趙晨露， 趙文霞

1 河南中醫(yī)藥大學(xué) 第一臨床醫(yī)學(xué)院， 鄭州 450016； 2 河南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院 脾胃肝膽科， 鄭州 450000

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是常見的慢性肝病，組織學(xué)以肝臟脂肪積聚為特征，在疾病進(jìn)展過程中可見肝臟脂肪變、肝纖維化、肝硬化甚至肝細(xì)胞癌[1]。NAFLD發(fā)病機(jī)制尚不明確，廣泛接受的是“多重打擊學(xué)說”，該學(xué)說在經(jīng)典“二次打擊學(xué)說”基礎(chǔ)上，認(rèn)為NAFLD發(fā)生與多種因素共同作用有關(guān)，包括胰島素抵抗、遺傳及表觀遺傳、腸道菌群、脂肪組織分泌的脂肪因子等[2]。最近有學(xué)者[3]認(rèn)為晝夜節(jié)律紊亂可能成為NAFLD發(fā)病過程中的又一打擊因素。本文基于近年來的相關(guān)數(shù)據(jù)，總結(jié)了晝夜節(jié)律基因參與NAFLD發(fā)病過程中的作用機(jī)制，為臨床早期防治提供理論依據(jù)。

1 晝夜節(jié)律概述

1.1 晝夜節(jié)律的形成 哺乳動(dòng)物的晝夜節(jié)律以24 h為一個(gè)周期，可精確調(diào)節(jié)睡眠-覺醒周期、進(jìn)食-禁食周期、內(nèi)分泌節(jié)律以及新陳代謝節(jié)律等生理活動(dòng)[4]。晝夜節(jié)律是一種細(xì)胞自主的分子機(jī)制，晝夜節(jié)律振蕩器賦予相關(guān)基因有節(jié)律的表達(dá)，將生理和行為同步到晝夜周期內(nèi)[5]。哺乳動(dòng)物晝夜節(jié)律振蕩器由分子鐘操作，位于下丘腦視交叉上核中的生物振蕩器又稱為中心時(shí)鐘或主時(shí)鐘[6]，其可通過體液(皮質(zhì)醇、褪黑激素等)、物理(溫度變化)和神經(jīng)的輸出信號來調(diào)節(jié)外圍時(shí)鐘(包括肝臟、脂肪組織、胰腺等)，從而協(xié)調(diào)新陳代謝功能[7]。

1.2 晝夜節(jié)律的分子調(diào)控 分子鐘由多個(gè)轉(zhuǎn)錄-翻譯反饋環(huán)組成(圖1)，其中核心循環(huán)包括周期蛋白(period, PER)和隱花色素家族 (cryptochrome，CRY)，它們的表達(dá)被大腦和肌肉芳香烴受體核轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(brain and muscleArnt-like protein-1, BMAL1)和晝夜運(yùn)動(dòng)輸出周期蛋白(circadian locomotor output cycles kaput, CLOCK)激活，后兩者組成的異二聚體與E-box增強(qiáng)子序列結(jié)合后，可以啟動(dòng)PER和CRY基因的轉(zhuǎn)錄[8]，隨后在細(xì)胞質(zhì)中形成PER:CRY異二聚體，進(jìn)入細(xì)胞核后抑制BMAL1∶CLOCK介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄，形成第一條自主反饋環(huán)路；BMAL1∶CLOCK異二聚體還可以誘導(dǎo)過氧化物酶體增殖物激活受體α(peroxisome proliferators-activated receptors α, PPARα)、視黃酸相關(guān)孤兒核受體(retinoid-related orphan nuclear receptors,ROR)、核激素受體REV-ERB等核受體的轉(zhuǎn)錄，PPARα和ROR可以激活BMAL1基因的表達(dá)，而REV-ERB則抑制BMAL1轉(zhuǎn)錄提供負(fù)反饋[9]，形成了第二條自主反饋環(huán)路；最近研究[10]已發(fā)現(xiàn)DECs(DEC1和DEC2)的表達(dá)也起著時(shí)鐘基因的功能，DEC可以通過與BMAL1結(jié)合或者與BMAL1∶CLOCK競爭E-box的結(jié)合位點(diǎn)來抑制自身的轉(zhuǎn)錄，DEC還可以抑制Per1的轉(zhuǎn)錄，這可以形成第三條自主反饋環(huán)路；此外，研究[11]發(fā)現(xiàn)白蛋白D位點(diǎn)結(jié)合蛋白基因和E4BP4可以結(jié)合D-box，激活和抑制轉(zhuǎn)錄以穩(wěn)定和微調(diào)PER /CRY反饋環(huán)，從而促進(jìn)第四環(huán)的形成。這種相互作用對于產(chǎn)生和維持晝夜節(jié)律機(jī)制的正確運(yùn)作至關(guān)重要。

