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        高遷移率族蛋白A1、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促紅細(xì)胞生成素在宮頸癌中的表達(dá)及與患者臨床特征和預(yù)后的關(guān)系

        2021-10-23 07:25:54盧書芳閆秀玲孫曉娜
        癌癥進(jìn)展 2021年14期

        盧書芳,閆秀玲,孫曉娜

        平煤神馬醫(yī)療集團(tuán)總醫(yī)院婦產(chǎn)科,河南 平頂山4670000

        宮頸癌是臨床常見的婦科惡性腫瘤之一,目前,臨床治療以根治性手術(shù)為主,但多數(shù)宮頸癌患者早期癥狀不明顯,因此,就診時(shí)多已處于中晚期,失去了最佳的手術(shù)治療機(jī)會(huì),研究發(fā)現(xiàn),高危HPV 持續(xù)感染進(jìn)展為宮頸癌所需要的時(shí)間較長(zhǎng),隨著腫瘤分子生物學(xué)的發(fā)展,腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與協(xié)同因子有關(guān),如原癌基因的激活、抑癌基因的失活及相關(guān)基因的異常表達(dá)。高遷移率族蛋白A1(high mobility group protein A1,HMGA1)屬于染色質(zhì)相關(guān)蛋白,在多種惡性腫瘤上皮組織中過表達(dá),且與腫瘤發(fā)生發(fā)展及患者的預(yù)后密切相關(guān);堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)與腫瘤新生血管生成密切相關(guān);促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin,EPO)屬于糖蛋白細(xì)胞因子,可參與腫瘤細(xì)胞抗凋亡、抗缺氧及腫瘤新生血管生成過程,目前,上述三種因子在宮頸癌中表達(dá)情況的臨床報(bào)道相對(duì)少見。基于此,本研究探討HMGA1、bFGF、EPO 在宮頸癌中的表達(dá)及與患者預(yù)后的關(guān)系,以期為臨床提供指導(dǎo)和依據(jù),現(xiàn)報(bào)道如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        選取2017 年1 月至2020 年6 月平煤神馬醫(yī)療集團(tuán)總醫(yī)院收治的宮頸癌患者。納入標(biāo)準(zhǔn):①經(jīng)病理學(xué)檢查確診為宮頸癌;②年齡18~60 歲;③均接受宮頸癌根治術(shù)治療;④術(shù)前未接受放化療等治療;⑤臨床隨訪資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并其他系統(tǒng)惡性腫瘤;②合并免疫系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病。依據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn),本研究共納入98 例宮頸癌患者,年齡(50.98±9.65)歲;體重指數(shù)(body mass index,BMI)為(22.84±3.55)kg/m;已育63 例,未育35 例;絕經(jīng)59 例。同時(shí)選取本院收治的50 例子宮肌瘤患者,均接受子宮全切術(shù)治療,無肝腎功能障礙、免疫系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病等,年齡(49.32±8.19)歲;BMI 為(22.60±4.12)kg/m;已育33例,未育17 例;絕經(jīng)31 例。兩組患者年齡、BMI 和生育情況等臨床特征比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

        P

        ﹥0.05),具有可比性。取98 例宮頸癌患者的宮頸癌組織和50 例子宮內(nèi)膜癌患者的正常宮頸組織,備檢。

        1.2 免疫組化法檢測(cè)HMGA1、bFGF、EPO 的表達(dá)情況

        取98 例宮頸癌組織和50 例正常宮頸組織中性福爾馬林固定,常規(guī)石蠟包埋,切片,厚度為3 μm,烘烤切片,置入10%二甲苯脫蠟10 min,分別置于100%、95%、85%、75%濃度梯度的乙醇中2 min,蒸餾水浸泡2 次,每次2 min。3%過氧化氫去離子水孵育10 min,蒸餾水沖洗2 min,滴加HMGA1、bFGF、EPO一抗和二抗[反應(yīng)條件:37 ℃溫箱孵育20 min,磷酸鹽緩沖液(phosphate buffered solution,PBS)沖洗4 次,每次2 min],二氨基聯(lián)苯胺(diaminobenzidine,DAB)顯色,蘇木素復(fù)染10 min,鹽酸乙醇分化3 s,氨水反藍(lán)3 s,中性樹膠封片。

        1.3 免疫組化法結(jié)果判定

        HMGA1、bFGF、EPO 主要定位于細(xì)胞核,未著色為陰性,細(xì)胞核呈黃色或棕黃色染色為陽(yáng)性,其中著色略深為1 分,著色較深為2 分,明顯加深為3分。陽(yáng)性細(xì)胞所占比例:﹤5%為0 分,5%~10%為1分,11%~25%為2 分,26%~50%為3 分,﹥50%為4分。每張切片隨機(jī)觀察5 個(gè)高倍視野,每個(gè)視野計(jì)數(shù)100 個(gè)細(xì)胞,取平均值。將著色強(qiáng)度與陽(yáng)性細(xì)胞所占比例評(píng)分相加,≥4 分為陽(yáng)性,﹤4 分為陰性。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        2 結(jié)果

