孫 青，丁文玲，方麗君，馮桃健

(1.揚(yáng)州市江都區(qū)水產(chǎn)技術(shù)服務(wù)站，江蘇 揚(yáng)州 225200；2.揚(yáng)州市江都區(qū)淥洋湖水產(chǎn)養(yǎng)殖場，江蘇揚(yáng)州 225262)

揚(yáng)州市江都區(qū)鱖魚養(yǎng)殖起步于20世紀(jì)90年代末，經(jīng)過20年多年的發(fā)展，鱖魚已成為江都區(qū)水產(chǎn)養(yǎng)殖主要品種之一，也是江都區(qū)漁業(yè)鄉(xiāng)村振興的支柱產(chǎn)業(yè)。長期以來，江都區(qū)鱖魚養(yǎng)殖的苗種主要依賴于南方，由于其親本退化，苗種質(zhì)量得不到保證，造成近幾年來池塘養(yǎng)殖鱖魚抗病力下降、成活率低、養(yǎng)殖效益嚴(yán)重下滑狀況。據(jù)調(diào)查，2020年江都區(qū)邵伯鎮(zhèn)鱖魚養(yǎng)殖傳染性脾腎壞死病(病原為細(xì)胞腫大虹彩病毒)，6－9月發(fā)病率70%以上，發(fā)病塘死亡率48%以上，直接經(jīng)濟(jì)損失達(dá)1 200萬元，已成為該地區(qū)鱖魚養(yǎng)殖的“頭號殺手”。目前，該病生產(chǎn)上尚缺乏有效的防范機(jī)制。為探索鱖魚傳染性脾腎壞死病有效預(yù)防方法，2019－2020年筆者在中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院指導(dǎo)下，在江都區(qū)淥洋湖水產(chǎn)養(yǎng)殖場鱖魚養(yǎng)殖池塘，采用虹彩病毒滅活疫苗對鱖魚大規(guī)格魚種進(jìn)行接種注射免疫，取得了較好的效果?，F(xiàn)將疫苗接種方法及試驗(yàn)情況報告如下。

一、材料與方法

1.池塘選擇

試驗(yàn)池塘選澤江都區(qū)淥洋湖水產(chǎn)養(yǎng)殖場鱖魚養(yǎng)殖池塘。2019年試驗(yàn)池塘為5排6號、6排4號，對照塘為3排2號；2020年為4排3號、4排1號，對照塘為5排8號。池塘交通方便，有獨(dú)立進(jìn)排水系，水質(zhì)無污染，水深1.6～1.8米，淤泥厚度小于30厘米。池塘池底平坦，水源充足，排灌方便，每3畝水面配1臺3千瓦葉輪式增氧機(jī)。

2.池塘清整

冬季進(jìn)行清淤、池埂修復(fù)、進(jìn)排水系疏通等池塘改造工作，苗種下塘前30～45天用生石灰?guī)逄?，用生石?20千克/畝化漿后全池潑灑，清除黃鱔、烏鱧、小龍蝦等鱖魚苗敵害。

3.苗種來源

4月25日－5月10日，鱖魚苗種培育戶從我國南方購進(jìn)規(guī)格為1厘米左右的鱖魚烏仔，先進(jìn)行20～35天苗種培育，5月中下旬－6月上旬鱖魚苗培育成大規(guī)格魚種(5厘米左右)，開始向鱖魚成魚養(yǎng)殖戶供應(yīng)。試驗(yàn)組購進(jìn)鱖魚大規(guī)格魚種后，先放養(yǎng)在靠近成魚養(yǎng)殖池的鱖魚餌料魚池進(jìn)行10～15天標(biāo)粗，當(dāng)鱖魚規(guī)格達(dá)到8～12厘米時準(zhǔn)備疫苗接種免疫。

4.流行病學(xué)調(diào)查

調(diào)查近幾年發(fā)病史，主要調(diào)查上年度鱖魚傳染性脾腎壞死病發(fā)病狀況、病原來源、發(fā)病魚日齡及規(guī)格，發(fā)病池塘水溫、水質(zhì)、飼料情況，發(fā)病時間與病程、發(fā)病率與病死率，根據(jù)當(dāng)年天氣、水溫、鱖魚苗培育規(guī)格及池塘準(zhǔn)備情況，預(yù)測當(dāng)年鱖魚傳染性脾腎壞死病首次發(fā)病時間，確定疫苗接種時間。

