滕井通,段永波*,晁二昆,薛 濤,孟玲琳,薛建平,盛 瑋*
(1.淮北師范大學信息學院,安徽淮北 235000;2.安徽省特色資源植物利用工程實驗室,淮北師范大學生命科學學院,安徽淮北 235000;3.安徽省正大源飼料集團有限公司,安徽淮北 235000)
在飼料中添加抗生素是當前畜禽養(yǎng)殖中保證動物機體健康的重要技術措施[1],伴隨抗生素的長期使用甚至濫用出現(xiàn)的一系列環(huán)境、健康和生態(tài)問題已引發(fā)各界的關注?!吨腥A人民共和國農業(yè)農村部公告第194 號》規(guī)定,自2020 年7 月起,停止生產(chǎn)添加除中草藥類藥物飼料添加劑的商品飼料,這使得開發(fā)利用具有抗菌保健作用的藥用植物迫在眉睫[2]。由于中草藥飼料添加劑能夠提高機體免疫力、促進動物生長、改善品質,近年來已成為畜禽養(yǎng)殖應用與研究該領域的熱點[3-5]。
王棗子[Isodon amethystoides(Benth.)CY Wu et Hsuan] 為唇形科香茶菜屬多年生草本植物,富含萜類和揮發(fā)油等多種天然活性成分[6-7],1989 年收入《江蘇省中藥材標準》。王棗子具有抗菌消炎、清熱解毒、活血化瘀、抗氧化等功效[8],民間用于治療各種惡瘡、腫瘤、肺結核等多種疾病[9]。本課題組前期在離體條件下的研究發(fā)現(xiàn)王棗子莖葉具有廣泛的抑菌活性[10],在動物體內能否起到抗病增質的作用尚待研究。
本研究以淮北地區(qū)用量最大、具有500 年使用歷史的淮北麻雞為研究對象,探討超微粉碎的王棗子葉對淮北麻雞生長性能、血液生化指標和抗氧化指標的影響,為中草藥王棗子的開發(fā)利用提供理論依據(jù),也為淮北麻雞的無公害養(yǎng)殖提供參考。
1.1 中草藥添加劑的制備 中草藥王棗子葉(安徽宿州綠源中醫(yī)藥科技有限公司)干燥后超微粉碎,過200 目篩,密封保存?zhèn)溆谩?/p>
1.2 試驗設計 選用500 羽健康、體重(37.66±0.97)g 的1日齡淮北麻雞,隨機5 組,每組設5 個重復,每個重復20 羽雞??瞻讓φ战M飼喂基礎日糧,試驗組分別在基礎日糧中添加0.5%、1%、2% 王棗子超微粉,正對照組在基礎日糧中添加50 mg/kg 金霉素。試驗期21 d。
1.3 試驗基礎日糧 基礎日糧為全價配合飼料(表1),由安徽正大源飼料集團有限公司提供。
表1 基礎飼糧組成和營養(yǎng)成分(風干基礎)
1.4 飼養(yǎng)管理 試驗雞全程在淮北市輝煌偉業(yè)農牧有限責任公司養(yǎng)殖場同一雞舍內進行,采用3 層籠飼養(yǎng),每天早晚定時飼喂1 次,自由采食、飲水。光照采用自然光照與人工光照相結合,試驗期間的免疫消毒按常規(guī)程序進行。
1.5 麻雞生產(chǎn)性能測定 準確稱取7、14、21 日齡麻雞空腹重量,統(tǒng)計各重復組1~21 日齡采食量,計算平均日采食量、平均日增重和耗料增重比。
1.6 麻雞血清生化指標測定 各重復選取21 日齡空腹麻雞3 只,翅靜脈采血,3500 r/min 離心10 min 分離血清,使用邁瑞B(yǎng)S-820 全自動生化分析儀測定谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、堿性磷酸酶、乳酸脫氫酶的活性及總蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比例、尿酸、甘油三酯、膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、乳酸脫氫酶含量,試劑盒均為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。
1.7 麻雞血清抗氧化能力測定 每個重復選取21 日齡空腹麻雞3 只,翅靜脈采血,3 500 r/min 離心10 min 分離血清,丙二醛含量、總抗氧化能力、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶活性均用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測定,操作步驟按說明書進行。