圖1 晝夜節(jié)律的分子調(diào)控機(jī)制

2 晝夜節(jié)律與NAFLD的關(guān)系

相關(guān)臨床研究[12]顯示，經(jīng)常輪班倒班的女護(hù)士2型糖尿病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)較高，且與輪班倒班的工作年限呈正相關(guān)(1～5年、5～9年、≥10年其2型糖尿病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)分別為1.09、1.28、1.47)；慢性睡眠限制和晝夜節(jié)律中斷會導(dǎo)致體內(nèi)32%的胰島素分泌減少，這可能是促使此類人群患糖尿病風(fēng)險(xiǎn)增高的原因[13]。熬夜、輪班等生活方式使內(nèi)部時(shí)鐘與環(huán)境時(shí)態(tài)之間失去同步，導(dǎo)致晝夜節(jié)律紊亂，打亂了體內(nèi)胰島素、瘦素、脂聯(lián)素、褪黑素分泌的固有節(jié)律，導(dǎo)致進(jìn)食行為改變、糖脂代謝改變以及體質(zhì)量增加，促使NAFLD、肥胖、2型糖尿病等代謝性疾病的發(fā)病率大大增加[14]?；A(chǔ)研究[15]亦發(fā)現(xiàn)，改變明暗周期(光照20 h，黑暗4 h)后夜間沙漠嚙齒動(dòng)物出現(xiàn)了肝組織結(jié)構(gòu)的改變和肝細(xì)胞代謝活性的下降，前者以廣泛分散的炎癥灶、白細(xì)胞浸潤、結(jié)締組織延伸為主，與Kupffer細(xì)胞激活趨化中性粒細(xì)胞有關(guān)；后者以高血糖、血脂波動(dòng)等代謝紊亂為主，與光照周期改變引起的PER2基因節(jié)律表達(dá)的破壞有關(guān)。與其他外周組織的晝夜節(jié)律相比，肝臟的晝夜節(jié)律更容易受持續(xù)光照的影響，持續(xù)光照明顯降低了肝臟中CLOCK、BMAL1、CRY1、PER1和大多數(shù)參與肝脂質(zhì)代謝的基因的節(jié)律性表達(dá)[16]。這些證據(jù)均表明，晝夜節(jié)律能夠影響肝臟的代謝活性。

2.1 晝夜節(jié)律基因參與脂質(zhì)代謝

肝臟是脂質(zhì)代謝的主要場所，通過調(diào)節(jié)脂蛋白的合成、脂質(zhì)的吸收和轉(zhuǎn)化、脂肪酸的氧化來參與脂質(zhì)代謝。全基因組基因表達(dá)研究[17]證實(shí)了肝臟多種生理活動(dòng)均受晝夜節(jié)律的調(diào)節(jié)，其中包括肝臟脂質(zhì)代謝。晝夜節(jié)律基因通過調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝過程中的限速酶和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)，從而維持脂代謝平衡，防止脂肪過多堆積。其中CLOCK、BMAL1、REV-ERB、ROR、PER、CRY等晝夜節(jié)律基因是脂質(zhì)代謝的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑。

2.1.1 CLOCK/BMAL1 在不同的動(dòng)物模型中，晝夜節(jié)律紊亂將導(dǎo)致脂質(zhì)代謝障礙。CLOCK或BMAL1基因突變小鼠會產(chǎn)生高甘油三酯血癥和高膽固醇血癥[18]，全身性敲除CLOCK基因的小鼠模型表現(xiàn)出飲食增加、高脂血癥和體質(zhì)量增加[19]。BMAL1在脂肪儲存、利用和脂肪細(xì)胞分化中起重要作用。全身性BMAL1敲除小鼠表現(xiàn)出葡萄糖耐受不良、低胰島素血癥、脂肪儲存減少、肝臟和肌肉中異位脂肪形成增加以及即使常規(guī)喂食也會引起肝脂肪變性[20]；肝臟特異性BMAL1敲除小鼠在禁食期間表現(xiàn)出低血糖、游離脂肪酸水平升高、肝甘油三酯增加等血脂異常[21]。脂肪細(xì)胞BMAL1特異性缺失導(dǎo)致小鼠肥胖、食物攝入的晝夜節(jié)律發(fā)生改變，血漿甘油三酯和葡萄糖水平的晝夜節(jié)律變化消失[22]。

