陳軍平 沈方方 武慧慧 張佳鑫 于若夢 付永杰 謝國強(qiáng) 趙道全

摘要：魚類胚胎發(fā)育一直都是水產(chǎn)育種工作中最為關(guān)鍵的一個環(huán)節(jié)，對種群延續(xù)及漁業(yè)資源可持續(xù)發(fā)展也至關(guān)重要。而魚類胚胎在發(fā)育過程中極易受外界環(huán)境的影響，進(jìn)而對胚胎受精率和孵化率有較大影響，因此需要對不同魚類胚胎發(fā)育的生物學(xué)特征進(jìn)行深入研究。本研究通過對我國近些年來魚類胚胎發(fā)育的研究現(xiàn)狀進(jìn)行總結(jié)，分析探討了孵化溫度、鹽度及其他因素對我國魚類胚胎發(fā)育的影響，最后也探討了我國雜交魚類胚胎發(fā)育的研究近況，以期為我國更多魚類繁育研究提供一定參考。

關(guān)鍵詞：魚類;胚胎發(fā)育;溫度;鹽度;雜交;研究進(jìn)展

中圖分類號： S917? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號：1002-1302（2021）17-0045-08

收稿日期：2021-01-19

作者簡介：陳軍平（1993—），男，河南周口人，碩士研究生，實(shí)習(xí)研究員，主要從事魚類遺傳育種研究。E-mail：chenjunpinghn@163.com。

通信作者：趙道全，教授級高級工程師，主要從事冷水魚、工廠化養(yǎng)魚和種質(zhì)資源保護(hù)等研究。E-mail：Zhaodaoquan@163.com。

魚類胚胎發(fā)育不僅是動物遺傳和發(fā)育生物學(xué)中重要的研究課題，也是水產(chǎn)育種工作中最為關(guān)鍵的一個環(huán)節(jié)。胚胎發(fā)育是從一個受精卵不斷發(fā)育成比較成熟且形態(tài)正常、健康個體的過程。一直以來，眾多學(xué)者使用不同方法對魚類胚胎發(fā)育的各個生物學(xué)特征進(jìn)行深入研究，大大提高了我國相關(guān)魚類的孵化率和成活率，為我國魚類發(fā)育學(xué)、魚類種質(zhì)資源保護(hù)打下堅實(shí)的基礎(chǔ)。本研究根據(jù)我國相關(guān)魚類胚胎發(fā)育的研究現(xiàn)狀，分析探討了孵化溫度、鹽度及其他因素對我國魚類胚胎發(fā)育的影響，最后也探討了我國雜交魚類胚胎發(fā)育的研究近況，以期為我國更多魚類（稀有魚類）繁育，種質(zhì)資源開發(fā)、利用和保護(hù)提供理論依據(jù)，促進(jìn)我國漁業(yè)資源又好又快發(fā)展。

1 胚胎發(fā)育

與其他動物一樣，魚類胚胎在整個發(fā)育過程中變化最為明顯，不論其所處環(huán)境還是所屬種類，均容易受外界壞境不同程度的影響，對受精率、畸形率和成活率均有較大影響，所以這一階段對于魚的個體來說既是重要的又是脆弱的。即使基因?qū)︳~類胚胎發(fā)育有著決定性作用，但外界因素如溫度、鹽堿度、溶解氧和pH值等也會對胚胎的整體發(fā)育過程產(chǎn)生巨大的影響[1]。由于胚胎容易受到外界各因素的影響，因此在各生長階段中死亡率也是最高的，這就迫切需要根據(jù)不同種屬胚胎發(fā)育的特點(diǎn)進(jìn)行更深入研究，以期更好地保證魚類胚胎孵化率和成活率，這對于未來更高效的工廠化、集約化及漁業(yè)種質(zhì)資源保護(hù)和漁業(yè)可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。

硬骨魚類的胚胎發(fā)育主要經(jīng)歷5個時期，分別為卵裂期、囊胚期、原腸胚期、神經(jīng)胚期和器官形成期[2]。目前，國內(nèi)學(xué)者已對大量魚類胚胎發(fā)育情況進(jìn)行了比較深入的觀察，發(fā)現(xiàn)了溫度等環(huán)境因素對其胚胎發(fā)育速率均有不同程度影響，如虹鱒（Oncorhynchus mykiss）[3]、黃姑魚（Nibea albiflora）[4]、擬鲿（Pseudobagrus ussuriensis）[5]、斑點(diǎn)叉尾（Ictalurus punctatus）[6]、黃斑籃子魚（Siganus oramin）[7]、黃尾鲴（Xenocypris davidi Bleer）[8]等。

