李泓雨,許萍
(北京建筑大學(xué) 水環(huán)境國(guó)家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心 城市雨水系統(tǒng)與水環(huán)境省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100044)
有調(diào)查研究表明,每年微生物腐蝕帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)損失高達(dá)4萬(wàn)億美元[1]。微生物腐蝕(Microbiologically influenced corrosion,MIC)是因微生物附著在金屬表面引起金屬材料表面理化性質(zhì)的改變,進(jìn)而引起金屬材料的腐蝕行為。引起微生物腐蝕的主要微生物包括硫酸鹽還原菌(Sulfate reducing bacteria,SRB)、硫氧化菌(Sulfure oxidizing bacteria,SOB)、鐵氧化細(xì)菌(Iron oxidizing bacteria,IOB)、鐵還原細(xì)菌(Iron reducing bacteria,IRB)和硝酸鹽還原菌(Nitrate reducing bacteria,NRB)等。不同微生物因其具有的代謝機(jī)制不同,對(duì)金屬造成的腐蝕影響也不同。
近年來(lái),人們對(duì)典型微生物腐蝕機(jī)制做了大量研究,以硫酸鹽還原菌(SRB)為例,陸續(xù)出現(xiàn)了陰極去極化理論、濃差電池理論、陽(yáng)極區(qū)固定理論、直接電子轉(zhuǎn)移理論等被廣泛認(rèn)可的理論。但是在自然環(huán)境中,微生物附著在金屬表面主要是以微生物群落的形式存在,因此對(duì)復(fù)雜微生物群落的研究更貼近現(xiàn)實(shí)意義。然而微生物群落往往受到諸多環(huán)境因素的影響,導(dǎo)致微生物群落對(duì)金屬的腐蝕行為是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程,對(duì)于混合微生物腐蝕機(jī)理的研究十分困難。微生物對(duì)金屬的腐蝕是不同微生物共同作用的結(jié)果。多種微生物共同作用下會(huì)表現(xiàn)出與單菌種不同的腐蝕行為。如IOB更傾向于利用IRB產(chǎn)生的Fe2+而不是利用直接加入的Fe2+[2]。因此本文從微生物群落角度出發(fā),討論了不同環(huán)境因素對(duì)種群的影響,并探討了多種微生物共同存在下通過(guò)協(xié)同和拮抗作用對(duì)金屬腐蝕產(chǎn)生的影響。
管道管材、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、溫度、溶解氧和pH值等會(huì)通過(guò)對(duì)微生物活性、微生物在基體表面附著能力和基體的親疏水性等對(duì)微生物種群多樣性、豐度和微生物結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響,進(jìn)而影響對(duì)金屬的腐蝕。
管道管材對(duì)微生物群落存在顯著影響。不同管材因其元素組成和組織結(jié)構(gòu)的差異,使得不同管材內(nèi)微生物量、微生物多樣性和微生物群落結(jié)構(gòu)也產(chǎn)生差異,而微生物量、微生物多樣性和腐蝕性微生物比例的增加,都會(huì)加劇材料的腐蝕。材料表面的微生物量受到細(xì)菌附著能力的顯著影響。Ren等發(fā)現(xiàn)球墨鑄鐵管、灰鑄鐵管、鍍鋅鋼管、不銹鋼復(fù)合管和聚氯乙烯5種管材中,鐵管中細(xì)菌總數(shù)和可培養(yǎng)異養(yǎng)菌數(shù)量均高于聚氯乙烯管[3]。