于秀娟，張 鶴，張 雷

（1.山東省濟(jì)寧市金鄉(xiāng)縣人民醫(yī)院輸血科，山東 濟(jì)寧 272200；2.長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院實(shí)驗(yàn)中心，長春 130021；3.長春中醫(yī)藥大學(xué)，長春 130117）

輸血是臨床救治活動(dòng)中的常用手段，尤其一些慢性貧血患者，需長期輸注血液，而長期輸血的患者，體內(nèi)產(chǎn)生不規(guī)則抗體（irregular antibody）概率增加。不規(guī)則抗體是指抗-A、抗-B抗體以外的其他紅細(xì)胞抗體的統(tǒng)稱，又名意外抗體。意外抗體包括同種抗體和自身抗體2種[1]。不規(guī)則抗體的出現(xiàn)增加了配血難度，同時(shí)影響患者輸血安全。在輸血方面，不規(guī)則抗體可能會(huì)引起溶血性輸血反應(yīng)、紅細(xì)胞/血小板輸注無效等；另一方面，對(duì)孕婦與胎兒也有重要意義，如新生兒溶血性等[2]。不規(guī)則抗體篩查的方法有多種，如鹽水法、凝聚胺法、酶法、微柱凝膠法及抗人球蛋白法等。本研究選用抗人球蛋白與微柱凝膠法相結(jié)合的方法，以期進(jìn)一步提高實(shí)驗(yàn)的靈敏度與特異度。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選擇2020年1月－2021年1月在本院申請(qǐng)常規(guī)輸血治療的患者323例作為研究對(duì)象。實(shí)驗(yàn)組160例，男78例，女82例，年齡22～81歲，平均（49.33±12.23）歲；對(duì)照組163例，男82例，女91例，年齡20～80歲，平均（47.95±11.78）歲，2組年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?；颊呔陷斞刚?，均通過本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 試劑與儀器

抗人球蛋白檢測(cè)卡和185015全自動(dòng)血型分析儀購自長春博訊生物技術(shù)有限責(zé)任公司，抗體篩選紅細(xì)胞試劑盒均購自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，F(xiàn)YQ型試劑卡孵育器和TD-A型微柱凝膠卡醫(yī)用離心機(jī)購自長春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司，BASO2005-1醫(yī)用低速離心機(jī)產(chǎn)自臺(tái)灣貝索，320C醫(yī)用低速離心機(jī)產(chǎn)自北京白洋。

1.3 檢查方法

采集患者空腹靜脈血約5 mL于EDTA-K2 抗凝管中，收集所有標(biāo)本置320 C醫(yī)用低速離心機(jī)中離心5 min，分離轉(zhuǎn)速3 000 r·min-1，離心半徑10 cm，編號(hào)后使用185015全自動(dòng)血型分析儀對(duì)實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，采用抗人球蛋白微柱凝膠法。對(duì)于不規(guī)則抗體篩查結(jié)果為陽性的標(biāo)本，經(jīng)過患者知情同意后送市中心血站進(jìn)行抗體鑒定，明確抗體后選擇對(duì)應(yīng)不規(guī)則抗體抗原陰性的去白懸浮紅細(xì)胞進(jìn)行輸注；對(duì)照組使用凝聚胺法進(jìn)行交叉配血。所有患者連續(xù)2 d在同一時(shí)間段內(nèi)輸注2U去白懸浮紅細(xì)胞24 h后，抽取空腹5 mL EDTA-K2抗凝全血標(biāo)本，檢測(cè)血常規(guī)，記錄血紅蛋白值與紅細(xì)胞容積及輸血相關(guān)性不良反應(yīng)（如溶血反應(yīng)、發(fā)熱、過敏反應(yīng)、輸注無效等）。對(duì)2組患者的輸血療效進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有標(biāo)本均通過患者或其家屬知情同意。

1.4 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)不規(guī)則抗體檢出的陽性標(biāo)準(zhǔn)[3]，凡是微柱凝膠卡中出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集顆?；蛉苎磻?yīng)，即認(rèn)為是陽性結(jié)果，當(dāng)紅細(xì)胞沉積于凝膠柱的底部時(shí)則判斷為陰性結(jié)果。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分率表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則抗體陽性率統(tǒng)計(jì)

