顏紅芳，周呂蒙，梁華，羅俊，楊興萍

早期胃癌臨床癥狀不典型，大部分病人確診時(shí)已屬中晚期，80%的胃癌病人存在局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致病人錯(cuò)失最佳手術(shù)時(shí)機(jī)。盡早診斷及治療對(duì)改善胃癌病人預(yù)后，提高病人生存率有重要的意義。近年研究發(fā)現(xiàn)，胃癌血清特異性腫瘤標(biāo)志物在早期病變?cè)\斷中具有重要的價(jià)值。血清三葉因子3（TFF3）是由胃腸道黏液細(xì)胞分泌的小分子多肽，其可參與胃腸道黏膜上皮修復(fù)、重建，在胃癌發(fā)生及進(jìn)展中起到重要的作用。胃泌素-17（G-17）是目前診斷胃癌癌前病變及病情進(jìn)展的常用的標(biāo)志物。膜聯(lián)蛋白A7（ANXA7）屬于膜連蛋白家族成員，在細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)節(jié)、分化、凋亡、鈣離子信號(hào)傳導(dǎo)等方面起到重要的作用。因此，本研究將探討血清TFF3、G-17、ANXA7對(duì)胃癌及癌前病變的臨床診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2018年1月至2019年12月選取攀枝花市攀鋼集團(tuán)總醫(yī)院收治的經(jīng)病理組織學(xué)確診為胃部病變病人168例，根據(jù)病理組織學(xué)將病人分為：淺表胃炎組38例，萎縮性胃炎組32例，低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變（LGIN）組35例，高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變（HGIN）組33例，胃癌組30例。根據(jù)WHO國(guó)際診斷標(biāo)準(zhǔn)：將LGIN定義為僅局限于細(xì)胞學(xué)及上皮結(jié)構(gòu)異常，將HGIN定義為上皮結(jié)構(gòu)及細(xì)胞學(xué)異常擴(kuò)展至全層，即為重度異型增生或原位癌。同時(shí)排除既往接受胃部手術(shù)、心肝腎等臟器功能異常及近3個(gè)月內(nèi)服用過胃黏膜保護(hù)劑、質(zhì)子泵抑制劑、H受體拮抗劑的病人。淺表胃炎組：男24例，女14例；年齡范圍18～75歲，年齡（48.8±3.7）歲。萎縮性胃炎組：男18例，女14例；年齡范圍25～75歲，年齡（47.9±3.7）歲。LGIN組：男18例，女17例；年齡范圍28～75歲，年齡（48.6±3.8）歲。HGIN組：男17例，女16例；年齡范圍28～75歲，年齡（48.1±3.5）歲。胃癌組：男16例，女14例；年齡范圍28～74歲，年齡（47.9±3.2）歲。另選取60例健康體檢者為對(duì)照組，其中男38例，女22例；年齡范圍30～75歲，年齡（48.3±3.5）歲，組間基線資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

P

＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

血清TFF3、G-17、ANXA7檢測(cè)：所有研究對(duì)象于清晨空腹采集靜脈血3 mL，在室溫下離心處理，留取上清液，置于-20℃保存。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（ELISA）測(cè)定各組血清TFF3、G-17、ANXA7，TFF3試劑盒由上海語(yǔ)純生物科技有限公司提供，G-17試劑盒由上海江萊生物科技有限公司提供，ANXA7試劑盒由上海北諾生物科技有限公司提供，相關(guān)操作均按照試劑盒標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

評(píng)估評(píng)價(jià)：采用胃鏡及病理檢查確診，同時(shí)參照國(guó)際抗癌聯(lián)盟（2002年）相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)胃癌分化程度、TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2 結(jié)果

2.1 各組血清TFF3、G-17、ANXA7比較

LGIN組、HGIN組及胃癌組血清TFF3、G-17、ANXA7水平明顯高于淺表胃炎組、萎縮性胃炎組及對(duì)照組（

P

＜0.05），且HGIN組血清TFF3、G-17、ANXA7水平高于LGIN組（

P

＜0.05），胃癌組血清TFF3、G-17、ANXA7水平高于LGIN組、HGIN組（

P

＜0.05），見表1。

表1 胃部病變病人168例血清TFF3、G-17、ANXA7比較/±s

2.2 血清TFF3、G-17、ANXA7與胃癌臨床病理特征的關(guān)系

不同TNM分期、分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌組病人血清TFF3、G-17、ANXA7水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

P

＜0.05），見表2。

表2 血清TFF3、G-17、ANXA7與胃癌臨床病理特征的關(guān)系/±s

2.3 血清TFF3、G-17、ANXA7診斷胃癌及癌前病變的臨床價(jià)值

進(jìn)一步探討血清TFF3、G-17、ANXA7對(duì)胃癌及癌前病變［胃癌及高低級(jí)別的上皮內(nèi)瘤變（LGIN/HGIN）］的診斷價(jià)值。

2.3.1 各指標(biāo)的單獨(dú)應(yīng)用以良性病變（淺表性胃炎+萎縮性胃炎）為陰性樣本，以胃癌及癌前病變（胃癌+高低級(jí)別的上皮內(nèi)瘤變LGIN/HGIN）為陽(yáng)性樣本，建立ROC診斷分析模型。三指標(biāo)均為連續(xù)數(shù)值性資料，參考臨床實(shí)踐劃分成7～10個(gè)組段。經(jīng)ROC分析知：該兩指標(biāo)具有較高的診斷價(jià)值，AUC（95%CI）分別為0.844（0.731～0.974）、0.717（0.558～0.921）、0.748（0.578～0.968）。見表3，圖1。