這可能是由于微生物在不同材料表面的附著能力與基體表面粗糙度和親疏水性有關(guān),材料表面粗糙度越大,細(xì)菌越容易附著;基體表面疏水性越高,則粘附力越大[4]。蘇艷等[5]發(fā)現(xiàn),在316 L不銹鋼、PVC和玻璃3種管材中,玻璃表面最為均勻光滑,細(xì)菌不易附著,導(dǎo)致材料表面的附著量最低;而不銹鋼具有較大的表面粗糙度,因此微生物在其表面附著量最大。不同管材的微生物群落結(jié)構(gòu)差異很大,PE管和球墨鑄鐵管在再生水環(huán)境下管壁表面微生物群落只有鞘脂單胞菌屬為二者的共同菌屬[6]。王薇[7]對(duì)5種管材的飲用水管網(wǎng)生物膜的研究表明,微生物多樣性從高到低依次為球墨鑄鐵管、灰口鑄鐵管、鍍鋅管、不銹鋼復(fù)合管、塑料管。Zhang等[8]對(duì)中試配水系統(tǒng)下不同種類(lèi)管道細(xì)菌群落進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),球墨鑄鐵管生物膜主要由內(nèi)桿菌(33.84%)、丙酸桿菌(8.08%)和不動(dòng)桿菌(5.59%)組成。聚乙烯管狀生物膜中含有Sphingomons(25.25%),鏈球菌(7.64%),拉爾斯頓菌(4.83%),假單胞菌(4.63%),大腸桿菌-志賀氏菌(4.71%)。不銹鋼管生物膜中含有豐富的黃桿菌(24.76%)、弓形蟲(chóng)(12.03%)和食性菌(8.98%)。隨著研究的不斷深入研究者逐漸不再簡(jiǎn)單研究群落構(gòu)成,開(kāi)始逐漸關(guān)注腐蝕性功能菌在微生物群落中所占比重。靳軍濤[9]在再生水中UPVC、不銹鋼管、HDPE和鑄鐵管4種管材中發(fā)現(xiàn),鑄鐵管中腐蝕性細(xì)菌所占比例明顯高于其他管材,最高可達(dá)33.6%。其中,鐵細(xì)菌、硝化細(xì)菌和產(chǎn)酸菌占比較大。
表1 不同管道管材微生物群落結(jié)構(gòu)比較Table 1 Comparison of microbial community structure between different pipe materials
溶解氧(DO,Dissolved oxygen)濃度的提高會(huì)一定程度增加微生物種群的多樣性和豐度。當(dāng)DO濃度較低時(shí),微生物形成的生物膜會(huì)較為疏松,無(wú)法阻隔腐蝕性離子等的傳輸,管道腐蝕加劇[16]。微生物演替和空間分布同樣會(huì)受到DO的影響,在生物膜內(nèi)層對(duì)溶解氧有較強(qiáng)適應(yīng)能力的兼性細(xì)菌可以在低DO濃度下穩(wěn)定生長(zhǎng)。有研究發(fā)現(xiàn)[17]低溶解氧環(huán)境下,生物膜中異養(yǎng)菌群數(shù)量雖然占絕對(duì)優(yōu)勢(shì),但異養(yǎng)菌群總量受到溶解氧的影響較小。而在溶解氧濃度較高的表面,以好氧菌為主的微生物將會(huì)成為優(yōu)勢(shì)菌落。彭力[18]的研究表明,在腐蝕垢層的表面層將會(huì)形成以好氧菌鐵氧化菌為主的優(yōu)勢(shì)菌群。而在微生物演替過(guò)程中,初期溶解氧充足,濃度較高,好氧菌將會(huì)成為優(yōu)勢(shì)菌落,隨著時(shí)間的推移,微生物新陳代謝不斷消耗氧氣,使得溶解氧濃度下降,逐漸成為缺氧環(huán)境或厭氧環(huán)境,兼性細(xì)菌和厭氧細(xì)菌則逐漸成為優(yōu)勢(shì)菌種。雒江菡等[16]分別對(duì)溶解氧濃度0.8,1.9,2.9,4.1,4.9,5.9,7.1 mg/L下生物膜進(jìn)行檢測(cè),從科水平來(lái)看,當(dāng)溶解氧濃度的提高時(shí),好氧的硝化螺旋菌科和亞硝化單胞菌科豐度提高,兼性厭氧的腸桿菌科豐富度會(huì)降低。而腐蝕性細(xì)菌中的好氧菌鐵細(xì)菌會(huì)隨溶解氧濃度的降低而下降,當(dāng)溶解氧濃度超過(guò)了2.5 mg/L時(shí),硫酸鹽還原菌的生長(zhǎng)便會(huì)受到抑制,金屬腐蝕可以得到有效緩解。
