張志鴻
(漳州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所,福建 漳州 363005)
毛木耳(Auricularia cornea),是白背毛木耳和黃背毛木耳的統(tǒng)稱(chēng),屬擔(dān)子菌亞門(mén)(Basidiomycotina)層菌綱 (Hymenomycetes) 木耳目 (Auriculariales)木耳科(Auriculariaceae) 木耳屬(Auricularia)。白背毛木耳的粗蛋白、氨基酸、糖類(lèi)等營(yíng)養(yǎng)成分豐富,具有抗腫瘤、抗凝血、抗氧化和增強(qiáng)免疫力等功能[1-3]。其耳片含較多的膠質(zhì),質(zhì)地脆嫩,有“樹(shù)上海蜇皮”的美稱(chēng),具有較優(yōu)的食用價(jià)值和藥用價(jià)值,深受?chē)?guó)內(nèi)外消費(fèi)者的歡迎。白背毛木耳從中國(guó)臺(tái)灣引進(jìn)栽培后,對(duì)其研究主要集中在栽培技術(shù)、品種改良選育及產(chǎn)品食(藥)用價(jià)值等方面[4-7]。在代料栽培中,木屑、麥麩分別是其主要的碳、氮源營(yíng)養(yǎng)[8-9]。隨著食用菌產(chǎn)業(yè)的迅猛發(fā)展,國(guó)家生態(tài)政策的調(diào)整,林木資源的保護(hù),木屑價(jià)格水漲船高;而規(guī)?;?、產(chǎn)業(yè)化的養(yǎng)牛場(chǎng)增加,牛糞的收集變得簡(jiǎn)單,利用好這一資源有利于白背毛木耳產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。
牛糞中含有有機(jī)質(zhì)14.5%、氮(N) 0.30%~0.45%、磷(P5O2)0.15%~0.25%、鉀(K2O)0.10%~0.15%;干物質(zhì)中含有粗蛋白10%~20%、粗脂肪1%~3%、無(wú)氮浸出物20%~30%、粗纖維15%~30%,具有較高的養(yǎng)分[10]。一直以來(lái)牛糞常添加于草腐類(lèi)食用菌栽培料中,目前大量應(yīng)用于雙孢蘑菇(Agaricus bisporus)、草菇 (Volvariella volvacea) 栽培中,在平菇 (Pleurotus ostreatus) 及杏鮑菇 (Pieurotus eryngii)的栽培中也有部分使用[11-12],但在木腐類(lèi)毛木耳栽培生產(chǎn)中卻少有利用。
建堆發(fā)酵是白背毛木耳穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)的關(guān)鍵環(huán)節(jié),近年來(lái)隨著人工費(fèi)用的增加及勞動(dòng)力的減少,在生產(chǎn)環(huán)節(jié)中容易忽視發(fā)酵的細(xì)節(jié),栽培中出現(xiàn)了減產(chǎn)、病蟲(chóng)害增多等諸多問(wèn)題[13]。針對(duì)以上問(wèn)題,在常規(guī)栽培配方中添加牛糞,以常規(guī)生產(chǎn)配方和近幾年主推的優(yōu)選配方作為對(duì)照,通過(guò)不同發(fā)酵時(shí)間的處理,研究添加牛糞及發(fā)酵處理在毛木耳栽培中的效果,以期開(kāi)發(fā)新的栽培原料,提高毛木耳產(chǎn)量和栽培效益,進(jìn)一步指導(dǎo)毛木耳高效生產(chǎn)。
1.1.1 菌種
供試菌種是漳州主栽品種“漳耳43-28”,由漳州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所提供。
1.1.2 培養(yǎng)基原料