2.3.2 各指標(biāo)的聯(lián)合應(yīng)用采用SPSS軟件的聯(lián)合應(yīng)用ROC理論模式（LogP模式：對(duì)各單獨(dú)應(yīng)用指標(biāo)進(jìn)行l(wèi)ogistic綜合回歸，再依據(jù)所得回歸系數(shù)B，歸一化加權(quán)計(jì)算并對(duì)應(yīng)處理各樣本資料，并據(jù)其進(jìn)行聯(lián)合應(yīng)用的ROC分析）。結(jié)果：聯(lián)合應(yīng)用對(duì)胃癌及癌前病變的診斷價(jià)值：AUC（95%

CI

）為0.880（0.823～0.941），靈敏度和特異度分別為0.903、0.872。顯然其診斷效能均比單一指標(biāo)均有明顯提高。亦見表3和圖1。

表3 血清TFF3、G-17、ANXA7診斷胃癌及癌前病變的ROC分析結(jié)果

圖1 血清TFF3、G-17、ANXA7對(duì)胃癌及癌前病變的臨床價(jià)值

3 討論

血清腫瘤標(biāo)志物是近年用于診斷腫瘤常用的手段，具有操作簡(jiǎn)單、敏感性高等特點(diǎn)。近年研究指出，多種糖類抗原（CA125、CA199、CA153）、癌胚抗原（CEA）是診斷胃癌及癌前病變的常用的標(biāo)志物，但上述標(biāo)志物靈敏性、特異性較低，并不能有效對(duì)早期胃癌及癌前病變病人作出全面的診斷，因此尋找新型的、高靈敏性的腫瘤標(biāo)志物對(duì)提高胃癌早期診斷有重要的作用。

血清TFF3是由杯狀細(xì)胞分泌的新型肽，位于腸黏膜表面，具有抗酸、抗蛋白酶、抗熱性的生物學(xué)特性，是胃腸黏膜重要保護(hù)因子，當(dāng)胃腸道黏膜發(fā)生炎癥或潰瘍時(shí)，其表達(dá)水平顯著升高。Lee等研究指出，TFF3的表達(dá)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及侵襲有密切的關(guān)系。Jin等發(fā)現(xiàn)，TFF3能有效抑制細(xì)胞粘附、促進(jìn)癌細(xì)胞浸潤(rùn)及侵襲，阻斷細(xì)胞凋亡，從而促進(jìn)癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移及擴(kuò)散。Huang等發(fā)現(xiàn)，胃癌組織中TFF3中陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于正常組織，并認(rèn)為TFF3在促進(jìn)細(xì)胞增殖、影響細(xì)胞凋亡方面起到重要的作用。血清G-17是由胃竇及十二指腸分泌物的胃腸激素，可引起胃黏膜組織損傷，導(dǎo)致胃潰瘍。相關(guān)研究指出，血清G-17可參與胃潰瘍形成，并刺激胃壁細(xì)胞分泌鹽酸，形成胃酸環(huán)境，引起胃酸與胃蛋白酶失衡。當(dāng)胃黏膜發(fā)生炎癥會(huì)導(dǎo)致炎性因子大量釋放導(dǎo)致胃壁黏膜損傷，從而刺激G-17分泌，引起胃酸分泌增多。高胃酸環(huán)境下會(huì)加重胃黏膜損傷，最終形成胃潰瘍。血清ANXA7屬于鈣依賴性磷脂結(jié)合蛋白，它可參與廣泛的細(xì)胞信號(hào)傳遞通路，尤其是機(jī)體炎癥、細(xì)胞分化及細(xì)胞增殖等相關(guān)通路。另外，ANXA7可參與鱗狀上皮細(xì)胞分化及腺上皮細(xì)胞分化。研究指出，敲除小鼠ANXA7基因后，小鼠產(chǎn)生自發(fā)性腫瘤，提示ANXA7基因表達(dá)異常參與腫瘤發(fā)生發(fā)展過程。最近研究發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)膠質(zhì)瘤中ANXA7基因突變會(huì)影響病人機(jī)體細(xì)胞信號(hào)通路的調(diào)節(jié)，從而刺激表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）表達(dá)增強(qiáng)并促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)，降低神經(jīng)膠質(zhì)瘤生存率。

本研究結(jié)果顯示，LGIN組、HGIN組及胃癌組血清TFF3、G-17、ANXA7水平明顯高于淺表胃炎組、萎縮性胃炎組及對(duì)照組，且HGIN組血清TFF3、G-17、ANXA7水平高于LGIN組，胃癌組血清TFF3、G-17、ANXA7水平高于LGIN組、HGIN組，表明血清TFF3、G-17、ANXA7表達(dá)與胃組織病變及胃癌病情進(jìn)展有密切的關(guān)系。本研究中不同TNM分期、分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌組病人血清TFF3、G-17、ANXA7水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明血清TFF3、G-17、ANXA7在胃癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移過程中起到重要的作用，可作為胃癌預(yù)后不良的標(biāo)志物，同時(shí)也可作為早期胃癌及癌前病變發(fā)現(xiàn)的標(biāo)志物。經(jīng)ROC曲線發(fā)現(xiàn)，血清TFF3、G-17、ANXA7聯(lián)合診斷胃癌及癌前病變的靈敏性及特異性高于單一指標(biāo)診斷。

綜上所述，血清TFF3、G-17、ANXA7水平升高與胃組織癌前病變及胃癌病情進(jìn)展有密切的關(guān)系，可作為胃癌病人預(yù)后的評(píng)價(jià)指標(biāo)，聯(lián)合應(yīng)用可提高其診斷效能。