王東 吳佳慧 任原玉

黑龍江省佳木斯市腫瘤醫(yī)院物理診斷科 154000

卵巢癌作為我國(guó)女性發(fā)病率前3位的惡性腫瘤之一，其病死率始終居高不下［1］。調(diào)查顯示，Ⅰ期卵巢癌的5年生存率可高達(dá)90%，但受臨床癥狀不典型影響，患者確診時(shí)通常已經(jīng)處于晚期［2］。但臨床上針對(duì)早期卵巢癌的篩查方式仍局限于腫瘤標(biāo)志物和/或經(jīng)陰道超聲篩查，篩查效果并不理想。卵巢癌病灶血管新生會(huì)導(dǎo)致血流阻力下降，增加血流量，致使癌細(xì)胞生長(zhǎng)，是癌組織增生的病理基礎(chǔ)［3］。研究認(rèn)為，腫瘤的惡性程度升高血流信號(hào)會(huì)有所增強(qiáng)，但仍無(wú)法將血流信號(hào)作為腫瘤良惡性的鑒別手段［4］。而卵巢癌患者的人附睪蛋白4（HE4）、糖類抗原125（CA125）水平與卵巢癌患者的惡性程度存在密切相關(guān)［5］。經(jīng)陰道彩色多普勒血流顯像（TV-CDFI）可用于血流狀態(tài)評(píng)估，通過(guò)對(duì)病灶血流參數(shù)加以定量測(cè)定確定病灶處的血流狀態(tài)［6］。本研究旨在深入探究卵巢癌血管新生、惡性程度與TV-CDFI所測(cè)定的相關(guān)血流參數(shù)間的相關(guān)性，以便于卵巢癌的早期篩查提供新的思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月至2020年2月就診佳木斯市腫瘤醫(yī)院的卵巢腫瘤預(yù)行手術(shù)治療患者120例，術(shù)前行陰道彩色超聲檢查，并依據(jù)患者術(shù)后病理診斷結(jié)果分為卵巢癌組（80例）、卵巢囊腫組（40例）。卵巢癌組患者年齡范圍為30～75歲，年齡50.25（46.50，70.00）歲；國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）分期：Ⅰ期21例，Ⅱ期20例，Ⅲ期20例，Ⅳ期19例［7］。卵巢囊腫組患者年齡范圍為30～75歲，年齡49.52（46.00，71.25）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）存在異常陰道分泌物、陰道出血、腹部脹痛等；（2）患者及家屬對(duì)本研究?jī)?nèi)容知情同意，已簽署知情同意書；（3）經(jīng)超聲檢查發(fā)現(xiàn)單側(cè)卵巢包塊、臨床資料完整；（4）擬進(jìn)行手術(shù)治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）伴發(fā)心、肝、腎臟功能異常者；（2）伴發(fā)精神障礙、妊娠及哺乳期婦女；（3）伴發(fā)免疫缺陷及凝血障礙患者。兩組卵巢腫瘤預(yù)行手術(shù)治療患者年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)佳木斯市腫瘤醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 TV-CDFI檢測(cè) 儀器選用美國(guó)GE Voluson E10型號(hào)彩色多普勒超聲診斷儀，應(yīng)用IC-5-9-D探頭，頻率設(shè)定在6.0～7.5 MHz。檢查前指導(dǎo)患者排空膀胱后取截石位，將探頭置入陰道內(nèi)，運(yùn)用二維超聲對(duì)腫瘤位置、大小、形態(tài)及回聲加以判斷，繼而啟動(dòng)CDFI模式，當(dāng)血流頻譜圖像穩(wěn)定后，對(duì)病灶部位的血流參數(shù)加以測(cè)定，每個(gè)參數(shù)取3個(gè)穩(wěn)定周期，取平均值。主要涵蓋：動(dòng)脈血管搏動(dòng)指數(shù)（PI）、阻力指數(shù)（RI）、舒張末期流速（EDV）、峰值流速（PSV）［8］。

1.2.2 血管新生相關(guān)基因表達(dá)量的檢測(cè) TV-CDFI檢測(cè)后采集患者卵巢手術(shù)切除病灶部位樣本，加入RIPA裂解液后，獲取病灶內(nèi)總蛋白，經(jīng)離心后應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定總蛋白懸液中的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165（VEG F165）、鞘氨醇激酶1（SphK1）的蛋白表達(dá)量。