微生物在不同溫度下敏感性和抗性會(huì)發(fā)生變化,因而微生物群落多樣性、豐度和群落結(jié)構(gòu)受到溫度顯著影響。于雪[19]研究了人工模擬廢水液在25,35,40 ℃下微生物種群變化,發(fā)現(xiàn)物種豐富度和多樣性在25 ℃時(shí)最高,40 ℃時(shí)最低。任紅星[20]在飲用水給水系統(tǒng)7個(gè)采樣點(diǎn)取水樣,均發(fā)現(xiàn)冬季細(xì)菌群落多樣性高于夏季。有研究發(fā)現(xiàn)夏季優(yōu)勢(shì)菌屬主要是鞘氨醇單胞菌屬、假黃色單胞菌屬、unidentified_Cyanobacteria和不動(dòng)桿菌屬;冬季優(yōu)勢(shì)菌屬主要包含鞘氨醇單胞菌屬、弧形菌屬、分支桿菌屬和unidentified_Cyanobacteria[21]。微生物種群在不同溫度下的差異可能由于細(xì)菌的吸附能力受到溫度的顯著影響,當(dāng)溫度升高時(shí),一是布朗運(yùn)動(dòng)提高,細(xì)菌與基底材料碰撞頻率增加;二是細(xì)菌會(huì)隨溫度升高疏水性增強(qiáng);三是EPS分泌量增大,EPS主要成分多糖具有粘性,都使得細(xì)菌可以更牢固的附著在試樣表面[22]。Wade等[23]的研究也證明了這一點(diǎn),大腸桿菌37 ℃時(shí)在試樣表面的吸附量約為21 ℃時(shí)的2.5倍??梢愿眠m應(yīng)水環(huán)境溫度的微生物菌群將成為優(yōu)勢(shì)菌群,當(dāng)腐蝕性功能菌群占據(jù)優(yōu)勢(shì)時(shí),金屬腐蝕將會(huì)加劇。韓文滔[24]發(fā)現(xiàn)腐蝕性功能菌鐵細(xì)菌的生長(zhǎng)受到溫度的顯著影響,夏天時(shí)其在供水管網(wǎng)中的含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)冬季使得管網(wǎng)腐蝕速率增大。而混合微生物體系中,Liu H等[25]研究了不同溫度下硫酸鹽還原菌與鐵氧化細(xì)菌對(duì)鋁合金的腐蝕行為,在45 ℃和60 ℃較30 ℃時(shí)腐蝕速率分別提高了2倍和4.6倍。因?yàn)樵?0 ℃時(shí)SRB逐漸演替成為優(yōu)勢(shì)菌種,主導(dǎo)對(duì)金屬的腐蝕。
pH是影響細(xì)菌群落多樣性、結(jié)構(gòu)、相互作用和功能的關(guān)鍵因素。每種微生物適宜生存的pH值不同,pH過(guò)高或過(guò)低時(shí)均會(huì)影響生物大分子活性。當(dāng)pH下降時(shí),細(xì)菌群落功能如碳、氮、磷和硫等的循環(huán)相關(guān)酶和蛋白質(zhì)隨之下降[26]。多數(shù)微生物群落富集生長(zhǎng)在中性和弱堿性環(huán)境中[27]。pH對(duì)微生物種群的影響可能與pH值會(huì)影響細(xì)菌的黏附率有關(guān)。當(dāng)粘附力降低時(shí),附著在金屬表面的微生物減少,微生物對(duì)金屬造成的腐蝕影響也會(huì)相應(yīng)減少。Sheng等[28]對(duì)脫硫弧菌、脫硫新加坡弧菌和假單胞菌在不同pH值下粘附金屬的能力進(jìn)行了研究。研究發(fā)現(xiàn),3種細(xì)菌在pH=3時(shí)對(duì)金屬的粘附能力達(dá)到最大,pH=9時(shí),細(xì)菌的粘附能力降到最小,對(duì)金屬造成的腐蝕影響較小??