木屑為桉樹(shù)木材加工后的剩余物,收集后放在室外經(jīng)雨淋3個(gè)月以上后使用;牛糞為散養(yǎng)黃牛和水牛糞便經(jīng)曬干后備用;中禾牌豆粕,廈門(mén)中禾實(shí)業(yè)有限公司;利生牌麥麩,山東利生集團(tuán);雪巖牌輕質(zhì)碳酸鈣,龍巖市永定區(qū)豐源鈣業(yè)有限公司。
1.2.1 菌種制作與培養(yǎng)
母種:在普通PDA斜面培養(yǎng)基上接種,25℃培養(yǎng)12 d。
原種、栽培種配方制作:按木屑90%、麥麩8%、輕質(zhì)碳酸鈣1%、石灰粉1%的比例將原料攪拌均勻,調(diào)節(jié)含水量約65%,裝入750 mL的玻璃菌種瓶?jī)?nèi),121℃滅菌2 h,冷卻后接種并置于25℃的菌種房培養(yǎng)。
1.2.2 試驗(yàn)配方及處理
試驗(yàn)配方及處理具體見(jiàn)表1。
表1 試驗(yàn)配方及處理Tab.1 Test formula and treatment
1.2.3 發(fā)酵料的處理
7月下旬或8月開(kāi)始建堆,將經(jīng)雨淋后的木屑根據(jù)場(chǎng)地情況建堆。在木屑上面均勻鋪上麥麩、豆粕、輕質(zhì)碳酸鈣和經(jīng)過(guò)預(yù)濕處理的牛糞等原料,再用翻料機(jī)進(jìn)行翻料、建堆,使料高不超過(guò)1.5 m,寬度和長(zhǎng)度不限。經(jīng)過(guò)3 d~5 d發(fā)酵,料中心的溫度可達(dá)65℃以上,一般情況下建堆后第5天開(kāi)始翻堆,以后每隔7 d翻堆1次;每次翻堆前查看原料的含水量在65%為宜,不足時(shí)先對(duì)堆料進(jìn)行均勻淋水后再翻料;每次翻堆后用粗木棍從中心向兩側(cè)打孔直至距邊緣1 m,孔距50 cm×50 cm,各配方處理發(fā)酵后裝袋滅菌[14-15]。發(fā)酵完成的標(biāo)準(zhǔn)是原料深褐色,味道清香,無(wú)酸臭、氨氣等異味。
不進(jìn)行發(fā)酵處理(配方1)的牛糞提前1 d預(yù)濕處理。將經(jīng)過(guò)預(yù)濕的牛糞和其他原料按配方混合攪拌均勻,調(diào)節(jié)含水量約為65%即可裝袋滅菌。
1.2.4 栽培方法
采用38 cm×17 cm厚度聚丙烯塑料袋裝料,裝袋機(jī)制包,每袋料平均干重約500 g,每個(gè)配方200袋,常壓滅菌10 h,冷卻后接種栽培種。接種后分4個(gè)重復(fù)排列上架置于栽培大棚內(nèi),在常溫下進(jìn)行菌絲培養(yǎng)和出耳管理。
1.3.1 菌絲生長(zhǎng)速度
每個(gè)處理隨機(jī)選取3袋~6袋,每周劃生長(zhǎng)線(xiàn),測(cè)量菌絲生長(zhǎng)的長(zhǎng)度,記錄菌絲滿(mǎn)袋時(shí)間,并計(jì)算平均滿(mǎn)袋時(shí)間。
1.3.2 污染率的計(jì)算
在試驗(yàn)區(qū)域中相同的位置每個(gè)處理選取84袋作為固定觀察對(duì)象,記錄污染袋數(shù)。
1.3.3 產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)
各處理的子實(shí)體分別采收、曬干后稱(chēng)重,按照生產(chǎn)上架的總袋數(shù)統(tǒng)計(jì)每個(gè)處理的單袋產(chǎn)量。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用計(jì)算機(jī)統(tǒng)計(jì)軟件Microsoft Excel和DPS 7.01進(jìn)行分析,用F檢驗(yàn)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)分析,采用Tukey法進(jìn)行多重比較。
各處理菌絲的生長(zhǎng)速度見(jiàn)表2。
