孟慶國 趙英同

（1遼寧省微生物科學(xué)研究院，遼寧朝陽122000；2美利堅(jiān)海睿德學(xué)校，佛羅里達(dá)州33325）

四孢蘑菇Agaricuscampestris，俗稱雷窩子，是樹林中生長的野生食用菌，口蘑屬中的一個(gè)種，春、秋季生長在草地、林間空地處。四孢蘑菇子實(shí)體中等至稍大，菌蓋寬3～13 cm，初扁半球形，后平展，白色至乳白色，后期具叢毛狀鱗片；菌肉白色，肉厚；菌褶初粉紅色，后變褐色至黑褐色，較密，離生，不等長；菌柄較短、粗、圓柱形，有時(shí)稍彎曲，長1～9 cm，粗0.5～2 cm，近光滑或略有纖毛，白色，中實(shí)。四孢蘑菇味道鮮美，營養(yǎng)豐富，肉質(zhì)滑嫩，深受消費(fèi)者喜愛。為了充分利用楊樹葉，筆者對采集的四孢蘑菇進(jìn)行菌種分離和栽培試驗(yàn)?，F(xiàn)總結(jié)介紹如下。

1 菌種分離[1]

在采集的四孢蘑菇中，選擇長勢好、菇形完整、中等至偏大，肉厚，孢子未彈射，無病蟲害的子實(shí)體（圖1），在無菌環(huán)境中進(jìn)行組織分離。組織分離培養(yǎng)基為PDA。菇面用75%酒精棉球擦拭消毒，用手術(shù)刀切開種菇（圖2），在菌柄內(nèi)側(cè)用接種鉤取1 cm3菌肉接于試管斜面培養(yǎng)基上（圖3）。將試管放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)2 d組織塊可萌發(fā)出白色菌絲，繼續(xù)培養(yǎng)2 d，挑取生長健壯菌絲尖端轉(zhuǎn)接空白試管，菌絲長滿斜面后備用。

圖1 種菇

圖2 切開的種菇

圖3 菌肉接于試管斜面

2 菌種擴(kuò)繁[2]

2.1 擴(kuò)繁母種

母種配方為：馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，蛋白胨3 g，瓊脂18～20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，pH6.5～7.0，水1 000 mL。常規(guī)方法制備培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)接母種，于保溫箱中25℃避光培養(yǎng)8～10 d備用。

2.2 培養(yǎng)原種

原種配方為：玉米芯78%，麩皮20%，糖1%，石膏1%，pH6.5～7.0，料含水量60%～65%。

原種容器為常用750 mL菌種瓶。菌種瓶洗凈控干后，裝培養(yǎng)料至瓶肩，擦干凈瓶外壁及瓶口內(nèi)壁，蓋上帶有透氣孔的蓋，高壓滅菌（126℃）1 h，冷卻后在無菌條件下，按常規(guī)方法接入母種。接種后于清潔培養(yǎng)室25℃，空氣相對濕度40%～50%培養(yǎng)，每天通風(fēng)換氣2～3次，每次30 min。一般培養(yǎng)30～40 d菌絲長滿瓶（圖4）。

圖4 培養(yǎng)好的原種

3 栽培管理技術(shù)[3]

3.1 制備培養(yǎng)料

培養(yǎng)料配方為：楊樹葉83%，麩皮15%，糖1%，石膏1%，pH6.5～7，料含水量60%～65%。

楊樹葉、麩皮混勻，石膏、糖加入水中，再將其混合充分拌勻，料含水量為65%，pH9～10。料堆寬1.5～2.0 m、高0.8～1.0 m、長不限。當(dāng)料溫升至65℃維持12 h后翻堆，如此翻堆2次，一般5～7 d發(fā)酵結(jié)束（圖5）。

圖5 堆料

3.2 裝袋、滅菌

選17 cm×33 cm×0.005 cm聚丙烯塑料袋，將發(fā)酵好的楊樹葉裝袋，袋口套雙套環(huán)。高壓滅菌（126℃）1 h。試驗(yàn)每袋裝料折干為0.3 kg，共裝100袋。