莶菅挎邨U菌和大腸桿菌的附著能力也受到pH值的影響,兩種菌在pH=8.2時(shí)附著量達(dá)到峰值。這是因?yàn)閜H的升高使得孔徑蛋白通道增大,更多葡萄糖和麥芽糖得以進(jìn)入細(xì)胞合成藻酸鈉,而大量的藻酸鈉有利于細(xì)菌附著以及細(xì)菌生物膜的生成[26]。研究發(fā)現(xiàn)在排水管道中,在綱水平上pH值與微生物群落存在顯著相關(guān)性,與黃桿菌綱、酸桿菌門(mén)呈正相關(guān),與β-變形菌綱、放線(xiàn)菌綱呈負(fù)相關(guān)[29]。適應(yīng)環(huán)境pH的腐蝕性功能菌會(huì)逐漸在微生物演替中占據(jù)優(yōu)勢(shì),主導(dǎo)金屬的腐蝕。Ling等[30]研究發(fā)現(xiàn),pH值也是影響微生物群落演替的主要因素之一。硫氧化菌會(huì)隨著微生物演替過(guò)程中pH值的降低成為優(yōu)勢(shì)菌種。李鑫對(duì)X70管線(xiàn)鋼在不同pH值下海泥模擬溶液的腐蝕情況做了研究,金屬腐蝕受到pH的顯著影響,當(dāng)pH=8時(shí)金屬腐蝕情況最為嚴(yán)重,因?yàn)樵嚇又蠸RB在pH=8時(shí)生長(zhǎng)情況最好[31]。
混合微生物對(duì)金屬腐蝕的協(xié)同作用主要體現(xiàn)在2個(gè)方面,見(jiàn)表2,一是腐蝕性微生物演化成為優(yōu)勢(shì)菌種,主導(dǎo)對(duì)金屬的腐蝕;二是保護(hù)層變疏松,促進(jìn)氧濃差電池形成。
表2 部分混合微生物對(duì)金屬腐蝕的協(xié)同作用Table 2 Synergistic effect of some mixed microorganisms on metal corrosion
當(dāng)兩種微生物共同存在時(shí),一種微生物通過(guò)生命活動(dòng)為另一種微生物提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境,使腐蝕性微生物大量生長(zhǎng),加速對(duì)金屬的腐蝕。SRB和IOB的組合是協(xié)同作用中最為典型的組合,其腐蝕機(jī)理見(jiàn)圖1。
微生物共同作用下生物膜形成速度變慢、細(xì)菌分布的不均勻、腐蝕產(chǎn)物和代謝產(chǎn)物的堆積,會(huì)導(dǎo)致生物膜和腐蝕產(chǎn)物膜的不均勻甚至出現(xiàn)裂紋變得疏松多孔,使不同區(qū)域氧濃度產(chǎn)生差異,貧氧區(qū)域形成陽(yáng)極,富氧區(qū)域形成陰極,產(chǎn)生氧濃度差電池,局部腐蝕增強(qiáng)??骂38]在假單胞菌和氧化硫硫桿菌協(xié)同作用中發(fā)現(xiàn),腐蝕產(chǎn)物的堆積使得內(nèi)應(yīng)力增大,破壞了內(nèi)層膜,腐蝕產(chǎn)物膜出現(xiàn)縫隙,使得溶解氧傳質(zhì)產(chǎn)生差異,混菌體系較單菌體系均勻腐蝕減弱,局部腐蝕增強(qiáng)。董碩[39]對(duì)需鈉弧菌、芽孢桿菌混合腐蝕體系中的腐蝕行為研究發(fā)現(xiàn),混合體系會(huì)促進(jìn)金屬的腐蝕。需鈉弧菌和芽孢桿菌都是典型的兼性厭氧菌,但需鈉弧菌對(duì)缺氧環(huán)境的適應(yīng)能力更強(qiáng),因此會(huì)在兩者的競(jìng)爭(zhēng)中占據(jù)優(yōu)勢(shì),混菌體系下生物膜的生長(zhǎng)變慢;松散的菌體與腐蝕產(chǎn)物在裂開(kāi)的混合層間結(jié)合,都導(dǎo)致膜層均一性變差產(chǎn)生局部氧濃差電池進(jìn)而加劇了局部腐蝕。羅琦[40]的研究中表明弧菌和假單胞菌的混合體系較單菌體系腐蝕速率增大。因?yàn)榧賳伟浒饩酆衔锞哂叙じ阶饔?,使腐蝕產(chǎn)物不易脫落在金屬表面造成局部堆積,阻礙了氧的傳遞,產(chǎn)生氧濃度差,而混菌體系中兩種細(xì)菌分布的不均勻性加劇了氧濃度差腐蝕誘發(fā)了更嚴(yán)重的局部腐蝕。
