劉 敏，劉禮杰，靳 東，謝彩華，閆若潛

（河南省動物疫病預(yù)防控制中心，河南省重大動物疫病監(jiān)測預(yù)警及防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河南鄭州 471000）

小反芻獸疫（peste des petits ruminants，PPR）是由小反芻獸疫病毒（peste des petits ruminants virus，PPRV）引起的急性、高度接觸性傳染病，俗稱“羊瘟”。山羊、綿羊、羚羊等小反芻動物對其均易感，其中山羊最為易感。PPR 被世界動物衛(wèi)生組織（OIE）列為須通報動物疫病，我國將其列為一類動物傳染病[1-2]。該病于1942 年首次在非洲科特迪瓦被發(fā)現(xiàn)，隨后擴(kuò)散至非洲中西部及亞洲部分地區(qū)。2007 年7 月，我國首起PPR 疫情發(fā)現(xiàn)于西藏地區(qū)，但很快被有效控制。2013 年11 月底，PPR 再次傳入我國，并迅速傳播至多個省份[3]。河南省于2014 年初首次發(fā)現(xiàn)PPR 病例。按照我國有關(guān)防控要求，目前對全省羊只進(jìn)行PPR強(qiáng)制免疫，并定期進(jìn)行免疫水平檢測及疫情風(fēng)險評估。2016—2020 年，河南省PPR 平均免疫抗體合格率分別為77.84%、82.01%、84.97%、82.63%、84.80%，均高于我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的免疫合格水平要求（不低于70%）。

為切實(shí)做好PPR 防控工作，科學(xué)評估免疫抗體水平及疫情發(fā)生風(fēng)險，更好地保障家畜生產(chǎn)和現(xiàn)代畜牧業(yè)健康穩(wěn)定發(fā)展，2020 年河南省動物疫病預(yù)防控制中心按照河南省動物疫病專項(xiàng)監(jiān)測方案要求組織開展了PPR 專項(xiàng)監(jiān)測工作。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

2020 年9 月21—30 日，河南省動物疫病預(yù)防控制中心對18 個省轄市的60 個羊養(yǎng)殖場進(jìn)行了樣品采集。采樣羊場包括本省所有種羊場和規(guī)模較大的商品羊場（存欄量≥3 000 只），樣品采集遵循隨機(jī)采樣原則，同一養(yǎng)殖場點(diǎn)兼顧不同生長階段和不同棟舍的羊只。采樣同時記錄疫苗種類、疫苗毒株及生產(chǎn)企業(yè)、累計免疫次數(shù)、末次免疫間隔時間等信息。每個場群內(nèi)，按照PPR 抗體合格率80%的預(yù)期合格率，95%置信水平，10%的可接受絕對誤差進(jìn)行抽樣，此次專項(xiàng)監(jiān)測共采集樣品3 535份，包括用于免疫抗體檢測的血清樣品1 817 份和用于病原學(xué)檢測的鼻拭子樣品1 718 份。

本次專項(xiàng)監(jiān)測涉及3 個疫苗生產(chǎn)企業(yè)（A、B、C），涉及2 種疫苗類型，分別是“PPR 活疫苗”和“PPR、山羊痘二聯(lián)活疫苗”；涉及2 種疫苗毒株，分別是CLone9 株、CLone9+AV41 株。

1.2 檢測方法與試劑

競爭ELISA 抗體檢測試劑盒（批號020172003）、病毒熒光RT-PCR 檢測試劑盒（批號40172005），購自青島立見診斷技術(shù)發(fā)展中心。按照國標(biāo)（GB/T 27982—2011）規(guī)定的方法檢測及開展結(jié)果判定。

2 結(jié)果與分析

2.1 總體情況

共檢測60 個羊養(yǎng)殖場，其中合格場群40 個（群內(nèi)個體合格率≥70%判定為合格場群），群體合格率為66.67%；共檢測血清樣品1 817 份，其中合格樣品1 341 份，個體合格率為73.80%；共檢測鼻拭子樣品1 718份，未檢出PPRV核酸陽性樣品。

