蓋小君 王曉玲 趙夢(mèng)姣 李春蕾 柴世慶 陳靜

摘 要：為評(píng)估煙臺(tái)市白羽肉種雞祖代場(chǎng)禽白血病凈化效果，2020年11～12月，煙臺(tái)市動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心對(duì)7個(gè)祖代場(chǎng)、完成禽白血病凈化的6個(gè)父母代場(chǎng)進(jìn)行資料審查，并采集了1 350個(gè)種蛋、1 500份血清樣品利用酶聯(lián)免疫吸附方法進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示：祖代場(chǎng)、父母代場(chǎng)資料審查分值分別為92、89分，p27抗原個(gè)體陽(yáng)性率均為0%。此次評(píng)估，為煙臺(tái)地區(qū)白羽肉雞種雞場(chǎng)申報(bào)禽白血病的凈化創(chuàng)建場(chǎng)奠定了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：煙臺(tái)市;禽白血病;凈化;效果評(píng)估

中圖分類號(hào)：S858.31 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B文章編號(hào)：1673-1085（2021）8-0012-04

禽白血病是由禽白血病病毒（Avian leucosis virus，ALV）引起的禽類多種腫瘤性疾病的統(tǒng)稱，是二類動(dòng)物疫病，分為A～K 11個(gè)亞群，其中J亞型發(fā)病率最高。目前該病尚未有效疫苗或藥物防治，控制該病的主要方法是對(duì)雞群持續(xù)進(jìn)行ALV檢測(cè)，淘汰帶毒種雞，以達(dá)到純化雞群的目的^[1]。根據(jù)《動(dòng)物疫病凈化示范區(qū)評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)（試行）（2019版）》中禽白血病凈化示范區(qū)評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)中的規(guī)定，種禽場(chǎng)評(píng)估方法為禽白血病病原學(xué)檢測(cè)為陰性，樣品類型為種蛋，檢測(cè)方法為p27 抗原酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)^[2]。

為了扎實(shí)推進(jìn)煙臺(tái)市白羽肉雞主要疫病凈化示范區(qū)建設(shè)項(xiàng)目，煙臺(tái)市制定了2020年白羽肉雞禽白血病凈化示范區(qū)項(xiàng)目實(shí)施方案，要求2020完成年祖代種雞場(chǎng)禽白血病凈化評(píng)估工作。對(duì)此，本文按照《關(guān)于組織開(kāi)展 2020年省級(jí)種畜禽場(chǎng)疫病凈化場(chǎng)評(píng)估驗(yàn)收的通知》^[3]對(duì)轄區(qū)內(nèi)7個(gè)祖代雞場(chǎng)、6個(gè)完成禽白血病凈化的父母代場(chǎng)進(jìn)行資料審查，抽檢樣品，開(kāi)展禽白血病凈化效果評(píng)估監(jiān)測(cè)，同時(shí)為種雞場(chǎng)申報(bào)禽白血病凈化創(chuàng)建場(chǎng)奠定了基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 資料審查

按照山東省畜牧獸醫(yī)局《關(guān)于組織開(kāi)展 2020年省級(jí)種畜禽場(chǎng)疫病凈化場(chǎng)評(píng)估驗(yàn)收的通知》對(duì)祖代場(chǎng)和完成凈化的父母代場(chǎng)，進(jìn)行資料審查。

1.2 實(shí)驗(yàn)室抽檢

1.2.1 樣品采集及處理 本研究抽取轄區(qū)內(nèi)7個(gè)祖代場(chǎng)，6個(gè)父母代場(chǎng)作為審查對(duì)象。血清樣品按照95%置信區(qū)間，預(yù)期合格率在90%，相對(duì)誤差10%采集樣品，每個(gè)場(chǎng)點(diǎn)采集150份血液，按照3000? r/min離心 5 min，上清液1.5 mL滅菌離心管中，冷凍保存。種蛋按照95%置信區(qū)間、2%感染率采集樣品，每個(gè)場(chǎng)點(diǎn)采集種蛋150份，要求新鮮，取蛋清約1 mL，放于1.5 mL滅菌離心管中，冷凍保存?zhèn)溆谩Ｑ迮c種蛋樣品應(yīng)來(lái)自于同一棟舍。實(shí)驗(yàn)共采集血清樣品1 500份、種蛋1 350個(gè)。