混合微生物對(duì)腐蝕的拮抗作用主要表現(xiàn)在三個(gè)方面,見(jiàn)表3,一是抑制甚至殺死腐蝕性微生物,二是鈍化保護(hù)層,三是產(chǎn)生表面活性劑。
表3 部分混合微生物對(duì)金屬腐蝕的拮抗作用Table 3 Antagonistic effect of some mixed microorganisms on metal corrosion
不同微生物會(huì)對(duì)溶解氧或營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系或受到其他細(xì)菌生命活動(dòng)代謝產(chǎn)物的影響,腐蝕性微生物生長(zhǎng)受到抑制,進(jìn)而減緩對(duì)金屬的腐蝕。皮振邦等[41]對(duì)小球菌與硫酸鹽還原菌混合作用下的碳鋼腐蝕行為進(jìn)行了研究,小球菌雖是好氧菌,但會(huì)與SRB競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),在有限的生長(zhǎng)條件下,小球菌及其代謝產(chǎn)物抑制了SRB的生長(zhǎng),小球菌主導(dǎo)了對(duì)金屬的腐蝕,雖然小球菌在一定程度會(huì)加速金屬的腐蝕,但程度比硫酸鹽還原菌會(huì)小的多,仍會(huì)大幅降低碳鋼的腐蝕速率。雖然硝酸鹽還原菌和硫酸鹽還原菌都是厭氧型細(xì)菌,但是硝酸鹽還原菌接受電子的能力更強(qiáng),在兩者的競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系中硝酸鹽還原菌更容易占據(jù)優(yōu)勢(shì)[42]。在石油開(kāi)采中,因硝酸鹽還原菌可以利用注入的硝酸鹽氧化油脂成分,在與SRB競(jìng)爭(zhēng)中占據(jù)優(yōu)勢(shì),抑制SRB造成的腐蝕,因此石油生產(chǎn)中會(huì)加入NRB來(lái)抑制SRB對(duì)管網(wǎng)的腐蝕[43]。Qiu[44]對(duì)反硝化硫桿菌(TDN)對(duì)原油中SRB對(duì)X70管線(xiàn)鋼腐蝕的影響進(jìn)行了研究。當(dāng)TDN與SRB混合后,會(huì)隨時(shí)間變化交替占據(jù)優(yōu)勢(shì),TDN可以減少原油中硫化物的積累,抵抗SRB對(duì)金屬的腐蝕。有的微生物甚至可以直接殺死腐蝕性細(xì)菌,如Zuo[45]發(fā)現(xiàn)一種產(chǎn)短桿菌肽的短桿菌可以降低碳鋼的腐蝕速率,因?yàn)槎虠U菌肽可以抑制硫酸鹽還原菌和鐵氧化菌的生長(zhǎng)甚至殺死它們。也有研究人員采用基因構(gòu)建技術(shù),使枯草芽抱桿菌分泌含??咕w、bactenecin等抗生素的生物膜來(lái)抑制SRB生長(zhǎng),達(dá)到減緩腐蝕的目的[46]。
混合微生物可以通過(guò)形成較單菌體系更為致密的生物膜或腐蝕產(chǎn)物膜,阻隔腐蝕介質(zhì)的侵入,降低腐蝕速率。硫酸鹽還原菌和硝化菌的混合體系腐蝕速率小于單菌體系,因?yàn)閱尉w系下生物膜疏松,無(wú)法均勻覆蓋,但混菌共同代謝作用下使得形成的保護(hù)膜更為致密,有效減緩了金屬的腐蝕。且混菌體系膜層具有較強(qiáng)的吸附特性,一定程度上阻隔了介質(zhì)中離子的侵襲,減低了金屬的溶解速率[47]。碳鋼的主要腐蝕產(chǎn)物中,F(xiàn)e3O4和Fe2O3是較α-FeOOH和γ-FeOOH更為穩(wěn)定的腐蝕產(chǎn)物,且結(jié)構(gòu)也更為致密。