蔡輝，張春訪

啟東市中醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇啟東 226200

糖尿病是臨床常見病癥之一，屬于慢性代謝性疾病的一種，多由胰島素分泌功能異常而引起，具有發(fā)病率高、病程較長(zhǎng)等特點(diǎn)，發(fā)病機(jī)制尚不完全明確，普遍認(rèn)為年齡、環(huán)境及遺傳因素等均與該疾病發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[1]。對(duì)于糖尿病患者，由于機(jī)體長(zhǎng)時(shí)間處于高血糖環(huán)境中，細(xì)菌繁殖加快，可損傷多器官功能[2-4]。目前，臨床尚未有治愈糖尿病的方法，僅可通過終身服藥，以延緩患者疾病進(jìn)展，控制患者血糖水平，因此，早發(fā)現(xiàn)、早治療是改善糖尿病患者預(yù)后的關(guān)鍵。對(duì)于糖尿病診斷，臨床常采取尿檢方法，雖可準(zhǔn)確診斷疾病，但存在一定假陰性、假陽性情況，有一定局限性[5]。化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定是近年最新的免疫測(cè)定技術(shù)之一，因其具有特異度高、靈敏度高、安全性高及準(zhǔn)確率高等優(yōu)勢(shì)，被廣泛應(yīng)用于糖尿病生化免疫檢驗(yàn)中，可明確判斷緩和血糖情況，以此為臨床診治提供可靠依據(jù)[6]。該次選取2019 年1 月—2021 年3 月收治的166 例糖尿病患者及100 名健康體檢者，研究糖尿病生化免疫檢驗(yàn)中化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院收治的166 例糖尿病患者為觀察組，納入標(biāo)準(zhǔn)：①均經(jīng)臨床確診為糖尿??；②年齡均≥18 歲；③資料完整；④知情同意；⑤研究所選病例獲倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并惡性腫瘤者；②合并精神疾病者；③合并血液系統(tǒng)疾病者；④檢測(cè)前使用降糖類藥物及胰島素者；⑤中途退出者；⑥處于妊娠期者；⑦合并嚴(yán)重內(nèi)分泌失調(diào)者；⑧合并嚴(yán)重心、肝、腎功能不全者。同期選取100名健康體檢者作為對(duì)照組，男55 名，女45 名；年齡37～85 歲，平均（65.12±2.31）歲。觀察組男91 例，女75 例；年齡40～90 歲，平均（65.34±2.14）歲。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。具有可比性。

1.2 方法

檢測(cè)前1 d，指導(dǎo)受檢者于晚餐后禁食，于清晨時(shí)間段，抽取患者4 mL 空腹靜脈血，取血后給予受檢者無水葡萄糖75 g，記錄進(jìn)食時(shí)間，并于進(jìn)食1 h、2 h 抽取患者4 mL 靜脈血；對(duì)所采集靜脈血進(jìn)行離心處理，設(shè)備選用BIOBASE 型低速冷凍離心機(jī)，設(shè)置轉(zhuǎn)速為3 500 r/min，離心時(shí)間為10 min，分離血清后冷凍保存；應(yīng)用化學(xué)免疫分析技術(shù)測(cè)定胰島細(xì)胞抗體（islet cell anti body，ICA）、谷氨酸脫羧酶抗體（glutamate decarboxylase antibody，GADA）水平；設(shè)備選取AU5800 型奧林巴斯生化儀，由貝克曼公司提供，葡萄糖測(cè)定試劑盒由上?？迫A生物醫(yī)藥有限公司提供，測(cè)定受檢者空腹血糖、餐后2 h 血糖水平；設(shè)備選用cobase411 型全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，由羅氏公司提供，C 肽（C-peptide）、胰島素（insulin）檢測(cè)試劑盒，由羅氏診斷試劑公司提供，測(cè)定C 肽、胰島素水平；嚴(yán)格遵照說明書操作。

1.3 觀察指標(biāo)

①分析化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定的檢測(cè)結(jié)果，計(jì)算診斷準(zhǔn)確率；②對(duì)比兩組空腹血糖、餐后2 h 血糖水平；③比較兩組于空腹?fàn)顟B(tài)、餐后1 h、餐后2 h 的胰島素、C 肽水平。

清晨時(shí)空腹（空腹時(shí)間＞8 h）血糖水平≥7.0 mmol/L；任意時(shí)刻葡萄糖濃度均≥11.1 mmol/L；葡萄糖負(fù)荷2 h后，靜脈血漿葡萄糖濃度≥11.1 mmol/L，即為糖尿病。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用（）表示，進(jìn)行t 檢驗(yàn)；P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 檢測(cè)結(jié)果分析

經(jīng)化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定，166 例患者中檢出糖尿病156 例，檢測(cè)準(zhǔn)確率為93.98%（156/166）。