2 環(huán)境因素對魚類胚胎發(fā)育的影響

2.1 溫度對胚胎發(fā)育的影響

溫度對親本產(chǎn)卵、胚胎發(fā)育、后期幼魚的生長過程及魚類的攝食和新陳代謝等生理過程均有重要影響。其中，胚胎發(fā)育過程對水溫的高低最為敏感[9]。在魚類胚胎發(fā)育過程中，溫度過高或過低均會導(dǎo)致胚胎停止發(fā)育或死亡，造成孵化率降低等，所以研究最適胚胎發(fā)育溫度尤為重要。近幾年，育種工作者對越來越多的魚類進(jìn)行了早期胚胎發(fā)育的研究，發(fā)現(xiàn)水溫對胚胎發(fā)育的各個階段及孵化率有較大的影響，如圓口銅魚（Coreius guichenoti）[10]、鯔魚（Mugil cephalus）[11]、胭脂魚[Myxocyprinus asiaticus （Bleeker）][12]、半滑舌鰨（Cynoglossus semilaevis）[13]、達(dá)式鰉（Huso dauricus）[14]、褐點(diǎn)石斑魚（Epinephelus fuscoguttatus）[15]、黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）[16]等。其中，根據(jù)孵化溫度變化對胚胎發(fā)育的影響，已確定了異育銀鯽“中科 3 號”（Allogynogenetic gibelcarp “CAS Ⅲ”）[17]、北方須鰍（Barbatulabar batulanuda）[18]、丁（Tinca tinca）[19]等魚類胚胎發(fā)育的最適孵化溫度，大大提高了相關(guān)魚類的繁育效率（表1）。郭永燦發(fā)現(xiàn)草魚（Ctenopharyngodon idella）和鰱（Hypophthalmichthys molitrix）的胚胎在16～33 ℃才能正常存活，在短時間內(nèi)溫度上升或下降3～5 ℃時，草魚卵和鰱卵在囊胚期和原腸期會產(chǎn)生一些不良反應(yīng)，尤以原腸期最為明顯，造成孵化率大幅度下降甚至魚卵死亡[20]。

對于同是鯉科魚類的尖裸鯉（Oxygymnocypris stewartii）[21]和四川華鳊（Sinibrama taeniatus）[22]來說，在不同溫度條件下，胚胎發(fā)育時間與溫度呈顯著性負(fù)相關(guān)函數(shù)關(guān)系，尖裸鯉的胚胎在水溫8 ℃時受精率最高，可達(dá)100%，而在17 ℃時最先發(fā)育到原腸期且孵化時間最短。四川華鳊胚胎在16 ℃時發(fā)育至原腸期時出現(xiàn)全部死亡現(xiàn)象，與大多數(shù)魚類一樣，其孵化時間隨著溫度上升而縮短，但其受精率和孵化率均隨著溫度的上升出現(xiàn)了先上升后下降的現(xiàn)象，在25 ℃時孵化率最高為96.13%，在 31 ℃ 時孵化率為79.11%，畸形率也高達(dá)10.49%，該結(jié)果也與相關(guān)研究結(jié)果[23]一致。黃賢克等在觀察黃姑魚胚胎發(fā)育時發(fā)現(xiàn)，當(dāng)水溫在18～28 ℃之間時對黃姑魚孵化率和畸形率影響較小，隨著溫度的升高，縮短了孵化時間，當(dāng)孵化水溫為26 ℃時，黃姑魚胚胎的器官形成期明顯縮短，說明這一時期對溫度非常敏感，適宜胚胎器官的形成[24]，其最適水溫為 20～24 ℃與黃永春等對狀黃姑魚（Nibea miichthioides）胚胎發(fā)育的研究結(jié)果[25]一致。大多數(shù)魚類在胚胎發(fā)育過程中都會不同程度受到外界環(huán)境變化的影響，也就是“敏感期”，但史秀蘭等發(fā)現(xiàn)烏蘇里白鮭（Coregonus ussuriensis Berg）在胚胎發(fā)育中并沒有出現(xiàn)“敏感期”，而其他鮭科魚類在胚胎發(fā)育中均出現(xiàn)敏感期，在硬骨魚類中，先天免疫系統(tǒng)易受到溫度的影響，這也有可能是由于孵化溫度不同造成的[26]。