如果腐蝕產(chǎn)物膜中有較高含量的Fe3O4和Fe2O3時(shí),腐蝕產(chǎn)物膜相較會(huì)更為致密,有效減緩金屬的腐蝕。任恒陽(yáng)[48]發(fā)現(xiàn),大腸埃希氏菌會(huì)促進(jìn)初期腐蝕產(chǎn)物α-FeOOH形成,熒光假單胞菌會(huì)促進(jìn)Fe3O4和Fe2O3的生成,而在兩中菌競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系中,熒光假單胞菌占優(yōu)并穩(wěn)定存在,使得混合細(xì)菌下腐蝕產(chǎn)物Fe3O4和Fe2O3較多,形成的腐蝕產(chǎn)物層較為致密,減緩金屬的腐蝕。
在混合體系下,某些細(xì)菌會(huì)產(chǎn)生表面活性劑影響金屬的腐蝕。如假單胞菌能分泌EPS作為表面活性劑抑制其他微生物的附著以減緩金屬腐蝕的發(fā)生。段冶等[49]對(duì)鐵細(xì)菌和假單胞菌的混合腐蝕行為進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),雖然單菌體系與混菌體系抑制腐蝕機(jī)理不同,混菌體系可能由于胞外聚合物作為表面活性劑抑制細(xì)菌吸附,減弱細(xì)菌對(duì)金屬腐蝕的影響??骂38]在假單胞菌和氧化硫硫桿菌協(xié)同作用中發(fā)現(xiàn)證實(shí)了這點(diǎn),混合體系下,因假單胞菌分泌胞外聚合物使得氧化硫硫桿菌數(shù)量較單菌體系少了一個(gè)量級(jí)。胞外聚合物除了作為表面活性劑外,還可作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),影響微生物的生長(zhǎng)。魏志剛[50]在大腸埃希氏菌和熒光假單胞菌的研究中證實(shí)了這一點(diǎn)。大腸埃希氏菌的EPS可作為熒光假單胞菌的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),促進(jìn)其的生長(zhǎng)。而熒光假單胞菌EPS達(dá)到400 mg/L時(shí),便能抑制或減緩大腸埃希氏菌的生長(zhǎng)和繁殖,減緩腐蝕的發(fā)生。
(1)自然環(huán)境因素復(fù)雜多變,與微生物新陳代謝、微生物群落分布、微生物附著、微生物演化等相互作用,協(xié)同對(duì)金屬產(chǎn)生影響,但難以對(duì)其進(jìn)行定量的描述,對(duì)其進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)合微生物群落優(yōu)勢(shì)菌種演化、微生物群落結(jié)構(gòu)變化,如果可以建立混合微生物腐蝕的機(jī)制模型和經(jīng)驗(yàn)?zāi)P?,則有利于我們更好地理解微生物腐蝕機(jī)制,從而找到更加有效抑制微生物腐蝕的方法。
(2)目前,研究已逐步從單一菌種腐蝕機(jī)制轉(zhuǎn)向混合菌種腐蝕機(jī)制的研究。微生物間相互作用彼此影響,如何利用微生物種間關(guān)系來(lái)減緩微生物的腐蝕,單菌種在混合體系下腐蝕特性,如何分離提純防腐蝕菌種都是未來(lái)值得深入研究的問(wèn)題。但是腐蝕的實(shí)際環(huán)境中工況更為復(fù)雜,實(shí)驗(yàn)室條件下,無(wú)法完全還原實(shí)際環(huán)境的情景,仍是當(dāng)前該領(lǐng)域研究面臨的問(wèn)題。未來(lái)仍應(yīng)結(jié)合分子生物學(xué)、生物化學(xué)、電化學(xué)等多學(xué)科交叉技術(shù)對(duì)混合菌種腐蝕機(jī)制進(jìn)行更深入的研究。