2.1.2 REV-ERB/ROR REV-ERB和ROR基因是將生物鐘與脂質(zhì)代謝聯(lián)系起來的重要組成部分。REV-ERB和ROR已被證明與脂肪細(xì)胞的分化、脂肪形成和脂質(zhì)儲存有關(guān)[23-24]。REV-ERB和ROR分別作為轉(zhuǎn)錄抑制因子和激活因子，共同控制參與脂質(zhì)代謝的蛋白質(zhì)及靶基因的晝夜節(jié)律表達(dá)[25]。REV-ERB和ROR可以識別相同的DNA結(jié)合位點(diǎn)但執(zhí)行相反的調(diào)節(jié)功能[26]。全身雙敲除REV-ERBα和REV-ERBβ小鼠出現(xiàn)核心時(shí)鐘和脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的節(jié)律表達(dá)發(fā)生改變，出現(xiàn)高血糖、高脂血癥和肝脂肪變性[27]。相比之下，RORα及其配體可以誘導(dǎo)超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)2和谷胱甘肽過氧化酶(glutathione peroxidase,GPx)1的表達(dá)，減少肝臟的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，從而減輕非酒精性脂肪性肝炎[28]；此外，研究[29]發(fā)現(xiàn)RORα還可以增強(qiáng)肝臟Kupffer細(xì)胞的M2極化，通過分泌抗炎和免疫調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子IL-10來保護(hù)肝細(xì)胞免受損傷。

2.1.3 PER/CRY PER2除了與核心時(shí)鐘基因結(jié)合外，還可以通過抑制白色脂肪和肝臟中PPARα、PPARγ的轉(zhuǎn)錄來調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝[30]。PER3可以通過兩種方式調(diào)節(jié)脂肪形成：(1)通過調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞前體細(xì)胞的節(jié)律來調(diào)節(jié)體內(nèi)脂肪形成；(2)通過調(diào)節(jié)Krüppel樣因子的表達(dá)來參與脂肪形成，當(dāng)刪除PER3時(shí)脂肪形成節(jié)律喪失，脂肪生成增加以及肝臟發(fā)生脂肪變性[31]。

這些證據(jù)表明與脂質(zhì)代謝相關(guān)的晝夜節(jié)律基因的表達(dá)異?？梢哉T發(fā)宿主脂代謝節(jié)律喪失，從而促進(jìn)了肝臟脂肪沉積。

2.2 晝夜節(jié)律基因參與葡萄糖代謝 葡萄糖代謝是一個(gè)嚴(yán)格的調(diào)節(jié)過程，涉及胰腺產(chǎn)生胰高血糖素和胰島素、肝臟中的糖原分解和糖異生作用以及肌肉和脂肪組織在胰島素作用下從血液中攝取葡萄糖[32]。在哺乳動(dòng)物中，存在于各種組織和器官中大約80%的蛋白質(zhì)編碼基因在轉(zhuǎn)錄水平上顯示出晝夜節(jié)律振蕩。參與糖代謝過程的激素(如胰高血糖素、胰島素、瘦素等)的血漿水平顯示出晝夜節(jié)律振蕩[33]。

目前研究較多的與糖代謝密切相關(guān)的晝夜節(jié)律基因是BMAL1基因，其模型包括全身BMAL1基因敲除和外周組織特異性BMAL1基因敲除(表1)。全身BMAL1基因敲除小鼠不僅出現(xiàn)血脂紊亂、肝臟、肌肉、脂肪組織中脂質(zhì)沉積等脂代謝紊亂的表型，而且也觀察到糖代謝異常的現(xiàn)象，如葡萄糖耐量減低、胰島素分泌減少，以及胰島素抵抗和肥胖[34-35]。也有報(bào)道[36]顯示全身或者血管平滑肌BMAL1基因敲除小鼠出現(xiàn)了血壓、心率的晝夜節(jié)律紊亂，可能與血管重塑受損、血管損傷以及血管內(nèi)皮功能紊亂有關(guān)。