一直以來，斑馬魚都被作為模式生物來開展實(shí)驗(yàn)研究，但斑馬魚在出膜時會形成色素，這樣并不利于觀察早期器官的發(fā)育情況。而崔文耀等研究發(fā)現(xiàn)，四帶小鲃（Puntius tetrazona）胚胎在水溫28 ℃時經(jīng)過24 h就能孵化出膜，其出膜時沒有相關(guān)色素的形成，這樣更利于觀察魚類早期器官形成發(fā)育情況，其全年可繁殖、產(chǎn)卵較多，胚胎發(fā)育速度也比斑馬魚更快[27]，是一種有發(fā)展前景的模式生物[28]。王友紅等觀察海水青鳉（Oryzias melastigma）胚胎發(fā)育時發(fā)現(xiàn)，其歷經(jīng)312 h后陸續(xù)孵化出膜[29]，在水溫相似的情況下，該研究孵化時間比陳漪等的研究結(jié)果[30]慢了近92 h，這可能是由于水質(zhì)不同等相關(guān)因素的原因，影響了其胚胎發(fā)育。作為現(xiàn)已報道裂腹魚類卵徑最大的雙須葉須魚（Ptychobarbus dipogon Regan），其卵徑為3.7～3.9 mm，孵化用時為336.02 h，遠(yuǎn)遠(yuǎn)慢于厚唇列腹魚胚胎發(fā)育時間，與其他裂腹魚亞科魚類胚胎發(fā)育溫度相比偏低，所以其孵化時間較長不僅與溫度有關(guān)系，還與其卵徑較大有很大的關(guān)系[31]。在相同的條件下，受精卵越大，其發(fā)育速率越慢。官曙光等發(fā)現(xiàn)，黑棘鯛（Acanthopagrus schlegelii）的胚胎發(fā)育最適溫度為 18～22 ℃，當(dāng)孵化溫度高于25 ℃時，在囊胚期和原腸晚期會出現(xiàn)大量死亡現(xiàn)象，這也可能是由于高溫影響細(xì)胞分裂造成的[32]。相關(guān)文獻(xiàn)表明，魚類胚胎發(fā)育階段把水溫設(shè)定為恒定溫度并不是最適溫度，而根據(jù)胚胎不同發(fā)育階段設(shè)定不同的溫度，將會更有利于提高胚胎的發(fā)育速率，進(jìn)而提高魚卵的孵化率和成活率[33-34]。關(guān)于不同水溫對淇河鯽（Carassius auratus）早期胚胎發(fā)育的影響中，吳利敏等發(fā)現(xiàn)當(dāng)孵化早期水溫為24 ℃時可提高受精率，后期使水溫控制到27 ℃時，可大大提高孵化率[35]，這也表明在魚類胚胎不同發(fā)育時期設(shè)定不同的溫度，將會更有利于胚胎發(fā)育。上述研究結(jié)果表明，在一定溫度范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，魚類胚胎孵化用時越短;魚卵卵徑越大，孵化用時越長，卵徑越小，孵化用時越短;大多數(shù)魚類胚胎發(fā)育至原腸期時對溫度變化最為敏感。

