張未仲

摘 要：化學(xué)藥劑防治果樹害蟲易引發(fā)農(nóng)藥殘留、環(huán)境污染、害蟲抗藥性等問題。白僵菌作為優(yōu)良的生物制劑，具有殺蟲譜廣、無殘留等特性，已廣泛應(yīng)用于農(nóng)林害蟲防治方面，但在果樹害蟲防治方面應(yīng)用相對(duì)較少。綜述了白僵菌在果樹蟲害防治中的施用對(duì)象、防治措施、控制機(jī)理、應(yīng)用現(xiàn)狀等方面的進(jìn)展，指出了白僵菌在實(shí)際應(yīng)用中的優(yōu)缺點(diǎn)，為今后的研究及施用提供參考。

關(guān)鍵詞：白僵菌;果樹害蟲;生物防治;生物農(nóng)藥

Abstract：The prevention and control of fruit tree pest by chemical agents can easily cause problems such as pesticide residues， environmental pollution， and pest resistance. Beauveria bassiana is an excellent biological agent with broad insecticidal spectrum and no residue. It has been widely used in pest control of agriculture and forestry，however， there are few domestic applications in fruit tree pest control. The application object， control measures， control mechanism， and application status of Beauveria bassiana in fruit tree pest control were reviewed， the advantages and disadvantages of Beauveria bassiana were pointed out in practical applications， so as to provid reference for future research and application.

Keywords：Beauveria bassiana; fruit tree pest; biological control; biopesticide

中國自然條件優(yōu)越，適宜果樹生長，栽培果樹樹種占世界主栽果樹樹種類型的82%。栽培面積和果品產(chǎn)量皆居世界首位[1]。在果樹栽培過程中，有多種病蟲害影響果樹的生長發(fā)育及果實(shí)品質(zhì)。為了防治病蟲害，在果樹生長期內(nèi)要常年施用多種殺蟲劑與殺菌劑。農(nóng)藥的大量施用造成了環(huán)境污染、農(nóng)藥殘留及害蟲抗藥性等多種弊端。為了降低化學(xué)藥劑對(duì)環(huán)境及果品的危害，探索新型綠色的殺蟲、殺菌農(nóng)藥是未來植保工作的重點(diǎn)所在。

綠色農(nóng)藥是在綠色化學(xué)的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的，主要包括生物農(nóng)藥、化學(xué)合成類綠色農(nóng)藥等[2]。其中生物農(nóng)藥是指利用生物活體或代謝產(chǎn)物對(duì)有害生物進(jìn)行防治的一類制劑[3]。生物農(nóng)藥按其來源可分為微生物源、植物源、動(dòng)物源、轉(zhuǎn)基因作物和基因工程農(nóng)藥四大類[4]。生物農(nóng)藥對(duì)環(huán)境友好，天然無污染;靶標(biāo)針對(duì)性強(qiáng)，無殘留;不產(chǎn)生抗性，可持續(xù)控制，有良好的應(yīng)用前景。利用生物制劑防治病蟲害是未來果園用藥的主要趨勢(shì)。

微生物源農(nóng)藥由于具備人為控制下規(guī)?；囵B(yǎng)，不破壞野生環(huán)境、成本低廉等優(yōu)點(diǎn)，將成為生物農(nóng)藥的主體。白僵菌是最常見的昆蟲病原真菌，在分類上屬半知菌亞門，絲孢綱，叢梗孢目，白僵菌屬。球孢白僵菌Beauveria bassiana （Bals.-Criv.）Vuill.是一類廣譜性真菌，研究表明此菌能侵染15個(gè)目149個(gè)科的700余種昆蟲及部分蜱螨類[5]，是自然界昆蟲種群的重要限制因子。被認(rèn)為是最具開發(fā)潛力的一種昆蟲病原真菌，在多種害蟲的防治中取得了顯著的經(jīng)濟(jì)、社會(huì)和生態(tài)效益[6-8]。

1 白僵菌防治果樹害蟲種類

通過中國知網(wǎng)數(shù)據(jù)庫cnki文獻(xiàn)搜索可知，截至2020年12月31日，以“白僵菌”為主題搜索有8226條結(jié)果，以“白僵菌，林業(yè)”為主題進(jìn)行搜索，得到268條結(jié)果，“白僵菌，作物”為主題有160條結(jié)果，而“白僵菌，果樹”只有10條結(jié)果。從文章發(fā)表量可以看出白僵菌主要用來防治林業(yè)害蟲和作物害蟲，在果樹害蟲中應(yīng)用仍舊相對(duì)較少。通過查詢白僵菌與果樹害蟲，將查詢結(jié)果分類匯總。并根據(jù)已發(fā)表的相關(guān)文獻(xiàn)對(duì)白僵菌目前的果樹主要的防治對(duì)象，總結(jié)歸納，結(jié)果如表1所示。