1.8 統(tǒng)計分析 用Office Excel 2010 軟件對試驗數(shù)據(jù)進行初步整理,用SPSS 19.0 統(tǒng)計軟件進行分析,差異顯著時用Duncan's 法進行多重比較,測定結果以平均值±標準方差表示。
2.1 王棗子對淮北麻雞生產(chǎn)性能的影響 由表2 可知,7 日齡時,除空白對照組和2%超微粉末組與正對照組麻雞之間平均體重差異顯著(P<0.05)外,其余各組間沒有顯著差異;14 日、21 日齡時,王棗子超微粉組與正對照組麻雞平均體重均高于空白對照(P<0.05),14 日齡時,1%超微粉末組平均體重最高,較空白對照組提高了8.21%(P<0.05);21 日齡時,1%超微粉末組與正對照組平均體重均高于空白對照組(P<0.05)。與空白對照組相比,其余各組1~21 日齡麻雞平均日采食量、平均日增重均增加(P<0.05),而耗料增重比均降低(P<0.05),其中2%超微粉組最低,降低5.33%(P<0.05)。
表2 王棗子對淮北麻雞生產(chǎn)性能的影響
2.2 王棗子對麻雞血清生化指標的影響 由表3 可知,試驗組和正對照組麻雞血清谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、堿性磷酸酶活性均低于空白對照組(P<0.05),1%超微粉組麻雞血清谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶活性最低,分別較空白對照組降低19.23%、11.15%(P<0.05);2%超微粉組麻雞血清堿性磷酸酶活性最低,較空白對照組降低15.22%(P<0.05)。試驗組麻雞血清總蛋白、白蛋白、球蛋白含量均高于空白對照組(P<0.05),1%超微粉組血清總蛋白、球蛋白含量最高,分別較空白對照組提高18.40%、16.98%(P<0.05);2% 超微粉組血清白蛋白含量、白球比例最高,較空白對照組分別提高29.97%、15.15%(P<0.05)。
表3 王棗子對淮北麻雞血液生化指標的影響
與空對照白組相比,試驗組和正對照組麻雞血清尿酸、甘油三酯含量均降低(P<0.05),1% 超微粉組含量最低,較空白對照組分別減少9.40%、29.81%;0.5%、1%超微粉組血清膽固醇含量降低(P<0.05)。1%、2%超微粉組麻雞血清低密度脂蛋白含量低于空白對照組(P<0.05),1% 超微粉組含量最低,較空白對照組降低36.44%。試驗組和正對照組麻雞血清乳酸脫氫酶活性均低于空白對照組(P<0.05),其中1%超微粉含量最低,較空白對照組降低21.54%。
2.3 王棗子對淮北麻雞血清抗氧化指標的影響 由表4可知,試驗組及正對照組麻雞血清中丙二醛含量均低于空白對照組(P<0.05),1% 超微粉組麻雞血清中的丙二醛含量最低,降低了30.63%。試驗組麻雞血清總抗氧能力均高于空白對照及正對照組(P<0.05),1%超微粉組麻雞血清總抗氧能力最高,高于空白對照組57.25%。試驗組及正對照組麻雞血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶活性均高于空白對照組(P<0.05),其中2%超微粉組血清超氧化物歧化酶活性最高,提高了40.90%。1%超微粉組血清谷胱甘肽過氧化物酶活性最高,高于空白對照組25.47%。
表4 王棗子對淮北麻雞血清抗氧化能力的影響