表1 不同部位晝夜節(jié)律基因BMAL1敲除或沉默對糖代謝的影響

胰腺特異性BMAL1基因敲除小鼠出現(xiàn)了胰島素分泌改變。由于胰島β細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶基因表達(dá)水平較低，SOD水平僅為肝臟的30%，過氧化氫酶(catalase,CAT)及GPx僅為肝臟的5%[37]，因此β細(xì)胞清除活性氧(reactive oxygen species,ROS)、抗氧化能力較弱，對氧化應(yīng)激損傷更敏感[38]。研究[39]顯示，抑制胰腺β細(xì)胞BMAL1基因表達(dá)后，核因子E2相關(guān)因子2(nuclear factor-E2 related factor 2, Nrf2)mRNA表達(dá)增加，CAT和GPx表達(dá)減少，提示抑制BMAL1基因表達(dá)會導(dǎo)致高水平的氧化應(yīng)激狀態(tài)，超出了β細(xì)胞的抗氧化能力，導(dǎo)致細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷。同時(shí)電鏡下觀察到抑制BMAL1表達(dá)后，β細(xì)胞表現(xiàn)出線粒體腫脹、線粒體嵴斷裂和消失，進(jìn)一步說明了BMAL1基因表達(dá)異常是通過氧化應(yīng)激途徑導(dǎo)致了β細(xì)胞功能損傷。另一項(xiàng)研究[38]發(fā)現(xiàn)，將小鼠胰腺β細(xì)胞BMAL1基因沉默后，去乙?；窼irt1基因表達(dá)減少，Sirt1在細(xì)胞凋亡中起重要的調(diào)節(jié)作用，主要通過組蛋白/非組蛋白去乙酰化影響基因轉(zhuǎn)錄，從而發(fā)揮抗氧化、減少細(xì)胞凋亡、增加細(xì)胞存活率的作用。提示BMAL1基因主要通過調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激通路影響胰島β細(xì)胞的功能和凋亡。

BMAL1不僅在胰腺中，而且對肝臟、骨骼肌、脂肪組織等外周器官的糖代謝有重要作用。肝臟BMAL1敲除小鼠在禁食期間表現(xiàn)出低血糖，參與肝臟糖代謝基因的晝夜節(jié)律表達(dá)改變，血液中葡萄糖清除受損[40]。小鼠骨骼肌BMAL1特異性缺失造成葡萄糖攝取減少、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)降低，由于參與骨骼肌糖酵解的關(guān)鍵酶活性降低，導(dǎo)致肌肉組織葡萄糖代謝受損，使小鼠體內(nèi)葡萄糖穩(wěn)態(tài)受到干擾，發(fā)生葡萄糖耐量降低或胰島素抵抗[41]。同樣小鼠脂肪組織BMAL1特異性缺失導(dǎo)致肥胖、食物攝入的晝夜節(jié)律改變，血漿甘油三酯、葡萄糖水平的晝夜節(jié)律變化消失[42]，提示脂肪組織BMAL1基因與脂質(zhì)代謝、脂肪酸氧化和能量穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)有關(guān)。這些證據(jù)表明，外周生物鐘在葡萄糖的調(diào)節(jié)中同樣起著重要作用。