3.3 接種、培養(yǎng)菌絲

在無菌條件下，按常規(guī)方法接入原種，每瓶原種接20袋。接種后放入培養(yǎng)室，于25℃條件下暗光培養(yǎng)。楊樹葉培養(yǎng)基透氣性好，菌絲長速快，培養(yǎng)25～30 d菌絲即可長滿袋（圖6）。當(dāng)楊樹葉基質(zhì)內(nèi)布滿菌絲（圖7），就可以結(jié)束菌絲培養(yǎng)。

圖6 培養(yǎng)好的菌袋

圖7 基質(zhì)內(nèi)布滿菌絲

3.4 脫袋、覆土出菇

將脫袋后菌棒放入筐內(nèi)壓實(shí)（圖8）（為了增加透氣性，筐底部放兩層報(bào)紙或遮陽網(wǎng)），將調(diào)好水的土均勻地撒在料面上，厚度3 cm（腐殖質(zhì)土，加入2%石灰，噴水調(diào)土含水量為20%，即手握成團(tuán)、落地即散）。為了保持料面濕潤，土層表面覆蓋一層楊樹葉（圖9）保濕。

圖8 裝入筐內(nèi)

圖9 覆蓋楊樹葉

3.5 覆土后管理

覆土后保持室溫20～22℃，空氣相對濕度在60%～70%，保持室內(nèi)空氣新鮮，在此條件下，菌絲5～7 d可爬上土面（圖10）。

圖10 覆土面菌絲

3.6 催蕾、幼蕾期管理

菌絲爬土后即可催蕾，此時(shí)拉大早晚溫差7～8℃，保持溫度15～25℃，空氣相對濕度80%～90%，一般菌絲爬土后5～7 d可見菌絲扭結(jié)變粗（圖11），約7～10 d菌絲扭結(jié)現(xiàn)蕾（圖12）。

圖11 菌絲變粗

圖12 幼蕾

幼蕾形成后，調(diào)控溫度在18～22℃，空氣相對濕度85%～90%，保持空氣新鮮，有散射光。幼蕾期千萬不可強(qiáng)通風(fēng)，溫差不可過大，以免導(dǎo)致幼蕾萎縮死亡。

3.7 幼菇期（現(xiàn)蕾后）管理

較之幼蕾期，該階段控制溫度15～22℃，空氣相對濕度85%～90%，適當(dāng)加強(qiáng)通風(fēng)，有散射光，但不能有強(qiáng)光照，否則菇體表面的鱗片明顯增多，影響商品外觀。生長3 d幼菇見圖13。

圖13 逐漸長大幼菇

3.8 成菇期管理

成菇期要適當(dāng)降低室溫，這樣可以延遲菇體開傘，使菇肉厚實(shí)。溫度可保持在15～18℃，空氣相對濕度85%～99%，有散射光。溫度過高，子實(shí)體容易早熟、開傘，光照過強(qiáng)，蓋表層產(chǎn)生龜裂成“花菇”，影響商品質(zhì)量。

3.9 采收

當(dāng)菇體結(jié)實(shí)、菌蓋緊包菌柄，菌膜未破裂時(shí)采收（圖14-圖16）。采收晚，菌蓋呈傘狀（圖17），菌褶變黑（圖18），嚴(yán)重時(shí)菌褶變黑成墨汁狀（圖19）。采收前不噴水，以免影響菇保鮮期。采收時(shí)手持菌柄下部，輕輕旋轉(zhuǎn)拔起，并清除病菇、菇根。采菇后，及時(shí)補(bǔ)土，停水2～3 d，適度通風(fēng)，待菌絲恢復(fù)生長時(shí)再噴水催蕾開始下潮菇管理，第2潮菇出菇管理參照第1潮菇。

圖14 采收子實(shí)體

圖15 菌膜未破裂

圖16 菌膜破裂

圖17 菌蓋呈傘狀

圖18 菌褶變黑

圖19 菌褶成墨汁狀

4 小結(jié)

試驗(yàn)共采收2潮菇，鮮菇總產(chǎn)量9 kg，總投料量為30 kg，生物學(xué)效率為30%。試驗(yàn)結(jié)果表明，采用楊樹葉為主要原料覆土栽培四孢蘑菇能出菇。筆者在覆土出菇的同時(shí)，選取發(fā)滿菌絲的栽培種，開袋口并拉直，覆蓋塑料薄膜，結(jié)果沒有出菇，可見覆土是該菌株出菇的必要條件。