表2 不同處理不同時(shí)間段菌絲生長(zhǎng)速度統(tǒng)計(jì)Tab.2 Statistics of mycelium growth rate with different treatments and different time periods
由表2可知,對(duì)照CK1的菌絲平均生長(zhǎng)速度最快(0.420 cm·d-1),處理1和CK2的平均生長(zhǎng)速度分別為0.335 cm·d-1和0.318 cm·d-1,比其他處理生長(zhǎng)速度略慢。經(jīng)方差分析各處理間菌絲生長(zhǎng)速度差異不顯著,表明不同處理對(duì)菌絲的生長(zhǎng)速度影響較小。但生長(zhǎng)速度與菌絲生長(zhǎng)的時(shí)間段有關(guān),原因可能與各時(shí)段的積溫相關(guān)。在適宜的生長(zhǎng)溫度范圍內(nèi),溫度越高生長(zhǎng)速度越快。或是受到不透氣塑料袋的束縛和菌絲生長(zhǎng)量增多的雙重影響,氧氣量不夠造成菌絲的生長(zhǎng)速度下降。
各個(gè)處理污染率的調(diào)查結(jié)果見(jiàn)表3。
由表3可知,除了不發(fā)酵的配方1污染率高達(dá)46.4%,其他添加牛糞的處理與2個(gè)對(duì)照相比差異不顯著。配方2經(jīng)17 d發(fā)酵處理的污染率與配方3~配方6分別發(fā)酵28 d、38 d、43 d、48 d相比無(wú)差異,和2個(gè)對(duì)照比較也沒(méi)有顯著差異,說(shuō)明添加牛糞發(fā)酵17 d即可達(dá)到降低污染率的效果。
表3 污染率調(diào)查統(tǒng)計(jì)表Tab.3 Pollution rate survey statistics
各配方對(duì)白背毛木耳產(chǎn)量的影響見(jiàn)表4。
由表4可知,各處理對(duì)白背毛木耳第一潮耳產(chǎn)量、第二潮耳產(chǎn)量、總產(chǎn)量的影響較大。第一潮耳的平均產(chǎn)量為CK2>配方4>配方5>配方2>配方6>CK1>配方3>配方1,分析結(jié)果表明處理間存在極顯著差異。配方2~配方5、CK1、CK2共7個(gè)處理間無(wú)差異;配方1與配方2~配方6、CK1、CK2間有極顯著差異。添加牛糞組不經(jīng)發(fā)酵處理的不適合白背毛木耳栽培,對(duì)第一潮產(chǎn)量影響很大,其他添加牛糞處理與2個(gè)對(duì)照在第一潮產(chǎn)量的比較中差別不大。
表4 產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)表Tab.4 Yield statistics
第二潮耳平均產(chǎn)量為配方3>配方5>配方6>CK2>配方2>CK1>配方4>配方1,方差分析結(jié)果顯示各處理間無(wú)顯著差異。
各處理平均總產(chǎn)量為CK2>配方5>配方4>配方2>配方6>配方3>CK1>配方1,CK2、配方5、配方4、配方2、配方6、配方3、CK1間無(wú)顯著差異,與配方1存在極顯著差異??梢?jiàn)白背毛木耳栽培中,基質(zhì)的發(fā)酵處理是栽培取得成功的重要因素;添加牛糞基質(zhì)經(jīng)過(guò)發(fā)酵處理與對(duì)照組相比無(wú)差異。配方2與配方3,配方4與配方6是同一批原料的不同處理,隨著發(fā)酵時(shí)間的增加,產(chǎn)量略微降低。