2.3 晝夜節(jié)律影響腸道菌群 研究[43]表明腸道菌群的改變參與了NAFLD的發(fā)生。Snijder等[44]首次在藍(lán)藻菌和真菌中發(fā)現(xiàn)其代謝水平呈現(xiàn)晝夜節(jié)律性，與光照時(shí)間有關(guān)。隨后的一系列實(shí)驗(yàn)證實(shí)了腸道菌群也存在晝夜變化。這種晝夜節(jié)律變化主要表現(xiàn)在腸道菌群的組成與豐度、功能活動(dòng)兩方面。在組成與豐度方面，通過將小鼠置于模擬的人工晝夜環(huán)境中(12 h光照、12 h黑暗)，在ZT0、ZT6、ZT12、ZT18時(shí)分別進(jìn)行糞便取樣以及細(xì)菌測序，結(jié)果顯示15%的菌群在豐度方面呈現(xiàn)出周期性變化，大多屬于梭菌目、乳桿菌目以及擬桿菌目[45]。其中擬桿菌門的總數(shù)在23∶00和11∶00波動(dòng)較大，其他時(shí)間波動(dòng)較小，而厚壁菌門的總數(shù)晝夜波動(dòng)較小，由此推測擬桿菌門數(shù)量的晝夜波動(dòng)是構(gòu)成腸道菌群晝夜節(jié)律的主要驅(qū)動(dòng)力[46]。在功能活動(dòng)方面，由于腸道菌群在數(shù)量上呈現(xiàn)晝夜波動(dòng)，其也導(dǎo)致腸道菌群的功能隨之波動(dòng)，從而適應(yīng)宿主的生理代謝。嚙齒類動(dòng)物在夜間進(jìn)食期間，宿主的能量代謝等活動(dòng)較活躍，同時(shí)伴隨腸道菌群中的厚壁菌門、擬桿菌門數(shù)量增多；在白天休眠時(shí)期，宿主的解毒、胃腸蠕動(dòng)等活動(dòng)較活躍，同時(shí)伴隨腸道菌群中的乳桿菌數(shù)量增多[45]。此外，腸道黏膜通透性也受到晝夜節(jié)律基因的控制，可能與緊密連接結(jié)構(gòu)中的閉合蛋白和緊密連接蛋白1的晝夜節(jié)律性表達(dá)有關(guān)[47]。

腸道菌群的節(jié)律性變化是由宿主驅(qū)動(dòng)的，宿主進(jìn)食-禁食節(jié)律可調(diào)節(jié)腸道微生物的功能，因此，明暗交替是哺乳動(dòng)物中樞生物鐘的授時(shí)因子，進(jìn)食時(shí)間是腸道菌群生物鐘的授時(shí)因子。PER1/2雙敲除小鼠表現(xiàn)出腸道菌群和其部分功能的晝夜節(jié)律明顯改變,但是給予長期規(guī)律性飲食后發(fā)現(xiàn)腸道菌群的部分節(jié)律性得到了恢復(fù)[48]，說明改變宿主飲食的節(jié)律性可以恢復(fù)腸道菌群的節(jié)律性波動(dòng)，提示對于因腸道菌群失調(diào)引起的肥胖、2型糖尿病、代謝綜合征、脂肪肝等代謝疾病的治療可以從調(diào)整節(jié)奏性飲食的角度思考。

2.4 晝夜節(jié)律基因參與氧化應(yīng)激 氧化代謝是所有需氧生物的正常生理過程，也是ROS的主要來源。生理?xiàng)l件下多余的ROS被細(xì)胞抗氧化系統(tǒng)清除。當(dāng)氧化分子(如超氧化物和過氧化氫)的產(chǎn)生超過抗氧化分子(如CAT、GPx、SOD、NAPDH)的清除能力時(shí)，就會發(fā)生氧化應(yīng)激。ROS清除系統(tǒng)對于代謝細(xì)胞的功能和存活至關(guān)重要，過量的ROS會引起脂質(zhì)和蛋白質(zhì)的過氧化以及蛋白質(zhì)和核酸的氧化修飾，從而引起代謝和心血管并發(fā)癥[49]。氧化應(yīng)激可通過刺激脂肪前細(xì)胞增殖、脂肪形成和慢性炎癥而引起脂肪組織功能障礙，從而導(dǎo)致肥胖[50]。同樣氧化應(yīng)激在NAFLD的發(fā)生、發(fā)展中起關(guān)鍵作用，ROS引起脂質(zhì)過氧化，繼而導(dǎo)致炎癥反應(yīng)和肝星狀細(xì)胞的激活，促進(jìn)纖維化的發(fā)生[2]。