2.2 鹽度對胚胎發(fā)育的影響

與溫度一樣，鹽度在魚類胚胎發(fā)育過程中發(fā)揮著重要作用，尤其是對海水魚類影響較大，過高或過低的鹽度都會造成受精卵卵膜滲透壓的不同，進(jìn)而使細(xì)胞分裂不正常，最終導(dǎo)致胚胎死亡或出膜后出現(xiàn)畸形的現(xiàn)象[36]。周天舒等研究了不同鹽度對大鰭彈魚（Periophthalmus magnuspinnatus）胚胎的耐受性發(fā)現(xiàn)，當(dāng)鹽度高達(dá)30‰和35‰時，胚胎發(fā)育至囊胚期和原腸晚期出現(xiàn)了全部死亡的現(xiàn)象;在鹽度為20‰和25‰時，胚胎均在鰾雛形期死亡;在鹽度5‰～15‰的范圍內(nèi)均能正常生長發(fā)育，當(dāng)鹽度為10‰時，其孵化率最高，而鹽度為5‰時，孵化用時最短。黃賢克等研究發(fā)現(xiàn)，黃姑魚胚胎在鹽度為 20‰～24‰之間時，受精卵全部沉底且孵化率較低，由于受精卵全部沉入水底并與死卵接觸，部分受精卵得不到充足的氧氣進(jìn)而出現(xiàn)發(fā)霉的現(xiàn)象，最終導(dǎo)致孵化率降低[24]。當(dāng)鹽度分別為26‰～32‰時，大部分受精卵懸浮于水中，一小部分受精卵漂浮在水面，且孵化率顯著提高，尤其是當(dāng)鹽度為32‰時，孵化率最高達(dá)到99.67%，這也是由于受精卵懸在水中或漂浮于水面增加了受精卵在水中的接觸面積，能夠得到充足的氧氣且能較好地排除氨氮，從而大大提高了孵化率。當(dāng)鹽度超過36‰或低于24‰時，孵化出的仔魚會出現(xiàn)較嚴(yán)重的畸形現(xiàn)象[24]，該試驗(yàn)結(jié)果與柴學(xué)軍等對日本黃姑魚（Nibea japonica）的研究結(jié)果[4]相類似。與黃姑魚相似，條石鯛（Oplegnathus fasciatus）在胚胎發(fā)育過程中，當(dāng)鹽度低于26.4‰時，魚卵只有一小部分漂浮在水的中層，大多數(shù)魚卵沉入底部，高于26.4‰時，魚卵幾乎全部漂浮在水的上層;當(dāng)鹽度低于20.7‰時，受精卵無法正常孵化，當(dāng)鹽度在20.7‰～37.9‰之間時，條石鯛胚胎的孵化率呈不斷上升趨勢且畸形率不斷下降，當(dāng)鹽度高于41.2‰時，其孵化率和仔魚的成活率均呈下降趨勢[37]。蔡文超等還發(fā)現(xiàn)，條石鯛胚胎在卵裂時期至原腸期對鹽度變化最為敏感，在該時期內(nèi)均造成大量魚卵死亡，由于過高或過低的鹽度變化導(dǎo)致卵膜內(nèi)外滲透壓不同，從而引起畸形或死亡[38]。宋振鑫等研究觀察不同鹽度條件對云紋石斑魚（Epinephelus moara）胚胎發(fā)育影響時，發(fā)現(xiàn)其胚胎發(fā)育在鹽度為10‰～45‰時均能正常孵化，其孵化時間基本一致，最適宜鹽度在30‰～35‰之間，在該鹽度范圍內(nèi)孵化率最高且畸形率最低[39]。該研究結(jié)果與七帶石斑魚（Epinephelus septemfasciatus）胚胎發(fā)育的最適鹽度一致，但是七帶石斑魚胚胎在發(fā)育過程中隨著鹽度的增加，其孵化時間有不斷減少的趨勢[40]。相關(guān)報道稱，海水魚類在胚胎發(fā)育過程中受到外界的高強(qiáng)度滲透壓時，會在一定程度上促進(jìn)胚胎發(fā)育，進(jìn)而縮短了孵化時間，但隨著鹽度的不斷增加也會造成受精卵無法正常孵化或孵化后仔魚出現(xiàn)畸形、抵抗力差等現(xiàn)象[41]。上述研究結(jié)果表明，不同魚類胚胎對鹽度的耐受力不同，最適鹽度也不相同，適宜的鹽度可以使胚胎懸浮于水面，從而得到充足的氧氣并提高了孵化率。當(dāng)鹽度過高或過低時，魚類胚胎均無法孵化出膜，大多數(shù)魚類胚胎發(fā)育至囊胚期或原腸期已死亡或停止發(fā)育，這也可能是因?yàn)榕咛榱苏{(diào)節(jié)適應(yīng)較高的滲透壓而消耗了過多能量，從而導(dǎo)致胚胎無法正常發(fā)育。

