劉保財(cái) 陳菁瑛 李西文 張武君 黃穎楨 趙云青

(1福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)生物資源研究所福建福州350003;2中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所北京100700;3福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院藥用植物研究中心福建福州350003)

馬藍(lán)Strobilanthes cusia（Nees）Kuntze Revis.系爵床科Acanthaceae馬藍(lán)屬Strobilan‐thes植物［1］，其莖、葉常被加工為中藥飲片青黛，具有清熱解毒、涼血消斑、瀉火定驚等功效，主治溫毒發(fā)斑、血熱吐岫、胸痛咳血、口瘡、痄腮、喉痹、小兒驚癇；其根與根莖作為中藥飲片南板藍(lán)根，具有清熱解毒、涼血消斑的功效，主治溫疫時(shí)毒、發(fā)熱咽痛、溫毒發(fā)斑、丹毒［2］；其葉常作為大青葉，具有清熱解毒、涼血止血的功效，主治溫?zé)岵?、高熱頭疼、發(fā)斑、肺熱咳嗽、濕熱瀉痢、黃疸、丹毒、猩紅熱、麻疹、咽喉腫痛、吐血、牙齦出血、蛇蟲咬傷等［3］?，F(xiàn)代生化研究表明，馬藍(lán)含有色胺酮、2-苯并噁唑酮、靛玉紅、阿克苷、角胡麻苷等生化成分，并且結(jié)構(gòu)上存在諸多異構(gòu)現(xiàn)象，在臨床上具有廣泛的應(yīng)用［4-7］。

馬藍(lán)最早見于春秋戰(zhàn)國(guó)時(shí)期《爾雅·釋草》：“箴，馬藍(lán)?！?，傳統(tǒng)用于染料、藥用等，在中國(guó)具有較長(zhǎng)的使用史和栽培史［8-9］。近年對(duì)其基因、代謝、合成、藥理［10-13］等方面做了深入研究。然而關(guān)于其當(dāng)前主產(chǎn)區(qū)的生產(chǎn)概況、植株的形態(tài)特征差異、各地開發(fā)利用情況研究較少。盲目地跟風(fēng)種植造成資源浪費(fèi)、價(jià)格時(shí)高時(shí)低，農(nóng)民、藥企利益受損，并且影響產(chǎn)品質(zhì)量。為此，筆者對(duì)國(guó)內(nèi)馬藍(lán)主產(chǎn)區(qū)進(jìn)行走訪調(diào)查，研究其主產(chǎn)區(qū)的分布及馬藍(lán)種植面積、栽培方式、形態(tài)特征差異、成分含量等，以期為馬藍(lán)產(chǎn)業(yè)的良性發(fā)展奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 調(diào)查地點(diǎn)

地點(diǎn)位于福建省仙游縣、貴州省獨(dú)山縣、云南省金平縣。

1.1.2 調(diào)查時(shí)間

2020年11月19 日，福建省仙游縣書峰鄉(xiāng)書峰村周邊；2020年11月23日，貴州省獨(dú)山縣上司鎮(zhèn)峰洞村周邊；2020年11月30日，云南省金平縣阿得博鄉(xiāng)高興寨周邊。

1.1.3 主要儀器設(shè)備與藥品

1260高效液相色譜儀，美國(guó)Agilent公司；BSA224S-CW電子分析天平，德國(guó)Sartorius公司；KQ-400DE數(shù)控超聲波清洗儀，江蘇昆山超聲儀器有限公司；H-2050R離心機(jī)，湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司。

對(duì)照品靛玉紅（批號(hào)為170117，南京森貝伽生物科技有限公司）；對(duì)照品靛藍(lán)（批號(hào)為110716-201612，中國(guó)食品藥品檢定研究院）；對(duì)照品吲哚苷（批號(hào)為NSZ2I-DG，上海梯希愛化成工業(yè)發(fā)展有限公司）；甲醇（德國(guó)MERCK公司）；其余試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 方法

1.2.1 調(diào)研方法

采用實(shí)地調(diào)查、種植戶和企業(yè)走訪以及文獻(xiàn)檢索等相結(jié)合的方法，通過文獻(xiàn)檢索和同行咨詢獲悉廣東、四川等省區(qū)的生產(chǎn)情況。

