蔣振華，王賢英★，熊彬彬

（1.重慶市中藥研究院，重慶 400065；2.重慶市九龍坡區(qū)渝州路街道社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，重慶 400065）

黃精為百合科植物滇黃精（Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl.）、黃 精（Polygonatum sibiricum Red.）或 多 花 黃 精（Polygonatum cyrtonema Hua）的干燥根莖，屬于藥食兩用類(lèi)中藥。此藥中含有多種活性成分，其藥理作用廣泛，且具有保健作用[l]。有研究指出，黃精具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、潤(rùn)肺、健脾、益腎等功效，可用于治療脾胃氣虛、胃陰不足、勞嗽咳血、體倦乏力、口干食少、內(nèi)熱消渴、須發(fā)早白等病證[2]。中藥的成分十分復(fù)雜，一些藥物具有揮發(fā)油成分，不適合進(jìn)行超細(xì)粉碎處理（會(huì)導(dǎo)致?lián)]發(fā)油成分損失，使得其藥效受到影響）[3]。本實(shí)驗(yàn)對(duì)比了不同粉碎細(xì)度下黃精中浸出物、多糖、皂苷、三萜類(lèi)化合物含量的變化情況，旨在為確定黃精的適宜粉碎目數(shù)提供參考。

1 實(shí)驗(yàn)材料

不同粉碎目數(shù)的黃精粉末：10～18目的黃精粉末，18～24目的黃精粉末，24～50目的黃精粉末，50～65目的黃精粉末，65～80目的黃精粉末，80～100目的黃精粉末，100～120目的黃精粉末，120～150目的黃精粉末，150～200目的黃精粉末，大于200目的黃精粉末。

2 試劑與儀器

冰醋酸、濃硫酸、高氯酸、甲醇、香草醛（以上試劑均為分析純?cè)噭?，蒸餾水，D-無(wú)水葡萄糖對(duì)照品，齊墩果酸對(duì)照品，人參皂苷Rb1；紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)，電子分析天平，超聲波清洗儀，恒溫水浴鍋等。

3 方法與結(jié)果

3.1 黃精中浸出物含量的測(cè)定

采用熱浸法測(cè)定各粉碎目數(shù)黃精粉末樣品中的浸出物[4]，溶劑為稀乙醇和純化水。測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖1、圖2。

圖1 各粉碎目數(shù)黃精粉末樣品中水溶性浸出物的含量

圖2 各粉碎目數(shù)黃精粉末樣品中醇溶性浸出物的含量

3.2 黃精中多糖含量的測(cè)定

稱(chēng)取適量的D-無(wú)水葡萄糖，加入蒸餾水，制成0.329 mg/mL的溶液[5]。稱(chēng)取0.2 g的蒽酮，置于燒杯中，加入100 mL的濃硫酸將其溶解。量取0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL、0.6 mL的對(duì)照品溶液，加入到10 mL的試管中，分別加水稀釋至2.0 mL。于冰水浴中加入上述蒽酮-硫酸液體，并混勻。冷卻后放于水浴中10 min，取出后放進(jìn)冰水浴中。10 min后取出。用紫外-可見(jiàn)分光光度儀對(duì)其吸光度進(jìn)行測(cè)量。制作葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸曲線方程為y=4.0599x+0.066，R2=0.9995。詳見(jiàn)圖3。取不同粉碎目數(shù)的黃精粉末樣品各0.25 g，放入燒瓶并加150 mL乙醇，于水浴中進(jìn)行1 h的加熱，并進(jìn)行濾過(guò)處理。用10 mL的熱乙醇洗滌殘?jiān)?，重?fù)進(jìn)行3次。濾紙與殘?jiān)萌霟?，?50 mL水，于沸水浴中進(jìn)行1 h的加熱，并進(jìn)行濾過(guò)處理。用10 mL的熱水對(duì)燒瓶與殘?jiān)M(jìn)行洗滌，重復(fù)進(jìn)行4次。將洗液與濾液融合，靜置冷卻后置入250 mL的量瓶中，加水至刻度后搖晃均勻。取1 mL置入試管中，然后測(cè)定其中多糖的含量。測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖4。

圖3 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖4 各粉碎目數(shù)黃精粉末樣品中多糖的含量