從表1可知，白僵菌防治害蟲種類主要涉及鞘翅目、鱗翅目、半翅目等害蟲。防治地區(qū)覆蓋全國中西部大部分地區(qū)，在蘋果、梨等喬化果樹以及藍(lán)莓、沙棘等灌木果樹上均可施用。防治鞘翅目害蟲主要是針對(duì)其幼蟲即蠐螬進(jìn)行防治，它們生活在土壤中，對(duì)果樹根部危害嚴(yán)重，是地下害蟲主要的組成部分。其余半翅目、鱗翅目害蟲主要包括蚜蟲、木虱、蝽、食心蟲等主要危害葉片、花果及莖桿。

2 影響白僵菌防效的常見因素

2.1 孢子濃度與蟲體體型

白僵菌藥效通常通過室內(nèi)毒力與田間藥效兩個(gè)方面進(jìn)行檢測(cè)評(píng)價(jià)。室內(nèi)毒力檢測(cè)實(shí)驗(yàn)條件易于控制，害蟲致病性主要取決于孢子濃度、害蟲種類。研究表明桃蚜、桃小食心蟲在室內(nèi)高濃度條件下，死亡率均能達(dá)到90%[9-10]，且死亡率與孢子濃度呈正相關(guān)。除孢子濃度外，昆蟲的體型大小也會(huì)影響到防效。如鞘翅目幼蟲蠐螬死亡率要達(dá)到90%以上，孢子濃度需達(dá)到9×108個(gè)/mL[11]，對(duì)于柑橘木虱、蚜蟲等體型較小的害蟲，即使孢子濃度較小，也能取得較高的死亡率[12]。

2.2 環(huán)境因素

白僵菌田間藥效受到多種條件的制約。溫度、濕度以及紫外線的照射均能影響白僵菌的藥效，因此室外的害蟲死亡率往往低于室內(nèi)。蘇梅等人利用白僵菌進(jìn)行沙棘木蠹蛾幼蟲室內(nèi)接種致死率高達(dá)100%，野外接種致死率達(dá)11.5%～50%[13]，寄生率最高為67.8%[14]。蠐螬類害蟲防治效果較差，但是蚜蟲等害蟲防效較好。

2.3 施用方式

在生產(chǎn)中，針對(duì)不同的果樹害蟲應(yīng)采用合適的施用方式、選擇合適的施用時(shí)間才能取得理想的效果。常用的方法有噴菌法、噴粉法、活蟲傳病法或撒原菌法等多種方式。在農(nóng)藥施用時(shí)，可以與農(nóng)藥混配提高防效。雖然在上世紀(jì)90年代已經(jīng)對(duì)白僵菌與有機(jī)磷類殺蟲劑的混用效果進(jìn)行了研究[15]，但有機(jī)磷類農(nóng)藥在果園已經(jīng)大部分禁用。因此應(yīng)開展一些新型低毒、低殘留、高效化學(xué)農(nóng)藥與白僵菌相容性研究，可以保證菌劑在田間充分發(fā)揮殺蟲作用，避免與不相容的化學(xué)農(nóng)藥品種接觸，為合理應(yīng)用白僵菌提供科學(xué)依據(jù)。

2.4 害蟲習(xí)性

利用害蟲的生活習(xí)性，在合適的時(shí)期噴施藥劑能夠提高藥劑利用率，節(jié)約成本，增大施用效果。如根據(jù)桃小食心蟲樹下越冬的習(xí)性，在越冬幼蟲出土始期和盛期兩個(gè)時(shí)期用白僵菌處理地面對(duì)桃小食心蟲的防治效果非常顯著，與地面不防治相比，蟲果率與落果率均減少80%以上[16]。目前，殺滅害蟲的主要時(shí)期多集中在幼蟲、蛹等活動(dòng)能力小的發(fā)育階段。

3 白僵菌防治果樹害蟲機(jī)理

球抱白僵菌侵染昆蟲主要有兩條途徑：一條是從昆蟲的體壁組織等外部途徑侵入;另一條是通過消化道、呼吸道等內(nèi)部途徑侵入[17]。球抱白僵菌致病機(jī)理主要集中于菌絲穿透昆蟲表皮進(jìn)入寄主體內(nèi)這一過程的研究。由于昆蟲體壁的主要組分是蛋白質(zhì)、幾丁質(zhì)、脂類等物質(zhì)，因此菌絲的入侵過程必然涉及相應(yīng)降解酶的釋放，各種酶類中，蛋白酶、幾丁質(zhì)酶是研究的重點(diǎn)[18]。各種酶的活性與毒力有著密切的相關(guān)性。不同菌株間酶活性差異較大，可以對(duì)其酶活性強(qiáng)的菌株結(jié)合毒力測(cè)定結(jié)果分析，篩選出高毒力菌株。

對(duì)于白僵菌對(duì)宿主的致死機(jī)制沒有形成一致的觀點(diǎn)。一般認(rèn)為菌絲生長造成組織細(xì)胞的機(jī)械破壞，同時(shí)菌絲在生長過程中的代謝毒素使昆蟲血液的理化性質(zhì)發(fā)生變化，從而使昆蟲的代謝機(jī)能發(fā)生改變，最終導(dǎo)致死亡[19]。也有些學(xué)者認(rèn)為，肌肉、脂肪體等的受損是昆蟲死亡的主要原因[20]。目前對(duì)球孢白僵菌的致病、致死基因研究較少，在不同侵染階段均涉及多種基因的參與，不同基因在不同程度上影響著真菌的發(fā)育及致病。但目前大多數(shù)研究僅對(duì)基因功能進(jìn)行了簡(jiǎn)單研究，并未對(duì)其致病機(jī)理進(jìn)行完整的闡釋。因此，借助不斷更新的研究技術(shù)，研究球孢白僵菌對(duì)昆蟲作用的分子機(jī)制，顯得尤為必要。