1.2.3 卵巢包塊的惡性程度評(píng)估 經(jīng)病理診斷確定卵巢癌患者的卵巢癌FIGO分期、并采集患者入院次日晨起肘靜脈血4 ml，取自然凝固后上層血清作為觀察樣本，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)患者HE4、CA125水平。本研究相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查均由2名專業(yè)檢驗(yàn)人員共同完成。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS24.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，不符合正態(tài)分布的計(jì)量資料應(yīng)用M（P25，P75）表示，組間比較應(yīng)用秩和檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料應(yīng)用（±s）表示，組間比較應(yīng)用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較選用多個(gè)樣本均數(shù)兩兩比較，計(jì)數(shù)資料應(yīng)用率或構(gòu)成比表示，組間比較應(yīng)用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析，校正水準(zhǔn)α＝0.05，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 卵巢血管新生基因表達(dá)量及HE4、CA125水平比較 卵巢囊腫組患者VEGF165、SphK1、HE4、CA125水平均顯著低于卵巢癌組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.001），見表1。

表1 兩組卵巢腫瘤預(yù)行手術(shù)治療患者卵巢血管新生基因表達(dá)量及HE4、CA125水平比較（±s）

表1 兩組卵巢腫瘤預(yù)行手術(shù)治療患者卵巢血管新生基因表達(dá)量及HE4、CA125水平比較（±s）

注：VEGF165為血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165，SphK1為鞘氨醇激酶1，HE4為人附睪蛋白4，CA125為糖類抗原125

組別卵巢癌組卵巢囊腫組t值P值例數(shù)80 40 VEGF165（μg/L）3.78±1.52 1.03±0.22 11.360＜0.001 SphK1（ng/L）378.56±50.47 112.42±16.85 32.401＜0.001 HE4（μmol/L）379.46±56.79 18.72±6.96 39.942＜0.001 CA125（U/ml）521.46±88.97 37.29±6.72 34.297＜0.001

2.2 不同F(xiàn)IGO分期患者的彩色超聲血流參數(shù)差異不同F(xiàn)IGO分期（Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期）患者的PI、EDV、RI水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.001）；不同F(xiàn)IGO分期患者的PSV水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 不同F(xiàn)IGO分期卵巢癌患者的陰道彩色超聲血流參數(shù)比較（±s）

表2 不同F(xiàn)IGO分期卵巢癌患者的陰道彩色超聲血流參數(shù)比較（±s）

注：FIGO為國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟，PI為搏動(dòng)指數(shù)，EDV為舒張末期流速，RI為阻力指數(shù)，PSV為峰值流速；與Ⅱ期比較，a P＜0.05；與Ⅲ期比較，b P＜0.05；與Ⅳ期比較，c P＜0.05；與Ⅰ期比較，d P＜0.05

分期Ⅰ期Ⅱ期Ⅲ期Ⅳ期F值P值例數(shù)21 20 20 19 PI 1.12±0.22abc 0.82±0.19bcd 0.78±0.12acd 0.52±0.12abd 42.072＜0.001 EDV（cm/s）11.56±2.47abc 14.42±2.85bcd 17.56±3.47acd 19.42±2.85abd 28.181＜0.001 RI 0.56±0.27abc 0.42±0.15bcd 0.36±0.17acd 0.22±0.12abd 11.196＜0.001 PSV（cm/s）24.56±4.43c 25.42±4.67 26.56±5.37 28.42±5.45d 2.211 0.093

2.3 血管新生、惡化程度與彩色超聲血流參數(shù)的相關(guān)性 經(jīng)Pearson相關(guān)分析，PI與VEGF165、FIGO分期呈顯著負(fù)相關(guān)（r＝-0.724、-0.747，均P＜0.001）；EDV與VEGF165、FIGO分期呈顯著正相關(guān)（r＝0.764、0.772，均P＜0.001）；RI與VEGF165、FIGO分 期、CA125呈 顯 著 負(fù) 相 關(guān)（r＝-0.311、-0.330、-0.230，均P＜0.05）。見表3。