食用菌栽培基質(zhì)配方不同,其孔隙度和持水率不同,從而影響菌絲的生長(zhǎng)速度[16]。研究中不同處理間菌絲生長(zhǎng)速度無(wú)顯著差異,說(shuō)明各個(gè)處理基質(zhì)的物理性質(zhì)對(duì)菌絲的生長(zhǎng)速度影響不大。主要因?yàn)榕囵B(yǎng)料配方中以木屑為主,牛糞的添加量少,基本沒(méi)有改變基質(zhì)的物理結(jié)構(gòu)。試驗(yàn)同時(shí)也發(fā)現(xiàn),菌絲生長(zhǎng)速度與制包時(shí)間相關(guān)性更大。在合適的季節(jié),越早制包,栽培環(huán)境溫度較高,生長(zhǎng)速度越快;時(shí)間越遲,總積溫較低,菌絲生長(zhǎng)速度較慢。
菌棒污染率方面分析,不發(fā)酵處理的菌袋污染率高,發(fā)酵料的污染率低。添加牛糞的發(fā)酵料污染率與對(duì)照處理無(wú)顯著差異,利用發(fā)酵料生產(chǎn)可以提高毛木耳栽培的成功率。不發(fā)酵處理的污染病原菌主要是綠霉(Trichoderma viride)、鏈孢霉(Neurospora sitophila)等競(jìng)爭(zhēng)性雜菌,在接種、培養(yǎng)過(guò)程中均可能感染,這與開(kāi)放式的接種模式有較大的相關(guān)性;同時(shí)為便于生產(chǎn)和菌絲生長(zhǎng)呼吸。白背毛木耳在生產(chǎn)接種后袋口不扎緊且無(wú)棉塞過(guò)濾,這可能是造成污染的原因之一。培養(yǎng)料的堆積發(fā)酵是生物、物理、化學(xué)變化的過(guò)程,通過(guò)培養(yǎng)料的發(fā)酵可以使有害真菌的數(shù)量銳減,再經(jīng)高溫滅菌,使得培養(yǎng)料的可溶性糖降低,不利于雜菌孢子的萌發(fā)和菌絲生長(zhǎng),因此可以在開(kāi)放空間接種而只產(chǎn)生較少污染,提高菌包生產(chǎn)的穩(wěn)定性[17-19]。調(diào)查過(guò)程中也發(fā)現(xiàn)部分污染是由于菌包受到菇蚊、癭蚊危害后引起。因此在生產(chǎn)過(guò)程中做好環(huán)境衛(wèi)生和蟲(chóng)害的消殺也非常重要,污染會(huì)影響生產(chǎn)的成功率,進(jìn)而影響產(chǎn)量和收益。
添加牛糞栽培白背毛木耳,不發(fā)酵的基質(zhì)栽培效果差,表現(xiàn)為菌絲生長(zhǎng)速度慢、菌包污染率高、產(chǎn)量低。經(jīng)過(guò)發(fā)酵的基質(zhì)栽培效果好,菌包污染率低、產(chǎn)量高,這可能與牛糞的物理結(jié)構(gòu)和微生物種群數(shù)量有關(guān),使栽培基質(zhì)能較快、較好地促進(jìn)微生物活性。添加牛糞的不同發(fā)酵時(shí)間處理中,17 d發(fā)酵和28 d、38 d、43 d、48 d發(fā)酵處理在菌絲生長(zhǎng)速度、菌包污染率、產(chǎn)量等方面差異不顯著,所有處理產(chǎn)量均比CK1常規(guī)配方的效果好;發(fā)酵完成標(biāo)準(zhǔn)與優(yōu)選配方CK2比較,添加牛糞處理的產(chǎn)量略低,但發(fā)酵時(shí)間可以縮短,生產(chǎn)中可以更好地把握白背毛木耳的最佳生產(chǎn)季節(jié),增加第一潮耳的產(chǎn)量、增加收益,同時(shí)提高發(fā)酵場(chǎng)地的使用率,使栽培技術(shù)具有較好的穩(wěn)定性。
牛糞是栽培白背毛木耳較優(yōu)的原料,經(jīng)過(guò)發(fā)酵的栽培基質(zhì)有利于促進(jìn)菌絲生長(zhǎng)、降低菌包污染率、提高產(chǎn)量,且經(jīng)過(guò)17 d的發(fā)酵即可以達(dá)到較好的效果。牛糞本身的氮源并不多,其所含有機(jī)質(zhì)是否會(huì)提高白背毛木耳的品質(zhì),還有待于進(jìn)一步的分析。經(jīng)濟(jì)效益比較也是重要的指標(biāo),是考核配方推廣的指標(biāo)之一,可通過(guò)進(jìn)一步的試驗(yàn)來(lái)考評(píng)。