1.2.2 形態(tài)特征測(cè)量

各地隨機(jī)選擇林下和大田各3個(gè)地塊，每個(gè)地塊選擇代表性植株15株，用卷尺測(cè)量株高（地面到主莖頂端的高度，cm）；用直尺測(cè)量成熟葉片長(zhǎng)（葉基到葉尖的長(zhǎng)度，cm）和寬（葉片最寬處的距離，cm），每株測(cè)量10片代表性葉片。

1.2.3 生化成分測(cè)定

1.2.3.1樣品采集

各地分別選擇林下、大田2種環(huán)境下3個(gè)地塊各5片成熟的葉片，用清水沖洗后，用卷紙把表面的水分吸干，每2片放一起，用錫箔紙包裹，放在干冰里，帶回室內(nèi)保存于-80℃冰箱里。

1.2.3.2 靛藍(lán)量檢測(cè)

參考2020版《中華人民共和國(guó)藥典》青黛中靛藍(lán)和靛玉紅測(cè)定法［2］及高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定馬藍(lán)根、莖、葉中4種成分含量［14］的方法。將葉片放在液氮中磨碎，稱取0.5 g，置于25 mL容量瓶中；加入約20 mL DMF，超聲處理30 min，放冷至室溫，定容至刻度；用0.45微孔濾膜過濾，待測(cè)。

色譜條件：Ultimate XB-C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，3 μm）；流動(dòng)相：甲醇∶水（70∶30）；檢測(cè)波長(zhǎng)：289 nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10 μL；進(jìn)樣時(shí)間：25 min；流速：1 mL/min。每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3次。

1.2.3.3 吲哚苷含量檢測(cè)

參考肖春霞等［15］方法，采用RP-HPLC法測(cè)定不同產(chǎn)地及不同部位馬藍(lán)中6種活性成分含量。將葉片放在液氮中磨碎，稱取5 g于錐形瓶中，加入20倍超純水，沸水浴加熱提取1 h；靜置18 h，離心（3 000 r/min，15 min）；移取上清液于50 mL容量瓶中，定容，取適量離心（12 000 r/min，10 min），上清液即為供試品溶液；取適量供試液用0.45微孔濾膜過濾，待測(cè)。

色譜條件：Ultimate XB-C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，3 μm）；流動(dòng)相：甲醇∶水（15∶85）；檢測(cè)波長(zhǎng)：280 nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10 μL；進(jìn)樣時(shí)間：30 min；流速：1 mL/min。每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3次

2 結(jié)果與分析

2.1 主產(chǎn)區(qū)生產(chǎn)概況

當(dāng)前中國(guó)馬藍(lán)的種植區(qū)域主要在貴州省南部黔南地區(qū)、云南南部紅河地區(qū)、福建省仙游縣書峰鄉(xiāng)及四川、廣東，另外廣西、浙江等地也有少量生產(chǎn)，其中以黔南地區(qū)種植面積最大，產(chǎn)量最高，各產(chǎn)區(qū)概況見表1。

表1 中國(guó)馬藍(lán)主要產(chǎn)區(qū)生產(chǎn)概況

馬藍(lán)的主要用途為地上部分加工為青黛、地下部分作為南板藍(lán)根入藥，其葉片作為大青葉以民間用藥為主，藥廠收購(gòu)的較少。不同主產(chǎn)區(qū)的規(guī)模、用途等方面均有差異。貴州、云南、四川等地，地上部分加工為青黛，其地下部分作為南板藍(lán)根收購(gòu)和施用；而福建主要以收割地上部分加工成青黛為主，地下部應(yīng)用較少；廣東則主要收獲根部及基部莖稈作為南板藍(lán)根，較少收獲地上部加工成青黛。作為南板藍(lán)根用的地下根及根莖因產(chǎn)量低、價(jià)格高，為此，部分產(chǎn)區(qū)將整株挖出后曬干或陰干，去掉葉片和頂端的部分嫩枝，剔除泥土、石塊、雜草等雜質(zhì)，整株切段，作為南板藍(lán)根通貨應(yīng)用。仙游縣雖為福建青黛道地產(chǎn)區(qū)，但相對(duì)其他2個(gè)產(chǎn)區(qū)，人工費(fèi)較高，從事馬藍(lán)種植業(yè)的人數(shù)較少，面積及產(chǎn)量較貴州、云南少。