3.3 黃精中三萜類(lèi)化合物的測(cè)定

稱(chēng)量齊墩果酸，將其與甲醇混合制成0.2013 mg/mL的溶液[6]。稱(chēng)量香草醛0.5 g，混入冰醋酸，定容成10 mL。分別取齊墩果酸對(duì)照品溶液0.1 mL、0.3 mL、0.5 mL、0.7 mL、0.9 mL、1.1 mL，分別加入至10 mL試管中，加熱揮干并冷卻。滴入0.2 mL的香草醛-冰醋酸溶液與0.8 mL的高氯酸，搖勻，置于水浴（70℃）中加熱。15 min后放進(jìn)冰浴中冷卻，5 min后加入4.0 mL乙酸乙酯，搖勻。用紫外-可見(jiàn)分光光度儀測(cè)定吸光度，制作齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸曲線方程為y=3.4593x+0.0317，R2=0.9995。詳見(jiàn)圖5。稱(chēng)取黃精粉末樣品2 g，置入錐形瓶中，加乙醇50 mL，進(jìn)行45 min的超聲處理，然后進(jìn)行濾過(guò)處理。用無(wú)水乙醇洗滌濾渣及濾器，混合洗液與濾液，置入容量瓶（100 mL）中，加入無(wú)水乙醇至刻度，并搖勻。量取0.2 mL的供試品溶液，置入試管中，然后測(cè)定其中三萜類(lèi)化合物的含量。詳見(jiàn)圖6。

圖5 齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖6 各粉碎目數(shù)黃精粉末樣品中三萜類(lèi)化合物的含量

3.4 黃精中總皂苷含量的測(cè)定

取11.5 mg的人參皂苷Rb1，加入容量瓶（10 mL）中，混入甲醇并定容至10 mL[7]。取40 μL、80 μL、120 μL、160 μL、200 μL加入到試管（10 mL）中，揮盡后滴加0.2 mL的香草醛-冰醋酸溶液(5%)。在冰浴下滴加高氯酸0.8 mL，混勻后進(jìn)行水浴（60℃）。15 min后進(jìn)行冰浴。2 min后滴加冰醋酸5 mL，靜置5 min，然后對(duì)吸光度進(jìn)行測(cè)定。制作人參皂苷Rb1標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸曲線方程為y=0.0018x-0.0238(r=0.9993)。詳見(jiàn)圖7。稱(chēng)量不同粉碎目數(shù)的黃精粉末各1.0 g，滴加水飽和正丁醇10 mL，進(jìn)行50 min的超聲提?。?0℃），共進(jìn)行兩次，混合濾液并置入量瓶（25 mL）中。取100 μL試液，揮干后進(jìn)行顯色，對(duì)吸光度進(jìn)行測(cè)定，并計(jì)算總皂苷的含量。詳見(jiàn)圖8。

圖7 人參皂苷Rb1標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖8 各粉碎目數(shù)黃精粉末樣品中總皂苷的含量

3.5 黃精中總酚含量的測(cè)定

稱(chēng)量0.1105 g沒(méi)食子酸，置于100 mL容量瓶中，加水定容至刻度后搖晃均勻[8]。分別取該溶液1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL置入容量瓶（100 mL）中，加水定容至刻度并晃勻，以獲取不同濃度的溶液。各稱(chēng)量1 mL加入到10 mL的刻度試管中，并加入1 mL水。分別加入5.0 mL的福林酚試劑，搖勻，反應(yīng)3～8 min。滴加4.0 mL碳酸鈉溶液（濃度為l7.5%），加入到達(dá)刻度劑量的水，晃勻后靜置。1 h后對(duì)其吸光度進(jìn)行測(cè)量，制作沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸曲線方程為y=0.01x+0.0126(r=0.9994)。詳見(jiàn)圖9。分別稱(chēng)量不同粉碎目數(shù)的黃精粉末各l g，加入到容量瓶（50 mL）中，然后滴加40 mL的甲醇。進(jìn)行超聲處理，0.5 h后將其取出并放至冷卻，滴加甲醇至刻度，搖勻。精密量取1.0 mL樣品，加入到試管（10 mL）中，然后對(duì)其吸光度進(jìn)行測(cè)定，并計(jì)算其中總酚的含量。詳見(jiàn)圖10。

圖9 沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖10 各粉碎目數(shù)黃精粉末樣品中總酚的含量

3.6 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可發(fā)現(xiàn)：在粉碎目數(shù)為50～65目時(shí)，黃精中浸出物的含量最高。在粉碎目數(shù)為65～80目時(shí)，黃精中多糖的含量最高。在粉碎目數(shù)為100～120目時(shí)，黃精中總皂苷和總酚的含量最高。在粉碎目數(shù)為120～150目時(shí)，黃精中三萜類(lèi)化合物的含量最高。

4 小結(jié)

分析以上結(jié)果可知，中藥黃精的粉碎細(xì)度要根據(jù)研究目的來(lái)確定，并不是粉碎得越細(xì)越好。經(jīng)超微粉碎后，中藥的毒副作用、化學(xué)及物理性能等均會(huì)產(chǎn)生變化。筆者認(rèn)為，微粉化技術(shù)在中藥制備方面具有良好的應(yīng)用前景，但需要加強(qiáng)對(duì)微粉化藥物有效成分變化情況的研究。