2.2 兩組血糖水平對(duì)比

空腹血糖、餐后2 h 血糖比較，觀察組均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

表1 兩組血糖水平比較[（）,mmol/L]

表1 兩組血糖水平比較[（）,mmol/L]

2.3 兩組C 肽及胰島素水平對(duì)比

空腹?fàn)顟B(tài)下、餐后2 hC 肽、胰島素水平比較，觀察組均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；餐后1 hC 肽、胰島素水平比較，觀察組均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2、表3。

表2 兩組C 肽水平比較[（）,ng/mL]

表2 兩組C 肽水平比較[（）,ng/mL]

表3 兩組胰島素水平比較[（）,U/mL]

表3 兩組胰島素水平比較[（）,U/mL]

3 討論

隨著生活水平不斷提高，人們飲食結(jié)構(gòu)等均發(fā)生改變，糖尿病發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，且發(fā)病人群趨向于年輕化。統(tǒng)計(jì)資料顯示，我國(guó)糖尿病患病率為8%～12%，而年齡≥20 歲成年人患病率高達(dá)15%～20%[7]。糖尿病屬于全身性疾病的一種，由機(jī)體內(nèi)胰島素分泌不足，導(dǎo)致糖代謝紊亂而引起。該病患者機(jī)體長(zhǎng)期處于高糖環(huán)境下，有利于細(xì)菌繁殖，進(jìn)而引發(fā)一系列并發(fā)癥，如糖尿病足等，嚴(yán)重者可致殘甚至死亡。臨床將糖尿病分為1 型、2型糖尿病兩種類型，多見2 型糖尿病。2 型糖尿病以疲乏無力、肥胖及口渴等為主要表現(xiàn)。中老年人是糖尿病高發(fā)人群，由于其免疫力低下，隨著疾病進(jìn)展可誘發(fā)一系列合并癥，還可引起低血糖等并發(fā)癥，進(jìn)而提高病死率。目前臨床治療糖尿病以藥物控制為主，需患者保持服藥依從性，但長(zhǎng)期服藥的不良反應(yīng)較多，如惡心、嘔吐等，進(jìn)而對(duì)患者生存質(zhì)量產(chǎn)生影響，部分患者甚至產(chǎn)生焦慮、急躁及抑郁等消極情緒，進(jìn)而加重病情，形成惡性循環(huán)[8]。因此，對(duì)于糖尿病患者，需及早診斷、治療，并注意臨床合理用藥，以有效控制患者病情。相較于其他疾病診斷，糖尿病診斷較為簡(jiǎn)單，尿檢是常用方法，可通過尿液中葡萄糖含量，反映患者是否發(fā)生疾病，但當(dāng)患者血液中葡萄糖含量較低，而腎器官將其全部吸收時(shí)，尿檢檢出效果欠佳。研究發(fā)現(xiàn)，通過測(cè)定不同時(shí)間段糖尿病患者的血糖、胰島素及C 肽水平等，可確定患者的疾病發(fā)展情況，以此為臨床制定治療方案提供指導(dǎo)。此外，對(duì)于糖尿病檢查還可對(duì)部分抗體進(jìn)行檢測(cè)，如GADA、ICA 等，其中GADA 是1 型糖尿病患者的一種抗體，可破壞胰島素細(xì)胞，從而導(dǎo)致糖尿?。灰灿醒芯堪l(fā)現(xiàn)，GADA 屬于重要抗原之一，與胰島β 細(xì)胞的破壞程度呈現(xiàn)高度相關(guān)性。同時(shí)，GADA 陽性表達(dá)提示人體內(nèi)胰島素分泌異常情況，通過檢測(cè)GADA 可對(duì)患者胰島功能進(jìn)行判斷。實(shí)際上，臨床對(duì)于1 型糖尿病診斷，GADA 是最為敏感的一項(xiàng)指標(biāo)。ICA 屬于混合型抗體的一種，該種抗體呈陽性表達(dá)，通常與糖尿病病程直接相關(guān)，相較于病程較短患者，病程較長(zhǎng)患者的ICA 水平更低?；瘜W(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)是近年來糖尿病常用的檢測(cè)方法，可通過測(cè)定患者血糖水平，包括空腹血糖、餐后2 h 血糖等，可判斷患者疾病是否發(fā)生及疾病嚴(yán)重程度，以指導(dǎo)臨床規(guī)范用藥。既往研究表明，與以往所采用的放射免疫分析法等檢測(cè)方式比較，化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定在糖尿病生化免疫檢驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值更高。