2.3 其他因素對胚胎發(fā)育的影響

近些年，由于自然資源和水資源不斷遭到破壞，水體中的污染物經(jīng)過大量積累對魚類正常發(fā)育產(chǎn)生了重大的不良影響。尤其魚類在早期胚胎發(fā)育時期對外界影響因子最為敏感，極易影響魚類胚胎受精率、發(fā)育速率、孵化率，最終導(dǎo)致魚類中毒、畸形、死亡等現(xiàn)象，而水中的重金屬元素嚴(yán)重影響了魚類早期胚胎的正常發(fā)育。史晉絨等研究觀察不同濃度的Cu2+對稀有鯽（Gobiocypris rarus）胚胎發(fā)育的影響時發(fā)現(xiàn)，各個濃度的Cu2+均對稀有鯽有一定毒性影響，出現(xiàn)胚胎心跳減緩、心率不齊、生理功能不正常以及出膜后的仔魚較小等不良現(xiàn)象。當(dāng)Cu2+濃度為0.1 mg/L和0.2 mg/L時，其胚胎分別在96 h和60 h全部死亡[42]。然而，一定濃度的CuInS2/ZnS QDs會誘導(dǎo)Hsp70、Cypla和Wnt8a基因表達(dá)量上調(diào)，使Wstn基因表達(dá)發(fā)生改變，導(dǎo)致稀有鯽胚胎發(fā)育時間延長、孵化率降低和脊柱彎曲等現(xiàn)象，但致死率并不顯著[43]。有報道稱重金屬最早在斑馬魚胚胎發(fā)育至卵裂期就出現(xiàn)了畸形現(xiàn)象，斑馬魚受精卵經(jīng)Zn暴露后，其胚盤就有異常細(xì)胞突起等不良現(xiàn)象[44]。黃偉還發(fā)現(xiàn)，褐牙鲆（Paralichthys olivaceus）受精卵經(jīng)重金屬Hg和Zn暴露后，其孵化率大大降低[45]。

除此之外，其他影響因素也會對魚類胚胎發(fā)育造成不良影響，當(dāng)易溶于水的十二烷基苯磺酸鈉（SDBS）濃度≥2.5 mg /L時，大鱗副泥鰍（Paramisgurnus dabryanus）胚胎孵化時間顯著延長，孵化率明顯下降，畸形率較高，這與SDBS抑制了機(jī)體抗氧化作用并影響了DNA表達(dá)有密切關(guān)系，死亡率與SDBS濃度成正比。當(dāng)SDBS≥0.1 mg/L時，會影響到大鱗副泥鰍精巢發(fā)育[46]。在池塘養(yǎng)殖中，殘留餌料和魚類排泄物等原因均會不同程度地導(dǎo)致氨氮含量增高。當(dāng)氨、氮在一定濃度范圍內(nèi)，胚胎可以正常發(fā)育，甚至可以加快胚胎發(fā)育速率，但高濃度的氨、氮對魚類胚胎發(fā)育有明顯的毒性作用，即使有部分胚胎可以正常出膜，但孵化率會大幅度下降，仔魚也會出現(xiàn)畸形或無法正常存活[47]。當(dāng)氨氮濃度為80 mg/L時，臺灣泥鰍孵化率會顯著下降，即使仔魚出膜后也會很快死亡，該研究結(jié)果與氨氮對鰱、鳙等魚類影響的結(jié)果[48]一致，而不同濃度氨氮對臺灣泥鰍胚胎孵化時間及胚胎心率并沒有顯著影響[49]。我國學(xué)者在長江宜昌段對稀有鯽進(jìn)行暴露試驗(yàn)時發(fā)現(xiàn)，當(dāng)氨氮含量超標(biāo)時會對稀有鯽胚胎產(chǎn)生較大的毒性效應(yīng)，造成胚胎心率下降、脊椎彎曲、死亡率高等不良現(xiàn)象[50]。