5.殺蟲消毒、抗應(yīng)激

拉網(wǎng)注射前5天檢查魚體，如有寄生蟲，應(yīng)先用殺蟲藥殺蟲，兩天后用消毒藥對魚體消毒；無蟲則直接用消毒藥進(jìn)行消毒。注射拉網(wǎng)前全池潑灑VC，提高鱖魚苗對拉網(wǎng)、捕撈、注射等的抗應(yīng)激能力。

6.疫苗接種

(1)疫苗的選擇。①選擇鱖魚傳染性脾腎壞死病病原細(xì)胞腫大虹彩病毒滅活疫苗；②應(yīng)選擇有資質(zhì)廠家生產(chǎn)，明確標(biāo)識疫苗名稱、批準(zhǔn)文號、生產(chǎn)批號、出廠日期、保存期、使用方法、保管容器、運(yùn)輸方法等；③應(yīng)逐瓶檢查疫苗瓶有無破損、瓶蓋是否松動、疫苗瓶內(nèi)容物的顏色、性狀是否有異常，否則禁用；④選用乳劑疫苗為好。

(2)疫苗接種器具及工具的準(zhǔn)備與處理。注射器、針頭選用0～0.5毫升獸用連續(xù)注射器，注射針頭根據(jù)免疫苗種規(guī)格選用6#、7#針頭。免疫注射前，將連續(xù)注射器和針頭反復(fù)清洗，開水煮沸15分鐘備用。拉網(wǎng)需經(jīng)曝曬3天以上，抄網(wǎng)、魚桶、網(wǎng)箱、盛魚器具使用前用3%～5%食鹽溶液消毒。

(3)疫苗的保存和使用。疫苗購進(jìn)后應(yīng)及時放入冰箱保存，保存溫度為4℃左右，保存期限越短越好，最長不超過6個月，保存過程中應(yīng)經(jīng)常翻動玻璃瓶裝的疫苗。注射使用前，將疫苗從冷藏箱中取出，待疫苗溫度升至接近當(dāng)日溫度時才可使用，同時充分搖勻。

(4)鱖魚疫苗接種條件及準(zhǔn)備。5月中下旬，水溫15～25℃，選擇無風(fēng)、晴好天氣，將鱖魚苗拉網(wǎng)至背風(fēng)遮陽的近岸處，暫養(yǎng)在靠近增氧機(jī)的網(wǎng)箱中并開動增氧機(jī)。待接種免疫的鱖魚種應(yīng)體質(zhì)健壯、無病，已發(fā)病的鱖魚不能注射疫苗。調(diào)整注射器注射刻度，疫苗瓶安裝排氣針，將疫苗瓶、注射器、連接導(dǎo)管內(nèi)空氣排空。

(5)疫苗注射方法。一人將暫養(yǎng)在網(wǎng)箱中的魚(300～500尾)分批趕向網(wǎng)箱一端，魚體僅背鰭露出水面。疫苗瓶懸掛于待免疫的魚網(wǎng)箱上方，另一空網(wǎng)箱靠近并固定于暫養(yǎng)魚網(wǎng)箱一側(cè)。注射時一只手拿注射器，另一只手抓魚，針頭朝魚頭方向，并與魚體成30～45°刺入魚體胸鰭基部或背鰭基部，以胸鰭基部為佳。注射疫苗的部位應(yīng)明顯見到疫苗進(jìn)入肌肉的“白線”痕跡。注射劑量為10厘米以下的苗種0.08毫升/尾、10厘米以上苗種0.1毫升/尾。注射時應(yīng)做到“穩(wěn)、準(zhǔn)、快”，負(fù)責(zé)折網(wǎng)人員應(yīng)注意魚的活動情況，一旦發(fā)現(xiàn)小部分魚浮頭要及時潑水或提高水位。連續(xù)注射兩小時后，將已注射的魚及時移到附近已清塘消毒的成魚養(yǎng)殖池。

7.養(yǎng)殖管理

(1)疫苗接種注射前后鱖魚池四周要攔網(wǎng)，阻擋鳥類覓食，調(diào)節(jié)水質(zhì)，潑灑VC、果酸等抗應(yīng)激制劑。鱖魚接種后放入成魚池中第1天即用聚維酮碘清毒，連用2天，2周后加注新水。

(2)合理投喂餌料魚，餌料魚以鱖魚2～3天吃完為好，前期用鯽魚苗作餌料魚，7月后改用廣東鯪魚，發(fā)病季節(jié)適當(dāng)減少投喂，以減少鱖魚發(fā)病。