見表1。實(shí)驗(yàn)組（160例）不規(guī)則抗體陽性患者共9例，陽性檢出率為5.62%，其中男3例（22.22%）女6例（66.67%）。6例女性患者均有妊娠史及三次以上輸血史，3例男性患者也有3次以上輸血史。9例陽性標(biāo)本送市中心血站進(jìn)行鑒定，分別為抗-D 1例，抗-cE 5例，抗-M 3例。經(jīng)SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算得出 χ2=5.81，χ2＞X20.05（1），P＜ 0.05，在α=0.05水平上，拒絕H0，接受H1，2組總體率不相等，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 實(shí)驗(yàn)組不規(guī)則抗體檢出率

2.2 輸血后療效評(píng)價(jià)

對(duì)2組患者的輸血療效進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果見表2、表3。經(jīng)SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算得出χ2=9.69，χ2＞X20.01（1），P＜ 0.01，在 α=0.01水平上，拒絕H0，接受H1，2組總體率不相等，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表 2 輸血相關(guān)性不良反應(yīng)分析

表 3 輸血后療效評(píng)估對(duì)比

3 討論

科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，臨床救治方法日新月異，但輸血治療仍是不可替代的手段之一。自1901年Landsteiner發(fā)現(xiàn)ABO血型系統(tǒng)后，截至2017年，已發(fā)現(xiàn)血型系統(tǒng)36種，346個(gè)血型抗原[4]。因血型系統(tǒng)的復(fù)雜多樣，當(dāng)機(jī)體受到異體抗原如異體血液輸注、母嬰血型不合妊娠、藥物等刺激后，就可能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。隨著輸血醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展，因ABO血型不合引起的輸血不良反應(yīng)已大大減少，但因非ABO血型抗體引起的輸血不良反應(yīng)時(shí)有發(fā)生，影響輸血安全，嚴(yán)重者可危及患者生命[5-6]。

本研究通過對(duì)本院申請(qǐng)常規(guī)輸血治療的323例患者進(jìn)行研究后發(fā)現(xiàn)，女性不規(guī)則抗體陽性率（66.67%）要高于男性（22.22%），這可能與女性妊娠等因素有關(guān)[7]，且陽性患者均具有輸血史及妊娠史，由此可以推斷輸血及妊娠是不規(guī)則抗體產(chǎn)生的重要誘因[8-10]。經(jīng)過2組患者輸血后的療效評(píng)估后發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過血站精準(zhǔn)配血，選擇不規(guī)則抗體對(duì)應(yīng)抗原陰性的懸浮紅細(xì)胞輸注后，患者缺氧癥狀明顯改善，血紅蛋白回升明顯，而對(duì)照組患者輸注去白懸浮紅細(xì)胞后，出現(xiàn)輸血反應(yīng)（發(fā)熱、皮疹等）的概率明顯增多，輸血后患者缺氧癥狀改善不明顯，血紅蛋白升高不顯著，有些患者不升反降。由此可知，不規(guī)則抗體可能影響患者的輸血療效，增加輸血反應(yīng)的發(fā)生率[11]。

本實(shí)驗(yàn)不規(guī)則抗體陽性患者中以RH血型系統(tǒng)為主，與研究[12-14]結(jié)果一致。RH血型系統(tǒng)所產(chǎn)生的抗體均為IgG類抗體，此類抗體對(duì)輸血及妊娠患者均具有臨床意義，可引起溶血性輸血反應(yīng)及嚴(yán)重的新生兒溶血病。因此，在輸血前進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，是保證患者輸血安全不可缺少的環(huán)節(jié)[15]，陽性者通過不規(guī)則抗體鑒定后，選擇與患者配型相一致的血液進(jìn)行輸注，即可最大限度減少輸血相關(guān)性溶血反應(yīng)的發(fā)生，同理，對(duì)妊娠患者進(jìn)行產(chǎn)前不規(guī)則抗體的篩查，可提前預(yù)測(cè)是否存在新生兒溶血病的可能，尤其是RH陰性孕婦，具有重要臨床意義[2]。

綜上所述，對(duì)患者進(jìn)行輸血前不規(guī)則抗體篩查可大大降低輸血相關(guān)性溶血反應(yīng)的發(fā)生，有助于確保患者輸血安全，提高輸血療效，對(duì)需要輸血治療的患者具有重要臨床意義。