在養(yǎng)殖過程中，一些獸藥、飼料添加劑都曾檢測出相關(guān)抗生素，這些抗生素并不能完全被魚類所吸收，造成了嚴(yán)重的環(huán)境問題，對魚類也會產(chǎn)生一定的毒性。劉麗麗等研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)磺胺二甲嘧啶（sulfamethazine，SMZ）為低濃度（0.001～10 mg/L））時，斑馬魚胚胎會出現(xiàn)比較明顯的畸形現(xiàn)象，對死亡率影響不明顯;SMZ為中濃度（10～300 mg/L）時，對斑馬魚胚胎發(fā)育有一定的促進(jìn)作用，死亡率明顯下降;當(dāng)SMZ為高濃度時，會抑制胚胎正常發(fā)育導(dǎo)致死亡率上升，研究表明SMZ對斑馬魚的致畸效應(yīng)高于致死效應(yīng)[51]。在用不同濃度的鹽酸四環(huán)素（tetracycline hydrochloride，TCH）處理斑馬魚母本后，發(fā)現(xiàn)其子代胚胎隨著母本TCH濃度的升高，孵化率顯著降低，畸形率和死亡率均有所增加[52]。當(dāng)斑馬魚胚胎受精96 h后，經(jīng)2%乙醇處理后，其孵化率僅為15%，乙醇濃度限制在1.35%～1.80%之間最為合適[53]。還有報道稱，在相同的孵化條件下，加入1 μg/L卡馬西平可有效提高斑馬魚胚胎的孵化率[54]。謝先中等發(fā)現(xiàn)，添加不同濃度的谷氨酰胺（Gln）可以使施氏鱘胚胎發(fā)育時間縮短21～8.7 h，孵化率也提高了近11.86%，畸形率顯著降低。當(dāng)濃度超過10 mg/L時，施氏鱘胚胎孵化率下降，畸形率上升;當(dāng)Gln濃度為5 mg/L時最適合施氏鱘胚胎發(fā)育，此時孵化用時最短、孵化率最高，畸形率最低[55]。

在相同的條件下，水流和孵化密度也會影響魚類胚胎發(fā)育。孵化密度過大會造成水體中的溶解氧嚴(yán)重不足，導(dǎo)致魚卵無法正常發(fā)育。水流量小時，影響受精卵與外部物質(zhì)交換從而影響孵化率;水流量大時可更好地提高水中的溶解氧從而提高孵化率。另外，流水孵化時的畸形率和死亡率遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于凈水孵化[56]。在中華倒刺鲃（Spinibarbus sinensis Bleeker）胚胎發(fā)育過程中，水流和孵化密度對胚胎發(fā)育均有影響，當(dāng)水流量大且溶解氧充足時，孵化密度對胚胎發(fā)育影響較小;而當(dāng)水流量和孵化密度的數(shù)值比大于1/2時，比較適宜中華倒刺鲃胚胎的發(fā)育[57]。

上述研究表明，飼料中的抗生素、水中的污染物、重金屬等微量元素均會對魚類胚胎發(fā)育產(chǎn)生不良影響。尤其在自然水域，重金屬含量超標(biāo)會嚴(yán)重影響野生魚類的正常產(chǎn)卵、發(fā)育和生長。目前，我國人工繁殖普遍采用地下水或經(jīng)過消毒處理的水，水質(zhì)較好，均可正常進(jìn)行魚苗孵化工作。對于一些魚類，通過配制適量的藥物或試劑可以更好地促進(jìn)魚類胚胎的正常發(fā)育。