4 問題與展望

1879年，俄國學(xué)者M(jìn)etchnikoff利用金龜子綠僵菌防治澳國金龜子（Anisoplia austriaca）的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)，揭開了病原真菌防治蠐螬的序幕。但直到20世紀(jì)50年代，才被開發(fā)應(yīng)用到生產(chǎn)上。目前已廣泛開展了室內(nèi)、田間的對(duì)多種昆蟲的防治研究，均取得了很好的效果，為推廣利用白僵菌對(duì)昆蟲的微生物學(xué)防治提供了理論依據(jù)。雖然微生物源殺菌劑有諸多的優(yōu)點(diǎn)，但是在實(shí)踐中，仍有不少問題亟待解決。

4.1 殺蟲譜較窄，菌株毒力退化

生產(chǎn)中一種果樹通常會(huì)同時(shí)感染多種蟲害，而多數(shù)生物農(nóng)藥專一性較強(qiáng)，殺蟲譜較窄，防治效果遠(yuǎn)低于常規(guī)化學(xué)農(nóng)藥，因而要想大力發(fā)展生物農(nóng)藥，就必須拓寬生物農(nóng)藥的殺蟲范圍。菌種資源主要來源于自然資源直接篩選的菌株，在轉(zhuǎn)接培養(yǎng)過程中，菌株退化、毒力降低、防效不穩(wěn)定等問題已被認(rèn)識(shí)，但原因不是十分清楚，因此有待使用新的選育技術(shù)，選育出優(yōu)良生產(chǎn)菌株，才能保持較長的穩(wěn)定性。

4.2 殺蟲周期較長

生物農(nóng)藥殺蟲周期一般是1～2周，有時(shí)長達(dá)1～2個(gè)月，遠(yuǎn)高于化學(xué)農(nóng)藥。白僵菌防效慢的特點(diǎn)明顯不適合于害蟲大發(fā)生時(shí)的應(yīng)急性防治。受防蟲速度所限，生物藥劑的大面積推廣工作仍需進(jìn)一步加強(qiáng)。

4.3 殺蟲毒力評(píng)價(jià)不全面

白僵菌對(duì)害蟲的毒力通常以不同孢子濃度的殺蟲率為指標(biāo)。劉銀泉等研究蚜蟲過程中發(fā)現(xiàn)，桃蚜成蟲在感菌早期生殖率并無顯著下降。而且已感染菌的蟲體仍具有生殖能力，其子代再感染率極低[21]。蚜蟲生育期短，繁殖率高，種群增長迅速，殺滅的蚜蟲數(shù)量很快可以得到補(bǔ)充。因此要研究白僵菌對(duì)蚜蟲這類種群增長較快的害蟲的防效，還必須考慮蚜蟲生殖力和種群增長潛能，才能對(duì)其控制種群增長潛力做出合理推測(cè)。同時(shí)需要考慮多種環(huán)境因素、致死時(shí)間和致死濃度問題，才能正確評(píng)價(jià)菌株的應(yīng)用潛力。

4.4 生物農(nóng)藥的安全性有待考慮

生物農(nóng)藥在殺滅害蟲的同時(shí)，是否對(duì)天敵造成影響也是必須要研究的課題。朱虹等發(fā)現(xiàn)孢子濃度下對(duì)兩種天敵成蟲羽化率和繁殖力的影響極小，但也同時(shí)指出，昆蟲病原真菌對(duì)天敵昆蟲的致病性是存在的[22]。此外并非所有的生物農(nóng)藥都是低毒的，有些正在研究或應(yīng)用的生物農(nóng)藥也是高毒或中毒品種，在生產(chǎn)和應(yīng)用中不注意安全，同樣會(huì)引起人畜中毒[23]。因此，白僵菌使用時(shí)要注意對(duì)環(huán)境的污染以及對(duì)人畜的健康影響。

在生物農(nóng)藥或昆蟲病原菌的開發(fā)應(yīng)用中，發(fā)掘菌種資源、選育高毒品種是研究的重點(diǎn)所在。白僵菌同綠僵菌和玫煙色棒束抱相比，在殺蟲效果上并沒有突出優(yōu)勢(shì)[24-25]。尋找并培養(yǎng)高毒力菌株是一項(xiàng)長期的工作。為克服這些弊端，有必要加強(qiáng)對(duì)球孢白僵菌等病原真菌侵染昆蟲的分子機(jī)理及相關(guān)毒力基因進(jìn)行研究，為利用基因工程技術(shù)改良菌株奠定基礎(chǔ)。此外，探索合適的白僵菌保存方式，提高產(chǎn)品的性能與穩(wěn)定性，延長貨架壽命，也是白僵菌商品化所必須解決的問題。

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