        2.1 HMGA1、bFGF、EPO 表達(dá)情況的比較

        宮頸癌組織中HMGA1、bFGF 和EPO 陽(yáng)性表達(dá)率均明顯高于正常宮頸組織,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

        P

        ﹤0.05)。(表1)

        表1 宮頸癌組織和正常宮頸組織中HMGA1、bFGF、EPO陽(yáng)性表達(dá)率的比較[n(%)]

        2.2 不同臨床特征宮頸癌患者宮頸癌組織中HMGA1、bFGF、EPO 表達(dá)情況的比較

        不同年齡、BMI、絕經(jīng)情況、生育情況、病理類型、分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況宮頸癌患者宮頸癌組織中HMGA1、bFGF、EPO 陽(yáng)性表達(dá)率比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

        P

        ﹥0.05)。國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(International Federation of Gynecology and Obstetrics,F(xiàn)IGO)分期為Ⅱ期的宮頸癌患者宮頸癌組織中HMGA1、bFGF 陽(yáng)性表達(dá)率均高于FIGO 分期為Ⅰ期的患者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

        χ

        =7.760、17.626,

        P

        ﹤0.05);FIGO 分期為Ⅱ期、分化程度為低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌患者宮頸癌組織中EPO 陽(yáng)性表達(dá)率均高于FIGO 分期為Ⅰ期、分化程度為中高分化和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

        χ

        =10.906、6.584、7.510,

        P

        ﹤0.05)。(表2)

        表2 不同臨床特征宮頸癌患者宮頸癌組織中HMGA1、bFGF、EPO 陽(yáng)性表達(dá)率的比較(n=98)

        2.3 HMGA1、bFGF、EPO 表達(dá)的相關(guān)性分析

        HMGA1 的表達(dá)與bFGF 的表達(dá)無相關(guān)性(

        P

        ﹥0.05),與EPO 的表達(dá)呈正相關(guān)(

        r

        =0.337,

        P

        ﹤0.05),bFGF 表達(dá)與EPO 的表達(dá)呈正相關(guān)(

        r

        =0.414,

        P

        ﹤0.05)。

        2.4 MGA1、bFGF、EPO 的表達(dá)與宮頸癌患者預(yù)后的關(guān)系

        采用門診、電話隨訪的方式對(duì)宮頸癌患者進(jìn)行5~32 個(gè)月的隨訪,隨訪時(shí)間截至2020 年11 月,98例宮頸癌患者復(fù)發(fā)31 例,未復(fù)發(fā)67 例。復(fù)發(fā)與未復(fù)發(fā)宮頸癌患者的復(fù)發(fā)患者HMGA1、bFGF 陽(yáng)性表達(dá)率比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

        P

        ﹥0.05);復(fù)發(fā)宮頸癌患者EPO 陽(yáng)性表達(dá)率高于未復(fù)發(fā)患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

        P

        ﹤0.05)。(表3)

        表3 復(fù)發(fā)和未復(fù)發(fā)宮頸癌患者HMGA1、bFGF、EPO 陽(yáng)性表達(dá)率的比較[n(%)]

        3 討論

        宮頸癌是女性最常見的惡性腫瘤之一,嚴(yán)重威脅女性的身心健康和生命安全,目前,全球范圍內(nèi),每年新發(fā)宮頸癌患者近50 萬(wàn)例,其中4/5 發(fā)生于發(fā)展中國(guó)家,近年來隨著早期診斷技術(shù)的不斷發(fā)展,宮頸癌的早期診斷率明顯提升。目前,臨床主要采用手術(shù)切除治療早期宮頸癌,手術(shù)更適合應(yīng)用于Ⅰa~Ⅱa 期患者,而晚期病變進(jìn)行手術(shù)治療的預(yù)后較差,可以采取新輔助化療減少病灶間質(zhì)浸潤(rùn)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)后,再進(jìn)行手術(shù)治療。以往臨床主要根據(jù)查體、活檢或內(nèi)鏡檢查結(jié)果明確宮頸癌患者的臨床分期,但由于難以確認(rèn)腫瘤浸潤(rùn)范圍及浸潤(rùn)深度,導(dǎo)致分期準(zhǔn)確度較差,影響了宮頸癌治療方案的確定。早期明確診斷宮頸癌并準(zhǔn)確進(jìn)行臨床分期,對(duì)治療方案的選擇和患者預(yù)后的改善均有重要意義,目前,影響宮頸癌發(fā)病的具體機(jī)制尚未明確,主要經(jīng)過癌前病變、原位癌、浸潤(rùn)癌的連續(xù)演變過程,受到環(huán)境、宿主及病毒等多種因素的影響,因此,如何準(zhǔn)確評(píng)估宮頸癌的病理特征已成為臨床宮頸癌治療的關(guān)鍵。