3 魚類雜交胚胎發(fā)育研究

一直以來雜交廣泛用于農(nóng)牧業(yè)中的品種改良，通過雜交可以結(jié)合父母本的基因獲得具有雜交優(yōu)勢的后代。而在魚類雜交育種中，大多數(shù)魚類雜交出現(xiàn)了胚胎無法正常發(fā)育、畸形、孵化率低等現(xiàn)象[58]。但也有部分魚類如異育銀鯽[17]、建鯉（Cyprinus carpio var. Jian）[59]、和雜交鱘“鱘龍1號”[60]、牙鲆“鲆優(yōu)1號”[61]等分別在生長、肉質(zhì)、抗病及抗寒方面呈現(xiàn)了較好的雜交優(yōu)勢。通過觀察研究，雜交魚類胚胎發(fā)育情況對提高其孵化率、成活率以及培育新品種具有意義。田永勝等在藍(lán)身大斑石斑魚（Epinephelus tukula）（♂）冷凍精子與棕點(diǎn)石斑魚（E. fuscoguttatus）（♀）雜交試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，其受精率、孵化率和畸形率均無明顯差異，當(dāng)藍(lán)身大斑石斑魚和鞍帶石斑魚（E. lanceolatus）作為雄魚與棕點(diǎn)石斑魚雜交時，藍(lán)身大斑石斑魚具有更好的雜交優(yōu)勢[62];成美玲等在對鞍帶石斑魚（♀）×藍(lán)身大斑石斑魚（♂）雜交試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)水溫相同時，雜交組與鞍帶石斑魚（對照組）的胚胎孵化時間差異并不明顯，雜交組的受精率、孵化率略微低于對照組，但差異并不明顯。另外，在仔魚階段的特定時期內(nèi)雜交組的生長速率顯著優(yōu)于對照組，且雜交組與母本相比有明顯生長優(yōu)勢[63]。該試驗(yàn)結(jié)果與云紋石斑魚（♀）×藍(lán)身大斑石斑魚（♂）雜交的結(jié)果相似，當(dāng)孵化溫度控制在（24.8 ± 0.5） ℃時，其胚胎均能正常發(fā)育，雜交子代的受精率、孵化率均有略微的下降，畸形率有所上升，其卵經(jīng)與對照組（云紋石斑魚）相比略大且孵化時間慢于對照組1.5 h[64]，與其他石斑魚屬相比，其孵化時間有較大差異，這也與溫度及卵徑大小有密切的關(guān)系。但在孵化后雜交子代的生長速率明顯優(yōu)于對照組，具有良好的雜交優(yōu)勢。在鞍帶石斑魚（♀）×云紋石斑魚（♂）雜交育種試驗(yàn)中，當(dāng)溫度為24 ℃時，其胚胎均能正常發(fā)育，孵化用時為18 h 52 min，發(fā)現(xiàn)正反交子代的發(fā)育速率均快于云紋石斑魚，但慢于鞍帶石斑魚，而正交子代生長速率卻快于于反交子代[65]，其子代發(fā)育速率與楊求華等對云紋石斑魚（♀）×赤點(diǎn)石斑魚（E. akaara）（♂）雜交的比較相似[66]。這些研究結(jié)果都為石斑魚雜交優(yōu)勢性狀形成及遺傳信息提供了一定的基礎(chǔ)。此外，楊洋等首次對短須裂腹魚（Schizothorax wangchiachii）（♀）×鱸鯉（Percocyprispingi pingi）（♂）進(jìn)行遠(yuǎn)緣雜交時發(fā)現(xiàn)，當(dāng)孵化溫度控制在（14.5±1.0） ℃時，其雜交子一代胚胎受精率高達(dá)95.33%，孵化率為71.12%，胚胎發(fā)育速率均快于父母本，而這也可能與胚胎在胚孔封閉期有輕微的卵黃運(yùn)動有關(guān)，但在仔魚期雜交子一代生長速度慢于父本鱸鯉;而在反交試驗(yàn)中，其雜交子代胚胎發(fā)育至原腸晚期時死亡率超過85%，最后僅有的12尾出膜后都出現(xiàn)畸形現(xiàn)象并在3 d后死亡[67]。施氏鱘（Acipenser schrenckii）（♀）×西伯利亞鱘（♂）（A. baeri）雜交子代的受精率最高達(dá)85.6%，由于受到孵化溫差較大原因，其孵化率僅為55%，遠(yuǎn)低于父母本的正常孵化率，所以把溫度在一定溫度范圍內(nèi)還可以進(jìn)一步提高雜交子代的孵化率[68]。在達(dá)氏鰉（♀） ×施氏鱘（♂）雜交的過程中，無論正交還是反交，其孵化率和受精率差異并不顯著，均超過81%，出苗率也超過79%，與施氏鱘差異均不顯著[69]。在觀賞魚中，通過對紅頭麗體魚（Cichlasoma synspilum）（♀）×紅魔麗體魚（C. citrinellum）（♂）進(jìn)行雜交，其胚胎在水溫為（30±05） ℃的情況下，孵化時間為 52 h 36 min，受精率與孵化率均超過91%，均高于其他雜交魚類的受精率和孵化率，表明這2種魚有較強(qiáng)的雜交親和性[70]。通過花（Hemibarbus maculatus）（♀）×唇（H. labeo）（♂）雜交發(fā)現(xiàn)，其子代胚胎發(fā)育時間與母本花胚胎發(fā)育時間比較相近，與父本唇胚胎發(fā)育相比有較大的差異[71]。該試驗(yàn)結(jié)果與相關(guān)報道非常相似，如翹嘴鱖（Siniperca chuatsi）（♀）×斑鱖（S. scherzeri）（♂）[72]、狀黃姑魚（Nibea miichthioides）（♀）×大黃魚（Pseudosciaena crocea）（♂）[73]、星斑川鰈（Platichthys stellatus）和石鰈（Kareius bicoloratus）[74]等魚類雜交試驗(yàn)，均發(fā)現(xiàn)其子代胚胎發(fā)育時間與母本胚胎發(fā)育時間比較一致。上述研究結(jié)果表明，在相同的條件下，大多數(shù)魚類在雜交育種過程中都有一定的雜交優(yōu)勢。其中，雜交子代的胚胎發(fā)育過程、時間均與母本比較接近，并有一定的雜交優(yōu)勢，與父本的胚胎發(fā)育過程有較大差異。這些雜交魚類胚胎發(fā)育特點(diǎn)表明，雜交魚類中母本雌核基因可能在雜交胚胎發(fā)育過程中發(fā)揮了一定的作用（表2）。

