、光照等因素較為溫度，數(shù)量有所上升。而后有持續(xù)下降，可能是短暫的升溫后，有開(kāi)始降溫或者連續(xù)的陰雨天氣不利于糞大腸菌群的繁殖。進(jìn)入夏季后，呈現(xiàn)出穩(wěn)定上升的趨勢(shì)，且在7月達(dá)到最大值。

3總結(jié)

通過(guò)對(duì)比三廠原水和董鋪原水糞大腸菌群數(shù)量變化趨勢(shì)可得出一定規(guī)律：糞大腸菌群的數(shù)量與溫度有較大關(guān)系整體呈正相關(guān)影響，當(dāng)氣溫較低時(shí)，水中糞大腸菌群數(shù)量較少，隨著溫度的升高，環(huán)境有利于糞大腸菌群的繁殖，原水中糞大腸菌群數(shù)量增加。結(jié)合其它地區(qū)原水中糞大腸菌的調(diào)查研究，不僅溫度對(duì)其有影響，光照、原水中無(wú)機(jī)物、有機(jī)物、以及水庫(kù)水源的流動(dòng)、夏季汛期水量的上升等因素對(duì)糞大腸菌群都有一定的影響。

參考文獻(xiàn)

[1]許丹梅，呂玉容.酶底物法測(cè)定水中糞大腸菌群的探討[J].廣東化工，2021，48（03）：194+183.

[2]JOHN S. On the Mode of Communication of Cholera [M]. London：John Churchill，1855

[3]楊蓉，李壘，霍曉芹，袁懋，金小偉.水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)中指示微生物的發(fā)展及現(xiàn)狀[J].中國(guó)環(huán)境監(jiān)測(cè)，2020，36（04）：1-10.

[4]張少峰，劉國(guó)強(qiáng)，魏春雷.糞大腸菌群檢測(cè)方法及研究進(jìn)展[J].海洋通報(bào)，2008（03）：102-106.