        本研究探討分子生物學(xué)指標(biāo)HMGA1、bFGF、EPO 在宮頸癌中的表達(dá),其中HMGA1 屬于染色體相關(guān)蛋白,廣泛存在于真核生物細(xì)胞中,研究發(fā)現(xiàn),HMGA1 可影響正常的生物學(xué)過程,通過與核小體結(jié)合參與細(xì)胞分裂過程中的染色體運(yùn)動(dòng),同時(shí)維持染色質(zhì)結(jié)構(gòu),參與基因調(diào)節(jié),通過參與增強(qiáng)子復(fù)合物的形成與蛋白質(zhì)相互作用調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄,并參與長(zhǎng)序列啟動(dòng)子基因的調(diào)控。本研究結(jié)果顯示,HMGA1 在宮頸癌組織中的表達(dá)明顯上調(diào),有學(xué)者發(fā)現(xiàn),HMGA1 在宮頸癌組織中高表達(dá),在正常的宮頸上皮組織中幾乎不表達(dá),且在浸潤(rùn)性宮頸癌中呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),表明HMGA1 可以作為診斷浸潤(rùn)性宮頸癌的重要方法,且其表達(dá)強(qiáng)度與宮頸上皮病變程度呈正相關(guān),與本研究結(jié)果相似。bFGF 一般由內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞分泌,主要作用是促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞游走與平滑肌細(xì)胞增殖,因此,bFGF 具有促進(jìn)腫瘤新生血管生成的作用,有學(xué)者采用免疫組化法檢測(cè)bFGF 在宮頸癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變和正常宮頸組織中的表達(dá)情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn),bFGF 可作為評(píng)估宮頸癌細(xì)胞生物學(xué)行為的客觀指標(biāo),且與宮頸癌患者臨床分期、組織學(xué)分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況和宮旁浸潤(rùn)有關(guān)。EPO則屬于對(duì)熱和酸穩(wěn)定的酸性糖蛋白質(zhì),由淺表腎單位的腎小管周圍毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞或成纖維細(xì)胞合成,研究顯示,腫瘤細(xì)胞分泌EPO,主要參與抗凋亡、抗缺氧、促進(jìn)腫瘤新生血管生成、調(diào)節(jié)免疫功能、協(xié)同相關(guān)細(xì)胞因子的作用,其中促進(jìn)腫瘤新生血管生成是通過促內(nèi)皮細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)變?yōu)楣軤罱Y(jié)構(gòu)、促進(jìn)管狀結(jié)構(gòu)延長(zhǎng)實(shí)現(xiàn)。

        本研究結(jié)果顯示,宮頸癌組織中HMGA1、bFGF 和EPO 的陽(yáng)性表達(dá)率均明顯高于正常宮頸組織,表明HMGA1、bFGF 和EPO 在宮頸癌患者中均呈異常高表達(dá)。本研究結(jié)果顯示,F(xiàn)IGO 分期為Ⅱ期的宮頸癌患者宮頸癌組織中HMGA1、bFGF 陽(yáng)性表達(dá)率均高于FIGO 分期為Ⅰ期的患者,F(xiàn)IGO 分期為Ⅱ期、分化程度為低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌患者宮頸癌組織中EPO 陽(yáng)性表達(dá)率均高于FIGO 分期為Ⅰ期、分化程度為中高分化和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者。表明HMGA1、bFGF、EPO 與腫瘤臨床分期可能有關(guān),EPO 還可能與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和分化程度有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn),EPO 屬于腎臟分泌活性糖蛋白,可造成骨髓中紅系造血祖細(xì)胞增殖、分化,因此,宮頸癌復(fù)發(fā)患者由于腫瘤細(xì)胞增殖可導(dǎo)致EPO 表達(dá)陽(yáng)性。有學(xué)者發(fā)現(xiàn),局部微環(huán)境缺氧是宮頸上皮內(nèi)瘤變進(jìn)展的重要影響因素之一,EPO為缺氧調(diào)節(jié)因子,其過表達(dá)與惡性腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)密切相關(guān),與本研究結(jié)果相似。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),復(fù)發(fā)宮頸癌患者EPO 陽(yáng)性表達(dá)率高于未復(fù)發(fā)患者。本研究探討HMGA1、bFGF、EPO 在宮頸癌中的表達(dá)情況與患者的臨床特征有關(guān),可影響腫瘤的生物學(xué)行為,對(duì)腫瘤的早期診斷、預(yù)后評(píng)估及治療方案的制訂均有重要意義,可通過某種方式下調(diào)或抑制相關(guān)因子的表達(dá)以對(duì)宮頸癌進(jìn)行治療,但仍有待進(jìn)一歩研究。

        綜上述所,HMGA1、bFGF、EPO 在宮頸癌組織中表達(dá)上調(diào),其與宮頸癌患者的FIGO 分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及分化程度可能有關(guān),EPO 的表達(dá)可能與宮頸癌根治術(shù)術(shù)后患者的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)。

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