(3)定期交替使用EM菌、芽孢桿菌、糞鏈球菌等生物制劑及底質(zhì)改良劑，常開增氧機(jī)，保持溶氧充足；養(yǎng)殖后期水質(zhì)老化，氨氮、亞硝酸鹽偏高，應(yīng)減少鱖魚餌料投喂量，及時降解池水中的有害物質(zhì)，適當(dāng)加注新水、換水。

(4)鱖魚養(yǎng)殖期間斜管蟲病危害比較重，水溫在20～25℃時應(yīng)勤采魚樣，用顯微鏡檢查斜管蟲，鏡檢一旦發(fā)現(xiàn)斜管蟲，立即用藥；梅雨季節(jié)鱖魚出血病也會經(jīng)常發(fā)生，應(yīng)及時預(yù)防、治療。

8.注意事項

虹彩病毒疫苗只能預(yù)防傳染性脾腎壞死病，不能用作治療。當(dāng)發(fā)現(xiàn)池塘中有疑似傳染性脾腎壞死病魚時就不能接種疫苗。接種前應(yīng)停食24小時以上。疫苗一旦開瓶應(yīng)一次用完，用過的疫苗瓶、器具和未使用完的疫苗應(yīng)進(jìn)行無害化處理。如意外將疫苗污染到人的眼、鼻、嘴中，應(yīng)及時對患部采取清洗、消毒等措施。

9.苗種放養(yǎng)

鱖魚試驗(yàn)塘、對照塘苗種放養(yǎng)情況見表1。

表1 試驗(yàn)塘、對照塘苗種放養(yǎng)情況

二、試驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)塘鱖魚上市時間在9月30日－10月7日，上市規(guī)格0.55～0.6千克/尾，基本達(dá)到“標(biāo)魚”標(biāo)準(zhǔn)。2019年試驗(yàn)塘平均售價50元/千克、單產(chǎn)800千克/畝、利潤7 406元/畝、成活率92.5%，對照塘平均售價46元/千克、單產(chǎn)351千克/畝、利潤-2 711元/畝、成活率52%；2020年平均售價60元/千克，試驗(yàn)塘單產(chǎn)644千克/畝、利潤1.17萬元/畝，對照塘單產(chǎn)337千克/畝、利潤1 100元/畝、成活率45%。試驗(yàn)塘、對照塘投入與產(chǎn)出情況見表2。

表2 試驗(yàn)塘、對照塘投入與產(chǎn)出情況

三、討論與分析

每年5－6月的水溫升幅不同，病害發(fā)生時間可能提前或推遲，應(yīng)注意調(diào)查池塘往年發(fā)病史，根據(jù)當(dāng)年天氣、水溫實(shí)際情況，準(zhǔn)確把握鱖魚苗種接種時間，一旦時機(jī)適宜，立即準(zhǔn)備接種注射，如發(fā)現(xiàn)塘魚有疑似傳染性脾腎壞死病，應(yīng)取消該塘鱖魚疫苗接種計劃。

試驗(yàn)塘鱖魚苗種經(jīng)虹彩病毒疫苗接種注射，15天后產(chǎn)生免疫抗體，成活率達(dá)92%以上，而未接種注射的鱖魚苗種感染虹彩病毒平均發(fā)病率70%以上，對照塘發(fā)病死亡率49%以上，未經(jīng)接種免疫的鱖魚苗種養(yǎng)成商品魚平均死亡率34.3%以上。

鱖魚苗種適宜接種規(guī)格在8～12厘米，接種苗種規(guī)格小，注射操作難度大、應(yīng)激死亡量增加；接種苗種規(guī)格大，時間相對推遲，接近發(fā)病狀態(tài)，鱖魚未來得及產(chǎn)生抗體就開始發(fā)病，易造成免疫保護(hù)失敗，風(fēng)險較大。同一個池塘鱖魚應(yīng)全部免疫，應(yīng)采取將接種免疫后的鱖魚換塘放養(yǎng)的方式。如果鱖魚接種免疫后仍放養(yǎng)在“標(biāo)粗”塘中，原塘中鱖魚拉網(wǎng)捕撈不能全部捕盡，未接種免疫的鱖魚還會發(fā)病造成病死魚損失，特別在8月下旬后傳染性脾腎壞病第二波發(fā)病時，魚的規(guī)格大、死亡數(shù)量多，發(fā)病塘難以堅持到中秋、國慶節(jié)捕撈上市，一般發(fā)病7～14天即被迫干塘出售，部分鱖魚未達(dá)上市規(guī)格，售價不高，經(jīng)濟(jì)損失較大。