在晝夜周期中，脂質(zhì)過氧化和蛋白質(zhì)氧化水平在關(guān)鍵的代謝器官或組織(如肝臟和肌肉)中表現(xiàn)出晝夜節(jié)律性。許多具有抗氧化作用的酶(如GSH-Px、SOD)以及褪黑素等在其表達(dá)或活性水平上具有晝夜節(jié)律性，因此氧化應(yīng)激與生物鐘有著先天的聯(lián)系[51]。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞和小鼠肝臟中觀察到H2O2水平的晝夜節(jié)律振蕩，并可以通過半胱氨酸氧化直接調(diào)節(jié)CLOCK晝夜節(jié)律功能[52]。煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)不僅自身具有晝夜節(jié)律振蕩，而且是能量代謝和晝夜節(jié)律控制之間的重要環(huán)節(jié)[53]。CLOCK:BMAL1異二聚體的結(jié)合活性取決于細(xì)胞的氧化還原狀態(tài)，即NADH/NAD和NADPH/NADP比值，而NADPH/NADP比值以晝夜節(jié)律振蕩[54]。磷酸戊糖途徑可以通過NADPH代謝來調(diào)節(jié)肝臟生物鐘。抑制磷酸戊糖途徑可以增加氧化應(yīng)激、延長晝夜節(jié)律、激活Nrf2通路、增加CLOCK：BMAL1異二聚體DNA的結(jié)合并改變鐘控基因的表達(dá)[55]。以上證據(jù)支持氧化應(yīng)激和晝夜節(jié)律相互關(guān)聯(lián)的假設(shè)，晝夜節(jié)律調(diào)節(jié)細(xì)胞氧化還原功能的節(jié)律性振蕩，而細(xì)胞中氧化還原狀態(tài)的變化也會影響生物鐘基因。

2.5 晝夜節(jié)律基因參與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 蛋白質(zhì)的折疊和組裝主要在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中完成，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)通過精細(xì)的機(jī)制保證折疊正確的蛋白質(zhì)輸出并發(fā)揮其功能，但是對于折疊不正確的蛋白質(zhì)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在分子伴侶的配合下將其組裝成天然復(fù)合物進(jìn)行降解。當(dāng)細(xì)胞或環(huán)境應(yīng)激源破壞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能時(shí)，未折疊的或者折疊錯(cuò)誤的蛋白質(zhì)就會在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中聚集，這種情況稱為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。機(jī)體為了應(yīng)對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，細(xì)胞激活一系列復(fù)雜而協(xié)調(diào)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，稱為未折疊蛋白反應(yīng)(unfolded protein reaction, UPR)[56]。UPR是一種生存反應(yīng)，可以修飾轉(zhuǎn)錄和翻譯程序以恢復(fù)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)穩(wěn)態(tài)。

UPR途徑主要由3種細(xì)胞應(yīng)激傳感器啟動(dòng)：跨膜激酶/核酸內(nèi)切酶1、雙鏈RNA活化蛋白激酶樣激酶、活化轉(zhuǎn)錄因子6。UPR在維持肝脂質(zhì)穩(wěn)態(tài)方面起著關(guān)鍵作用，在應(yīng)激條件下，UPR的破壞會導(dǎo)致肝脂肪變性和非酒精性脂肪性肝炎。敲除或者抑制小鼠肝臟中跨膜激酶/核酸內(nèi)切酶1或活化轉(zhuǎn)錄因子6，會導(dǎo)致在急性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激或高脂飲食條件下發(fā)生肝脂肪變性[57]。此外，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄激活因子XBP1缺乏時(shí)也會導(dǎo)致肝脂質(zhì)蓄積[58]。以上證據(jù)表明肝臟UPR途徑可以防止肝脂質(zhì)沉積。

參與肝臟代謝的許多酶位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上，晝夜節(jié)律會影響肝臟的脂質(zhì)代謝和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位酶。晝夜節(jié)律紊亂導(dǎo)致XBP1介導(dǎo)的UPR激活的節(jié)律振蕩，并引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位酶的失調(diào)，導(dǎo)致固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子的異常激活[59]，促使脂質(zhì)生成增加，誘發(fā)肝臟脂肪變。

3 小結(jié)

綜上所述，晝夜節(jié)律基因參與了NAFLD發(fā)病過程中的多種機(jī)制，目前晝夜節(jié)律相關(guān)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ鸵匀砘蚯贸秊橹鳎闻K特異性晝夜節(jié)律基因敲除的研究較少，因此需要進(jìn)一步開展肝臟特異性基因敲除的基礎(chǔ)研究，而且有必要開發(fā)一種具有人類輪班工作特征的標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物模型，以更好的理解晝夜節(jié)律基因在外周器官中的作用機(jī)制，繼續(xù)闡述晝夜節(jié)律基因與NAFLD發(fā)病的分子途徑和機(jī)理，為臨床治療提供數(shù)據(jù)。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。

作者貢獻(xiàn)聲明：趙晨露負(fù)責(zé)撰寫論文；趙文霞負(fù)責(zé)指導(dǎo)撰寫文章、修改論文。