2.2 不同場點(diǎn)抗體檢測情況

本次監(jiān)測涉及19 個種羊場、41 個商品場，其免疫群體合格率分別為63.16%、68.29%，免疫個體合格率分別為70.68%、75.31%，商品場與種羊場免疫個體合格率差異顯著（P＜0.05）。具體結(jié)果見表1。

表1 不同場點(diǎn)免疫效果監(jiān)測

2.3 不同疫苗生產(chǎn)企業(yè)抗體檢測情況

本次監(jiān)測共涉及3 個疫苗生產(chǎn)企業(yè)、2 種疫苗類型、2 種疫苗毒株。從表2 可以看出，對于A、B、C 企業(yè)生產(chǎn)的PPR 活疫苗（Clone9 株），免疫個體合格率均超過農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)（不低于70%），表明上述疫苗生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的PPR 活疫苗免疫原性較好，均可產(chǎn)生良好的臨床免疫效果。不同生產(chǎn)企業(yè)疫苗的免疫抗體合格率存在差異，其中B 企業(yè)疫苗免疫抗體個體合格率最高（96.67%），A 企業(yè)次之（78.80%），C 企業(yè)最低（72.86%），這同2019 年專項(xiàng)監(jiān)測結(jié)果一致。但是，此次監(jiān)測的B 企業(yè)疫苗免疫場僅有1 個，數(shù)量較少，不能全面反映B 疫苗免疫效果。此外，對于C 企業(yè)生產(chǎn)的“PPR、山羊痘二聯(lián)活疫苗”免疫抗體個體合格率為60.96%，低于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，該二聯(lián)活疫苗與PPR 活疫苗的免疫抗體個體合格率差異顯著（P＜0.05）。

表2 不同生產(chǎn)企業(yè)疫苗免疫效果

2.4 不同行政區(qū)域抗體檢測情況

在河南省18 個省轄市中，免疫抗體個體合格率最高的為濟(jì)源市（95.00%），最低的為開封市（20.69%）；免疫抗體群體合格率最高的為漯河、新鄉(xiāng)、濮陽、商丘、洛陽和濟(jì)源市（均為100%），最低的為開封（0）。具體情況見表3。

表3 不同行政區(qū)域免疫效果監(jiān)測

2.5 不同免疫次數(shù)及末次免疫間隔抗體結(jié)果分析

表4 顯示：免疫2 次及以上的羊場免疫個體合格率高，與只免疫1 次的羊場差異顯著（P＜0.05）；對于只免疫1 次的羊場，免疫后29～59 d的免疫抗體個體合格率最高（71.81%），其次是60 d 及以上的（67.15%），28 d 以內(nèi)的最低（66.67%）；免疫2 次及以上的羊場，免疫抗體個體合格率均較高，在80%以上。這表明在生產(chǎn)應(yīng)用中，多次免疫的效果優(yōu)于單次免疫，單次免疫后29～59 d 效果最佳。

表4 不同免疫次數(shù)免疫效果監(jiān)測統(tǒng)計表

3 討論

調(diào)查結(jié)果顯示，商品場與種羊場PPR 的免疫抗體個體合格率差異顯著（P＜0.05），且商品場高于種羊場，這與2019 年監(jiān)測結(jié)果不一致。原因是多方面的：一方面可能跟場點(diǎn)選擇有關(guān)，種羊場的數(shù)量相對較少，商品場較多，場點(diǎn)數(shù)量的差異導(dǎo)致抽樣場點(diǎn)的代表性不足，進(jìn)而影響結(jié)果判斷與分析；另一方面可能與商品場越來越重視疫苗免疫，免疫程序制定越來越科學(xué)，免疫效果監(jiān)測評估定期開展有很大關(guān)系。此外，還可能與現(xiàn)行調(diào)運(yùn)政策有關(guān)?；鶎釉诔鼍邉游锂a(chǎn)地檢疫證明時，要求實(shí)驗(yàn)室檢測抗體合格，調(diào)運(yùn)相對頻繁的商品場為確保實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果符合要求，會及時補(bǔ)免補(bǔ)防，從而提高了免疫抗體合格率。同時，本次監(jiān)測覆蓋的場點(diǎn)類別不夠全面，缺少交易、運(yùn)輸與屠宰環(huán)節(jié)以及廣大散養(yǎng)戶的樣品與數(shù)據(jù)，為更好地做好PPR 專項(xiàng)監(jiān)測工作，爭取在以后工作中補(bǔ)充完善。

