張 理，王 翠，諸兆美，王良平，王 鵬，劉依霜，徐生洋（通訊作者）

（1 攀枝花市中心醫(yī)院核醫(yī)學科 四川 攀枝花 617000）

（2 攀枝花市中心醫(yī)院檢驗科 四川 攀枝花 617000）

宮頸癌是女性常見的惡性腫瘤之一[1]，全球每年新增約50 萬例宮頸癌患者，我國約占1/4[2-3]，人乳頭瘤病毒（human papilloma virus, HPV）作為一種嗜上皮性、定向感染人體皮膚及黏膜復層鱗狀上皮并可使其發(fā)生增生性病變的雙鏈DNA 小分子病毒，已知的100 多種HPV亞型中，與人類生殖器皮膚黏膜病變有關亞型超過40 種，約1/3 與宮頸癌密切相關[4]。我國女性的HPV 感染率大于15%，其亞型中高危型約占1/3[5]，高危型HPV 檢測有利于宮頸癌的早期發(fā)現(xiàn)與預防，但HPV 感染分布表現(xiàn)特異的地域性和年齡分布[6-7]。基于此，本研究擬采用多聚酶鏈式反應（PCR）-DNA 反向點雜交相結(jié)合的基因檢測技術(shù)，對我院就診的女性患者進行HPV 基因檢測（共25 種亞型），探究本地區(qū)HPV 感染分布情況。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2016 年1 月—2019 年10 月在攀枝花市中心醫(yī)院就診的女性患者81 856 例，年齡18 ～80 歲。

1.2 標本采集與處理

由婦科醫(yī)師規(guī)范取樣：使用窺陰器或陰道擴張器充分暴露子宮頸，用棉拭子清潔宮頸口，擦去過多的分泌物，在宮頸口放置采樣刷，順時針方向刷取4 ～5 圈后慢慢抽出刷頭，將獲得的足夠多的宮頸上皮細胞標本放入專用洗脫試管中，擰緊管蓋，直立采集管后放入-20 ℃冰箱保存，2 星期內(nèi)進行檢測。

1.3 檢測流程

嚴格按照艾康生物技術(shù)有限公司人乳頭瘤病毒基因分型25 型檢測試劑盒的說明書進行操作，簡單描述如下：樣本DNA 提取，PCR 擴增，導流雜交，洗膜顯色，結(jié)果判讀，根據(jù)樣本檢測位點出現(xiàn)信號與否進行判斷，除CC 和IC 位點外各檢測位點出現(xiàn)信號，說明感染了相應基因型的HPV（包括單一感染和混合感染）。

1.4 試劑儀器

PCR 儀和雜交儀（熒光定量基因擴增PCR 檢測系統(tǒng)TL988 型和PCR 基因擴增熱循環(huán)儀DTC 型）均來自西安天隆科技有限公司，配套試劑購自艾康生物技術(shù)有限公司，對25 種常見的HPV 亞型進行分型檢測，包括17 種高 危 型：16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73 和8 種 低 危 型：6、11、40、42、43、44、81、83。

1.5 統(tǒng)計學方法

應用SPSS 29.0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)數(shù)據(jù)用（%）表示，不同年齡段間的發(fā)生率比較采用χ2檢驗，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2.結(jié)果

2.1 不同年齡段感染情況

在81 856 例患者中，5 組年齡段感染百分構(gòu)成分別為：3.33%、14.15%、25.55%、37.77%、19.21%。5 組年齡段百分構(gòu)成比較差異有統(tǒng)計學意義（χ2=23.7，P＜0.05），見表1。

表1 3 455 例HPV 感染者各年齡段感染構(gòu)成情況比較

3.討論

本文結(jié)果顯示本地區(qū)HPV 感染率為4.22%，低于我國2017年HPV的感染率16.8%[8]。與四川其他地區(qū)相比較，遠低于成都地區(qū)的36.94%[9]、瀘州地區(qū)的54.7%[10]、德陽地區(qū)的33.58%[11]、南充地區(qū)的17.5%[12]。攀枝花地區(qū)人口較上述地區(qū)少，交通、經(jīng)濟欠發(fā)達，HPV 感染檢出率及傳染率較低，是本地區(qū)陽性率偏低的主要原因。這與其他學者中提出的：不同國家，不同省市地區(qū)，HPV感染分布都有所不同，表現(xiàn)特異的地域性和年齡分布的結(jié)論一致。

據(jù)資料顯示，我國大陸地區(qū)流行的高危型HPV 主要包括HPV16、58、52、18、33 和31 這6 種亞型。HPV16在不同地區(qū)和不同人群中的感染率高達60.54%，其后依次是HPV18、58、52，三種亞型所占比例相當。在健康女性和婦科門診就診的女性中，感染率位于HPV16 以后的亞型依次為HPV52、58、18[9]。本研究中，高危型HPV 占比從大到小前八位依次為52、16、58、53、39、51、81、56 型，HPV33 為第11 位，58 為第17 位，與上述研究流行病數(shù)據(jù)不同，這也證實了HPV 不同亞型感染率的確存在差異。與目前最新研究認為的國人HPV52 和58 致癌性超越了HPV18 僅次于HPV16 的結(jié)論一致，例如2015 年北京及上海地區(qū)HPV58 和HPV52 感染率較HPV16的感染率更高[13]。

另外在我們的研究中，不同年齡組HPV 感染表現(xiàn)出有意義的差異（P＜0.05），HPV 檢出陽性率在5 組年齡段人群中表現(xiàn)出兩個高峰：以30 ～歲、40 ～歲兩個年齡段占比最高，分別為：25.55%、37.77%；＜20 歲組陽性率最小，僅有3.33%。提示了本地區(qū)宮頸癌篩查的高危人群年齡分布情況，探討其原因，＜20 歲年齡組感染率低可能原因是性生活不頻繁、接觸性生活時間短以及規(guī)律的作息和良好衛(wèi)生習慣有關，隨著年紀的增長，體內(nèi)激素水平和性生活習慣以及免疫力降低等因素，致HPV 感染陽性率增加。

本文結(jié)果針對本地區(qū)人群，較其他地區(qū)相關結(jié)果表現(xiàn)出共性和特性，更有利于完善本地區(qū)婦女HPV 監(jiān)測體系，為HPV 疫苗研發(fā)、使用及宮頸癌防治提供支撐依據(jù)。另外，5 個不同年齡組別中，除＜20 歲年齡組別中以HPV16 亞型最多見，其他4 個年齡組別均為HPV52 最多，也印證了HPV16、52 亞型的高感染率。對比既往本地區(qū)HPV 感染率調(diào)查情況，隨訪患者更多，樣本量更大，且對HPV 感染進行亞型分析，進一步佐證了相關數(shù)據(jù)。

綜上所述，本地區(qū)HPV 感染分型和年齡段分布具有區(qū)域特異性，感染以青中年居多，呈現(xiàn)中年化趨勢，應針對本地區(qū)進行有針對性的篩查、宣傳及注射疫苗。