3.1 王棗子對淮北麻雞生產(chǎn)性能的影響 中草藥植物富含維生素、氨基酸、微量元素等營養(yǎng)物質,可補充和平衡動物日糧營養(yǎng)水平[11]。同時,中草藥中的生物活性物質,還能對動物生長發(fā)育和疾病防治起到積極作用[12]。王棗子含有的二萜類(王棗子甲素,王棗子乙素,王棗子丙素等)、齊墩果酸三萜類、生物堿、王棗子油等生物活性成分,具有抗炎和免疫作用[13]。迄今尚無將王棗子作為飼料添加劑應用于養(yǎng)殖業(yè)的報道。何春蘭等[14]研究了王棗子同屬植物溪黃草對三黃肉仔雞生長的影響,發(fā)現(xiàn)2%溪黃草能增加體重和降低耗料增重比,幅度分別為13.1%~22.7%和8.1%~14.2%。本研究發(fā)現(xiàn),飼料中添加1%王棗子超微粉后淮北麻雞平均體重、平均日增重和平均日采食量分別較空白對照組增加12.28%、13.55% 和9.09%,而耗料增重比則降低4.14%,與何春蘭等[14]的研究結果一致,但王棗子劑量僅為溪黃草用量的50%。說明基礎日糧中添加中草藥王棗子,能夠促進淮北麻雞的生長,提高生產(chǎn)性能。
3.2 王棗子對淮北麻雞血清生化指標的影響 血清谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶活性與肝功能關系密切,而堿性磷酸酶在肝臟細胞和骨組織中活躍,血清中轉氨酶及堿性磷酸酶的活性大小在一定程度上均與相關組織受損情況相關[15]。本試驗中,1%王棗子組淮北麻雞血清谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶和堿性磷酸酶活性分別比空白對照組降低19.23%、11.15%和12.32%,與1%~2%金銀花對黃羽肉雞的影響相似[16]。乳酸脫氫酶存在于機體所有組織細胞的胞質內,是糖酵解過程中的一個重要代謝酶,當組織細胞受損時,釋放入血液[16-17]。徐運杰等[18]研究結果表明,白頭翁、馬齒莧、大青葉和秦皮四味中藥的提取物抑制離體雞小腸細胞乳酸脫氫酶的活性,對腸黏膜有顯著的保護作用。本研究中,添加1%王棗子超微粉后,淮北麻雞血清乳酸脫氫酶活性較空白對照組降低了21.54%,乳酸脫氫酶活性變化趨勢說明麻雞日糧添加中草藥王棗子對肝臟、骨組織、細胞組織等具有保護作用。
血液中總蛋白和球蛋白的含量能反映動物機體對蛋白質的吸收、合成、分解等代謝狀況,與機體生長和飼料利用率相關[19]。本研究中,添加不同劑量王棗子均提高了淮北麻雞血清總蛋白、白蛋白和球蛋白含量,其中1%超微粉組總蛋白和球蛋白分別比空白對照組提高18.40%和16.98%;1%超微粉組血清甘油三脂和低密度脂蛋白含量分別比空白對照組降低29.81%和36.44%,但膽固醇、高密度脂蛋白含量無顯著變化。本研究結果說明王棗子添加劑能增強淮北麻雞消化吸收能力,促進蛋白質攝取,提高免疫和抗病能力,促進生長。
3.3 王棗子對淮北麻雞血清抗氧化指標的影響 機體內適量自由基有益動物生長,但累積量過高時則會對動物機體和器官產(chǎn)生病理損害[20]。超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶是機體產(chǎn)生的內源性抗自由基活性物質,能清除活性氧自由基,提高機體抗氧化能力。丙二醛能通過氧化細胞膜中多不飽和脂肪酸而破壞細胞膜的完整性,嚴重損傷細胞膜,因此胞內的丙二醛濃度是脂質過氧化強度和膜系統(tǒng)傷害程度的重要指標[21]。本研究中3 個王棗子處理組的淮北麻雞血清SOD 活性均比空白對照組顯著提高,其中2%王棗子組提高40.9%,且SOD 活性比正對照組提高20.80%;不同劑量試驗組血清谷胱甘肽過氧化物酶比空白對照組顯著提高,其中1%組提高25.47%,且比正對照組升高16.49%;0.5%、1%和2%超微粉組總抗氧化能力比空白對照組分別增加44.47%、57.25%和35.63%,較正對照組分別提高20.49%、31.15%、13.11%;1%和2%超微粉組淮北麻雞血清中丙二醛含量比空白對照組和正對照組均顯著降低。李萬軍[22]研究結果表明,復方中草藥制劑可改善肉仔雞血清抗氧化指標。雖然本研究中王棗子處理同樣提高了淮北麻雞的抗氧化指標,但具體指標及變化幅度有一定差異,可能與試驗雞的品種及中草藥活性成分不同有關。
本研究結果表明,淮北麻雞日糧中添加中草藥王棗子葉超微粉劑能改善麻雞生長性能和血清生理生化指標,提高機體抗氧化能力,以添加量為1%時效果最佳。