本次監(jiān)測涉及的個別地市養(yǎng)殖場點(diǎn)仍存在抗體免疫低下甚至不合格現(xiàn)象。這一方面與各地重大動物疫病免疫政策的制定與落實(shí)力度不足有關(guān)，另一方面與養(yǎng)殖場戶對PPR 免疫工作的重視程度、疫苗保管及接種的操作規(guī)范程度等有關(guān)。據(jù)此，部分市縣出現(xiàn)PPR 疫情的風(fēng)險依然存在，尤其是在新引入的未免疫或免疫抗體低下的羊群中存在較大發(fā)生風(fēng)險。作為一種最有可能通過免疫接種達(dá)到免疫無疫和消滅凈化的疫病，進(jìn)入2021 年，持續(xù)發(fā)生的PPR 疫情，提示仍需繼續(xù)做好PPR 的強(qiáng)制免疫和監(jiān)測工作。此外，需及時全面掌握疫情信息，科學(xué)評估免疫效果和防范疫情發(fā)生風(fēng)險[4]。

免疫2 次及以上的場點(diǎn)免疫抗體個體合格率明顯高于免疫1 次的場點(diǎn)，差異顯著（P＜0.05）。這與魯立柱等[5]的結(jié)論一致，即PPR 活疫苗二次免疫可顯著提高其免疫抗體個體合格率。檢測結(jié)果匯總顯示，免疫3 次及以上的場點(diǎn)免疫抗體個體合格率低于免疫2 次的場點(diǎn)，這可能跟上述提到場點(diǎn)選擇有關(guān)。應(yīng)當(dāng)引起重視的是，即使免疫抗體個體合格率達(dá)到了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的70%以上的標(biāo)準(zhǔn)，羊只個體對疫苗敏感性差異、防疫人員免疫操作水平的高低、疫苗保存條件的改變等因素同樣會造成部分羊只免疫保護(hù)力下降。為盡可能降低疫病暴發(fā)導(dǎo)致的養(yǎng)殖場戶損失，建議各養(yǎng)殖場戶制定更加科學(xué)的免疫程序，春秋兩季集中免疫，及時對新生羔羊、新入欄羊只和免疫抗體水平較低/不合格的羊只補(bǔ)免補(bǔ)防，并定期進(jìn)行PPR 免疫抗體水平監(jiān)測，確保免疫密度和抗體合格率達(dá)到相關(guān)要求。

PPR、山羊痘二聯(lián)活疫苗免疫抗體個體合格率顯著低于PPR 活疫苗（P＜0.05），且低于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的70%以上的標(biāo)準(zhǔn)。這可能與養(yǎng)殖戶對該疫苗了解較少，使用頻次較低有關(guān)，筆者會繼續(xù)跟蹤研究該疫苗的免疫效果。就目前而言，為提高PPR 疫苗免疫抗體水平，防范疫情發(fā)生，建議僅山羊痘高風(fēng)險區(qū)免疫“PPR、山羊痘二聯(lián)活疫苗”，其他風(fēng)險區(qū)免疫PPR 活疫苗，有效降低PPR 發(fā)生風(fēng)險。

4 結(jié)論

從專項(xiàng)監(jiān)測結(jié)果來看，河南省羊PPR 平均免疫抗體合格率在70%以上，且未檢出病原學(xué)陽性樣品，表明全省羊PPR 防疫工作整體效果較好，總體處于臨床免疫無疫狀態(tài)，近期省內(nèi)發(fā)生PPR的風(fēng)險較低。但河南省個別地區(qū)PPR 個體及群體合格率仍然處于較低水平，因此仍需加強(qiáng)監(jiān)測。