1.2.2 主要試劑和儀器 試劑分別為：禽白血病J亞群抗體ELISA試劑盒（批號(hào)：HR730，購(gòu)自美國(guó)IDEXX公司）;禽白血病p27抗原ELISA試劑盒（批號(hào)：HR786，購(gòu)自美國(guó)IDEXX公司）。嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)疑似樣品再進(jìn)行雙孔復(fù)檢。

儀器主要有：96孔全自動(dòng)洗板機(jī)（AquaMax2000型，美國(guó)MD公司）;全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀（Spectra Max190型，美國(guó)MD公司）。

2 結(jié)果

2.1 資料審核

以《種雞場(chǎng)主要疫病凈化現(xiàn)場(chǎng)審查評(píng)分表》為參考，按照禽白血病凈化效果評(píng)價(jià)指標(biāo)（表1），對(duì)祖代場(chǎng)、父母代場(chǎng)禽白血病凈化資料進(jìn)行評(píng)分，詳見(jiàn)表2。

2.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)情況

檢測(cè)血清樣品1 500份，祖代5場(chǎng)、7場(chǎng) ALV-J亞群陽(yáng)性率分別為0.67%、5.3%，父母代8場(chǎng) ALV-J亞群陽(yáng)性率為0.67%、其他場(chǎng)區(qū)未檢出 ALV-J亞群陽(yáng)性;檢測(cè)雞蛋樣品數(shù)1 350個(gè)，所有場(chǎng)區(qū)未檢出ALV-p27抗原陽(yáng)性，陽(yáng)性率為0%，詳見(jiàn)表3。

3 討論

國(guó)外白羽育種公司相繼在2004年前完成了禽白血病的凈化，從煙臺(tái)益生種畜禽有限公司對(duì)國(guó)外引種曾祖代、祖代雞群監(jiān)控檢測(cè)數(shù)據(jù)來(lái)看，禽白血病處于凈化狀態(tài)。本文對(duì)轄區(qū)內(nèi)祖代場(chǎng)、部分父母代場(chǎng)，按照《種雞場(chǎng)主要疫病凈化現(xiàn)場(chǎng)審查評(píng)分表》對(duì)禽白血病凈化效果12個(gè)一級(jí)指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)分，祖代場(chǎng)、父母代場(chǎng)分值為92、89分，p27抗原陽(yáng)性率均為0，據(jù)《動(dòng)物疫病凈化示范區(qū)評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)（試行）（2019版）》中禽白血病凈化示范區(qū)評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)中的規(guī)定，種蛋p27抗原陽(yáng)性率為0可判定為禽白血病陰性場(chǎng)，表明2個(gè)祖代場(chǎng)、6個(gè)父母代場(chǎng)已經(jīng)完成禽白血病凈化。

生物安全管理工作對(duì)于養(yǎng)殖場(chǎng)來(lái)說(shuō)，是一種工作態(tài)度，此次資料審查按照《種雞場(chǎng)主要疫病凈化現(xiàn)場(chǎng)審查評(píng)分表》對(duì)禽白血病凈化效果12個(gè)一級(jí)指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)分，祖代場(chǎng)、父母代場(chǎng)分值為92、89分，扣分點(diǎn)主要集中在缺少水質(zhì)檢測(cè)報(bào)告、消毒液配制和使用記錄、消毒記錄不完整等細(xì)節(jié)管理工作。與企業(yè)溝通，要求企業(yè)建立了完善的生物安全管理體系，按照“管住車、消好毒、用好料、看好門、凈環(huán)境、關(guān)注鄰、早診斷、盯住人”的二十四字方針，在工作中不斷深化生物安全管理體系運(yùn)行及監(jiān)督。

祖代1場(chǎng)、2場(chǎng)、3場(chǎng)、5場(chǎng)雞群尚未開(kāi)產(chǎn)，每個(gè)場(chǎng)點(diǎn)各采集150份血清樣品進(jìn)行J亞群抗體檢測(cè)，祖代5場(chǎng)J亞群抗體陽(yáng)性率為0.67%，低于1%，可能是試劑盒檢測(cè)過(guò)程中存在假陽(yáng)性的原因。祖代4場(chǎng)、6場(chǎng)、7場(chǎng)同時(shí)采集血清和種蛋，檢測(cè)J亞群抗體和p27抗原，4場(chǎng)、6場(chǎng)抗體和抗原陽(yáng)性率均為0;7場(chǎng)J亞群陽(yáng)性率為5.3%，p27抗原陽(yáng)性率為0，鑒于祖代7場(chǎng)J亞群陽(yáng)性率較高，建議對(duì)7場(chǎng)進(jìn)行持續(xù)檢測(cè)。父母代8場(chǎng)、10場(chǎng)、12場(chǎng)同時(shí)采集血清和種蛋，檢測(cè)J亞群抗體和p27抗原，8場(chǎng)J亞群抗體陽(yáng)性率為0.67%，低于1%，p27抗原陽(yáng)性率為0;10場(chǎng)、12場(chǎng)抗體和抗原陽(yáng)性率均為0。對(duì)于父母代9場(chǎng)、11場(chǎng)、13場(chǎng)因?yàn)榉N雞周齡較大，只采集了種蛋，p27抗原陽(yáng)性率均為0。以上數(shù)據(jù)表明煙臺(tái)市轄區(qū)內(nèi)2個(gè)祖代場(chǎng)、6個(gè)父母代場(chǎng)已經(jīng)完成禽白血病凈化，對(duì)于未開(kāi)產(chǎn)的雞群要求企業(yè)開(kāi)展持續(xù)檢測(cè)工作。