4 展望

近幾年，水資源污染對我國漁業(yè)資源造成了嚴(yán)重的威脅，尤其在魚類產(chǎn)卵期，嚴(yán)重影響我國相關(guān)魚類胚胎的正常發(fā)育和生長，造成野生魚類資源銳減、種質(zhì)資源退化等現(xiàn)象。相關(guān)部門應(yīng)加大監(jiān)管管理力度，避免水中的重金屬元素等有害污染物對魚類胚胎發(fā)育及后期的生長造成不良影響。

魚類胚胎發(fā)育觀察研究一直都是一個相對傳統(tǒng)但又非常重要的的研究熱點(diǎn)。近些年，學(xué)者們對各種魚類進(jìn)行了胚胎發(fā)育觀察，越來越多的魚類被開發(fā)、保存下來，但大多數(shù)研究主要集中在胚胎發(fā)育觀察和溫度對整個胚胎發(fā)育速率、受精率等方面，仍不夠系統(tǒng)、深入。隨著生物技術(shù)以及相關(guān)智能設(shè)備的發(fā)展和完善，還可以對魚類胚胎進(jìn)行更深入、系統(tǒng)的研究，如：（1）深入研究添加中草藥、植物等提取物對胚胎發(fā)育的影響，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，從柚子皮中提取的果膠可以作為魚類天然的孵化劑，通過上調(diào)斑馬魚孵化酶（ZHE1）來促進(jìn)斑馬魚孵化能力，經(jīng)果膠（100 μg/mL）處理過的斑馬魚的孵化率（96.6%）顯著高于未處理的斑馬魚胚胎的孵化率（66.6%）[75]，與化學(xué)試劑相比，通過開發(fā)研究天然孵化劑對魚類胚胎發(fā)育的影響，將會更有利于魚類胚胎發(fā)育及水環(huán)境的保護(hù);（2）原腸期是魚類胚胎發(fā)育階段對溫度變化的“最敏感時期”，其他發(fā)育階段對溫度變化等相關(guān)因素是否存在“敏感期”，其作用機(jī)制又是什么，可以根據(jù)這些去探討不同溫度、鹽度以及其他環(huán)境因子對胚胎不同發(fā)育階段的影響等方面的研究;（3）如何提高魚類胚胎的免疫保護(hù)力以及相關(guān)魚類對外界環(huán)境因素的免疫力是否相同等問題。目前，針對這些問題還需進(jìn)一步地探究。未來隨著魚類胚胎發(fā)育研究的不斷深入以及上述問題的解決，在增產(chǎn)增效的同時，還將對我國魚類發(fā)育學(xué)、魚類繁育、瀕危魚類保護(hù)、魚類進(jìn)化和漁業(yè)資源又好又快發(fā)展具有重要意義。

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