表3 80例卵巢癌患者的血管新生基因表達(dá)量、FIGO分期、HE4、CA125與彩色超聲血流參數(shù)相關(guān)性

3 討 論

臨床上卵巢腫瘤的良惡性鑒別，主要以腫瘤標(biāo)志物、影像學(xué)檢查、病理組織篩查作為主要手段。其中超聲檢查作為簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)且無(wú)創(chuàng)的篩查手段，應(yīng)用較廣。血管新生是卵巢病灶血流阻力降低、血流灌注增加的病理基礎(chǔ)［9］。雖然，可通過(guò)微血管密度檢測(cè)作為新生血管情況測(cè)定的金標(biāo)準(zhǔn)，但由于其屬于免疫組化測(cè)定方法［10］，不適用于早期卵巢癌的評(píng)估篩查。VEGF165作為VEGF家族中能夠與腫瘤細(xì)胞膜及內(nèi)皮細(xì)胞受體結(jié)合的蛋白之一，具有促內(nèi)皮細(xì)胞管型生成及促腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，是血管內(nèi)皮增生的主要介導(dǎo)因子［11］。而SphK1是催化鞘氨醇磷酸化過(guò)程的重要催化酶，SphK1是與細(xì)胞膜表面的1-磷酸鞘氨醇受體（S1PR）結(jié)合的S1P結(jié)合物，具有啟動(dòng)下游絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）、Rho等信號(hào)通路的特性，能夠促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖及遷移，并形成管型結(jié)果［12］。研究證實(shí)，VEGF165、SphK1在卵巢癌患者血管新生階段存在介導(dǎo)作用［13］。但VEGF165、SphK1需要取病灶組織樣本后才能確定患者病灶血管新生情況。因此，本研究將VEGF165、SphK1作為卵巢癌患者血管新生水平的量化指標(biāo)。

卵巢癌患者HE4、CA125水平上調(diào)，與患者臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況密切相關(guān)［14］。本研究發(fā)現(xiàn)，卵巢癌與卵巢囊腫患者的VEGF165、SphK1、HE4、CA125水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.001）。結(jié)合相關(guān)研究數(shù)據(jù)，不同F(xiàn)IGO分期患者的VEGF165、SphK1、HE4、CA125水平存在顯著差異［15］。而本研究證實(shí)，PI、EDV、RI水平在不同F(xiàn)IGO分期患者間存在差異。據(jù)此推測(cè)，在不同F(xiàn)IGO分期患者間，PI、EDV、RI、VEGF165、SphK1、HE4、CA125水平均存在差異。TV-CDFI作為能夠避免腹部脂肪及腸道氣體干擾，分辨率及清晰度高的影像學(xué)篩查手段，有助于疾病早期篩查［16］。本研究經(jīng)Pearson相關(guān)分析，PI與VEGF165、FIGO分期呈顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05）；EDV與VEGF165、FIGO分期呈顯著正相關(guān)（均P＜0.05）；RI與VEGF165、FIGO分期、CA125呈顯著負(fù)相關(guān)（均P＜0.05）。當(dāng)卵巢病灶形成血管新生時(shí)，反射性的血流阻力下降，血流灌注增加，從TV-CDFI超聲血流參數(shù)PI水平變化看，PI、RI下調(diào)，VEGF165水平及FIGO分期上升［17］。EDV上升，VEGF165水平及FIGO分期上升［18］。研究證實(shí)，卵巢腫瘤組織的血流參數(shù)具有低阻力、高流速特征［19］，而EDV作為高流速的主要指標(biāo)，與患者病理分期呈正相關(guān)。本研究同時(shí)發(fā)現(xiàn)，CA125水平與RI存在負(fù)相關(guān)，因此，對(duì)于RI指數(shù)異常降低者，應(yīng)及時(shí)篩查CA125水平，以便于對(duì)疾病分期增長(zhǎng)的早期防控。

綜上所述，卵巢癌病灶的血管新生基因VEGF165蛋白表達(dá)量可通過(guò)PI、EDV、RI水平加以反饋，RI與卵巢癌患者的CA125水平存在負(fù)相關(guān)，可在一定程度上用于CA125水平的監(jiān)測(cè)，且陰道彩色超聲血流參數(shù)PI、EDV、RI水平與患者FIGO分期間存在相關(guān)性。

利益沖突：作者已申明文章無(wú)相關(guān)利益沖突。