栽培方式也存在較大的差異。貴州省獨(dú)山縣主要采用平地及山坡邊緣地塊種植（圖1、2）；云南省金平縣因坡度較大、基本沒有平地，因此栽培地均為坡地及山坡上的雜木林下（圖3、4）；福建省仙游縣多為枇杷園林下套種（圖5、6）；而廣東則主要在荔枝園、香蕉園等果園套種。各地均有輪作的習(xí)慣，但輪作時(shí)間不一，仙游主要收獲地上部分，因此輪作時(shí)間4年左右；獨(dú)山一般種植3年后進(jìn)行輪作；金平因種植目標(biāo)不同，種植1年或2年后整株采收，采收后均會(huì)輪作或者休耕。

圖1 獨(dú)山縣上司鎮(zhèn)平地栽培

圖2 獨(dú)山縣上司鎮(zhèn)山坡邊緣地塊

圖3 金平縣因坡地栽培

圖4 金平縣林下坡地栽培與育苗

圖5 仙游縣枇杷園套種

各主產(chǎn)區(qū)產(chǎn)業(yè)鏈基本成熟，均有專門的加工和銷售企業(yè)，但基本以原料或者加工為青黛原料的方式，提供給華潤(rùn)三九醫(yī)藥股份有限公司、昆明中藥廠有限公司、雅安迅康藥業(yè)有限公司、福建省莆田市德龍藥業(yè)有限公司、貴州青山生物科技有限公司等專業(yè)的企業(yè)，由他們進(jìn)一步加工成中藥飲片或者中成藥。龍頭企業(yè)的帶動(dòng)對(duì)當(dāng)?shù)伛R藍(lán)種植面積和產(chǎn)量有重要的影響，收購(gòu)價(jià)格直接調(diào)控種植面積、生產(chǎn)投入等。近年在堅(jiān)持傳統(tǒng)用途的基礎(chǔ)上，逐步開發(fā)新產(chǎn)品，如洗發(fā)露、面膜、高檔繪畫原料、茶等，為產(chǎn)業(yè)發(fā)展注入新活力。

圖6 仙游縣枇杷園周邊地塊栽培

各主產(chǎn)區(qū)當(dāng)?shù)卣咭膊幌嗤?，如云南省金平縣對(duì)馬藍(lán)種苗進(jìn)行補(bǔ)貼，提高了當(dāng)?shù)剞r(nóng)戶的種植熱情，種植面積進(jìn)一步擴(kuò)大，在當(dāng)?shù)刂鸩匠蔀榕c草果齊名的特色作物與產(chǎn)業(yè)。所以除龍頭企業(yè)帶動(dòng)影響外，不同地區(qū)的政府引導(dǎo)是影響當(dāng)?shù)伛R藍(lán)種植規(guī)模的第二個(gè)主要因素。

2.2 形態(tài)特征

各主產(chǎn)區(qū)植株形態(tài)特征差異較大，主要表現(xiàn)在株型、葉片大小和形狀上（表2）。福建仙游所栽培的植株呈匍匐型生長(zhǎng)，葉片較小，植株較矮。而云南金平所栽培的植株株型直立、莖稈粗壯、葉片寬而大（圖7、8）。貴州馬藍(lán)植株形態(tài)接近云南的，但葉片沒有云南金平所栽培的大（圖9、10），福建的最?。▓D11、12）。但各產(chǎn)區(qū)植株花的大小變化不大（圖13），同一地區(qū)植株形態(tài)也有輕微差異，如福建野生的植株葉片大、莖稈粗壯，但葉片的數(shù)量和厚度小于人工栽培植株。同時(shí)植株的株高還與收獲方式有關(guān)，如一年收獲2次的植株株高低于一年收獲1次的植株，因此形態(tài)特征是否能夠穩(wěn)定遺傳，還需要進(jìn)一步跟蹤觀察。葉片形狀差異較大，有闊葉型、尖葉型2種（圖14）。

圖9 貴州山坡邊緣栽培

圖11 福建仙游林下栽培

圖13 花的類型

圖14 葉片類型

表2 馬藍(lán)主要產(chǎn)區(qū)生產(chǎn)植株特征

圖7 云南梯田栽培植株

2.3 生化成分測(cè)定

圖8 云南同一地塊不同表型

測(cè)定結(jié)果（表3）表明，云南金平所產(chǎn)的靛藍(lán)、吲哚苷含量最高，其次為仙游，貴州的較低，但是在新鮮葉片中，均沒有檢測(cè)出靛玉紅。