4 結(jié)論

本文對(duì)煙臺(tái)轄區(qū)7個(gè)祖代場(chǎng)、完成禽白血病凈化的6個(gè)父母代場(chǎng)進(jìn)行資料審查，并采集了

1 350 個(gè)種蛋、1 500份血清樣品利用酶聯(lián)免疫吸附方法進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)祖代場(chǎng)、父母代場(chǎng)資料審查總分均不低于85分、p27抗原個(gè)體陽(yáng)性率分別為0%。此次評(píng)估，為煙臺(tái)地區(qū)白羽肉雞種雞場(chǎng)申報(bào)禽白血病的凈化創(chuàng)建場(chǎng)奠定了基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 俞燕，徐步，范建華，等.地方雞種保種核心群禽白血病凈化研究[J].中國(guó)家禽，2019，41（19）：16- 22.

[2] 中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心.關(guān)于印發(fā)《動(dòng)物疫病凈化示范區(qū)評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)（試行）（2019版）》的通知：疫控（監(jiān)）〔2019〕6號(hào)[A].北京：中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，2019.

[3] 山東省畜牧獸醫(yī)局.關(guān)于組織開(kāi)展 2020 年省級(jí)種畜禽場(chǎng)疫病凈化場(chǎng)評(píng)估驗(yàn)收的通知：魯牧疫控發(fā)〔2020〕12 號(hào)[A].濟(jì)南：山東省畜牧獸醫(yī)局，2020.

Evaluation of the purification effect of avian leukemia in white feather broiler breeders in Yantai City in 2020

GAI Xiaojun1， WANG Xiaoling1， ZHAO Mengjiao1， LI Chunlei1， CHAI Shiqing1， CHEN Jing2*

（Yantai Animal Disease Prevention and Control Center， Yantai， 264003? China;

2. Shandong Animal Disease Prevention and Control Center， Jinan， 250000? China ）

Abstract： In order to evaluate the purification effect of avian leukemia in the ancestral farm of white feather broiler breeders in Yantai， from November to December 2020， Yantai Animal Disease Prevention and Control Center conducted data on 7 ancestral farms and 6 parent farms that completed the purification of avian leukemia Examined， and collected 1，350 breeding eggs， and 1，500 serum samples were tested by enzyme-linked immunosorbent method. The results showed that the data review scores of the ancestral field and the parental field were 92 and 89 points， respectively， and the positive rate of p27 antigen individuals was 0%. This assessment laid the foundation for the white feather broiler breeder farms in Yantai area to declare the purification and establishment of avian leukemia farms.

Keywords： Yantai City; Avian Leukemia; Purification; Effect Evaluation

收稿日期：2021-07-25

*基金項(xiàng)目：國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目-肉雞養(yǎng)殖廢棄物資源化利用技術(shù)集成與示范，項(xiàng)目編號(hào)：2018YFD0501405;山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系家禽創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)項(xiàng)目，種畜禽場(chǎng)疫病凈化項(xiàng)目（SDAIT-11-13），山東省煙臺(tái)市白羽肉雞主要疫病區(qū)域凈化示范區(qū)建設(shè)項(xiàng)目。

作者簡(jiǎn)介：蓋小君（1973.09-），男，碩士，山東萊陽(yáng)人，獸醫(yī)師，主要從事動(dòng)物疫病防控工作，E-mail：249386729@qqcom。

**通訊作者：陳靜，女，博士，研究員，主要從事動(dòng)物疫病檢測(cè)及防控工作，E-mail：1752058646@qq.com。