該研究結(jié)果顯示，經(jīng)化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定，166 例患者中檢出糖尿病156 例，檢測(cè)準(zhǔn)確率為93.98%（156/166）；空腹血糖、餐后2 h 血糖比較，觀察組均高于對(duì)照組（t=30.605、29.448，P<0.05）；空腹?fàn)顟B(tài)下、餐后2 hC肽、胰島素水平比較，觀察組均高于對(duì)照組（t=8.193、19.160、2.861、61.160，P<0.05）；餐后1 hC 肽、胰島素水平比較，觀察組均低于對(duì)照組（t=19.119、98.348，P<0.05）。袁珊等[9]選取300 例疑似糖尿病患者為研究對(duì)象，所有患者均行尿液葡萄糖檢測(cè)、生化免疫檢驗(yàn)，其中生化免疫檢驗(yàn)應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定，以糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)作為金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)比不同檢測(cè)方法對(duì)糖尿病診斷的準(zhǔn)確度、特異度及靈敏度，結(jié)果顯示，300 例患者中確診為糖尿病250 例，陰性50 例，應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定檢出230例陽性，其余70 例為陰性，準(zhǔn)確率為93.3%，與該研究結(jié)果相近。化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)在臨床中最早應(yīng)用于20 世紀(jì)70 年代，可對(duì)機(jī)體個(gè)別指標(biāo)進(jìn)行準(zhǔn)確檢測(cè)，但由于當(dāng)時(shí)技術(shù)水平有限，且所有儀器具有一定局限性，化學(xué)發(fā)光時(shí)間較短，使得檢測(cè)準(zhǔn)確度、靈敏度等均不高，并存在不同程度問題，僅被用作示蹤信號(hào)，而限制了其應(yīng)用范圍[10]。隨著醫(yī)療技術(shù)不斷發(fā)展，多種新型醫(yī)療儀器出現(xiàn)并應(yīng)用，化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)逐漸受到臨床重視，并被應(yīng)用于糖尿病生化免疫檢驗(yàn)。對(duì)于化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)來說，既往研究發(fā)現(xiàn)其可分為兩個(gè)主要部分，即免疫反應(yīng)、化學(xué)發(fā)光，其中化學(xué)發(fā)光指使用催化劑或氧化劑對(duì)化學(xué)發(fā)光物質(zhì)進(jìn)行催化或氧化，形成一個(gè)中間體，該種中間體呈激發(fā)態(tài)，一旦其回歸到穩(wěn)定基態(tài)時(shí)，就可釋放出大量的等能級(jí)光子，進(jìn)而出現(xiàn)發(fā)光情況[11-12]。臨床對(duì)于化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)的發(fā)光方法進(jìn)行區(qū)分，可分為3 種不同類型：①LIA 法：對(duì)發(fā)光物進(jìn)行免疫測(cè)定；②LEIA 法：對(duì)發(fā)光酶進(jìn)行免疫測(cè)定；③LEIA 法：對(duì)發(fā)光輔助因子進(jìn)行免疫測(cè)定?；瘜W(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)的檢測(cè)機(jī)理在于，借助部分物質(zhì)所具有輻射光這一特點(diǎn)，標(biāo)記特定抗原、細(xì)胞等組織內(nèi)物質(zhì)，特別是對(duì)腫瘤細(xì)胞標(biāo)記，該種方法可取得理想效果。應(yīng)用這一方法的分析過程為，首先將發(fā)光酶、發(fā)光物質(zhì)等標(biāo)記于抗體或抗原上，抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合后，再加入發(fā)光底物或氧化劑等，經(jīng)過氧化后或與發(fā)光底物發(fā)生一系列反應(yīng)后，可出現(xiàn)發(fā)光現(xiàn)象[13-15]。由于在一定條件下，化學(xué)檢測(cè)體系的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度與待測(cè)物濃度存在著直接關(guān)系，利用相應(yīng)儀器檢測(cè)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度，可準(zhǔn)確測(cè)定待測(cè)物含量[16]。將化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)應(yīng)用于糖尿病生化免疫檢驗(yàn)中，其優(yōu)勢(shì)主要體現(xiàn)于以下方面：①操作簡(jiǎn)單，用時(shí)較短，僅需10～20 min就可得出準(zhǔn)確結(jié)果，以提高檢驗(yàn)效率，可保障患者及時(shí)得到治療；②價(jià)格低廉，對(duì)于經(jīng)濟(jì)壓力較大患者來說，若需花費(fèi)高昂的檢測(cè)費(fèi)用，可進(jìn)一步加重患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，而應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定，可幫助患者節(jié)省經(jīng)濟(jì)花銷；③與尿檢比較，化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定可取得較高診斷準(zhǔn)確度，對(duì)于糖尿病患者早期診斷與治療作出充分保證[17-20]。

綜上所述，糖尿病生化免疫檢驗(yàn)中化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定的應(yīng)用效果顯著，可有效提高糖尿病檢出率，通過測(cè)定抗體、血糖及胰島素等水平，為臨床制定治療方案提供可靠指導(dǎo)。