表3 馬藍(lán)主要產(chǎn)區(qū)生化成分測(cè)定

圖10 貴州大田栽培

圖12 福建仙游林緣栽培

3 討論與結(jié)論

3.1 馬藍(lán)的主要產(chǎn)區(qū)

通過實(shí)地調(diào)研與咨詢同行可知，當(dāng)前中國(guó)馬藍(lán)的種植區(qū)域中，貴州省南部黔南地區(qū)面積、產(chǎn)量均居全國(guó)首位。馬藍(lán)分布于中國(guó)的廣東、海南、臺(tái)灣、廣西、云南、貴州、四川、福建等省區(qū)，常生于潮濕處，因此中國(guó)的華南大部分區(qū)域均可栽培［1，9，16-17］。然而受種植習(xí)慣、應(yīng)用習(xí)俗、加工方法、市場(chǎng)價(jià)格等因素影響，當(dāng)前該品種種植面積小、產(chǎn)量低，尤其是其作為傳統(tǒng)的染料被化學(xué)染料替代后，受價(jià)格因素影響，許多傳統(tǒng)栽培區(qū)域逐漸放棄種植，從而使其栽培面積進(jìn)一步縮?。?8-20］。當(dāng)前得益于中國(guó)少數(shù)民族對(duì)傳統(tǒng)染料的青睞，因此種植面積主要分布在少數(shù)民族集中區(qū)。

3.2 馬藍(lán)的形態(tài)特征

此次調(diào)查表明，馬藍(lán)的形態(tài)特征差異主要表現(xiàn)在株型、葉片大小和葉片形狀上。植株高低受收割次數(shù)、栽培措施等影響較大，所以各地植株的高低及同一地區(qū)植株的高低差異均較大。光照強(qiáng)度對(duì)馬藍(lán)光合作用有顯著的影響［21］，因此葉片的大小受光照強(qiáng)弱的影響；據(jù)筆者田間調(diào)查，光線強(qiáng)的地方，葉片皺縮且發(fā)黃，而林下及有遮陽(yáng)的地方，葉片綠色，顏色正常。葉片有闊葉型和尖葉型2種形態(tài)類型。

3.3 馬藍(lán)的生化成分

《中華人民共和國(guó)藥典》收載，青黛、南板藍(lán)根的指標(biāo)成分均為靛藍(lán)、靛玉紅［2］。經(jīng)測(cè)定發(fā)現(xiàn)，12月份低溫季節(jié)新鮮的馬藍(lán)葉片中靛玉紅的含量很低，甚至無法檢測(cè)到；干燥后的葉片中則可測(cè)量到［3］，這可能是因?yàn)榈逵窦t與靛藍(lán)合成類似，是在后續(xù)干燥過程或者初加工過程中逐步合成，在新鮮的組織內(nèi)含量很低或者無［22-23］?，F(xiàn)在多數(shù)研究認(rèn)為，靛藍(lán)和靛玉紅的合成前體為吲哚，吲哚被氧化成吲哚酚，植物尿苷二磷酸葡萄糖酶可通過糖基化作用，將吲哚酚轉(zhuǎn)化為糖苷類物質(zhì)，避免其自發(fā)氧化。在老葉中或受到外界影響時(shí)，這些糖苷類物質(zhì)通過水解酶分解，形成吲哚酚，繼而氧化并發(fā)生縮合反應(yīng)生產(chǎn)靛藍(lán)及其他相關(guān)成分［24-25］。然而有學(xué)者認(rèn)為，靛藍(lán)、靛玉紅藥理作用與南板藍(lán)根臨床治療流感和消炎解毒的功效并無相關(guān)性，因此建議選擇角胡麻苷、阿克苷等其他成分［4］，這值得進(jìn)一步研究和探討。

馬藍(lán)的生化成分極其復(fù)雜，不僅受遺傳、收獲時(shí)間、栽培、氣候等因素影響，加工為青黛時(shí)還與加工工藝有關(guān)，這使馬藍(lán)及其主要加工品青黛的成分變化更加復(fù)雜化［26-28］；因此，馬藍(lán)及其青黛的生化成分有待進(jìn)一步研究與綜合評(píng)價(jià)。