朱中平朱 敏彭 堯

（1湖南加農(nóng)正和生物技術(shù)有限公司，湖南長(zhǎng)沙 410329；2PSY應(yīng)用研究院，湖南長(zhǎng)沙 410329）

傳統(tǒng)生物安全防控非洲豬瘟的模式可能已經(jīng)“失靈”。傳統(tǒng)生物安全的內(nèi)涵是堵住病毒不進(jìn)入豬場(chǎng)圍墻之內(nèi)，于是便有了“鐵桶”防控非洲豬瘟的模式。圍墻或“鐵桶”防控非洲豬瘟具有一定的合理性和重要性，俗話說(shuō)“只有千日做賊，哪有千日防賊”道出了傳統(tǒng)生物安全的“難言之隱”。根據(jù)大量檢測(cè)數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，豬場(chǎng)內(nèi)的非洲豬瘟病毒可能來(lái)自引進(jìn)的豬只，尤其是基因缺失毒株感染的引進(jìn)豬，往往感染30 d才可以檢測(cè)到，在引進(jìn)時(shí)對(duì)非洲豬瘟抗體進(jìn)行檢測(cè)可能是抗原抗體反應(yīng)“雙陰性”，但實(shí)際上已經(jīng)被非洲豬瘟病毒隱性感染了。此外，豬場(chǎng)內(nèi)病毒還可能來(lái)自菜市場(chǎng)、屠宰場(chǎng)和拉豬車等，據(jù)樊福好研究員在會(huì)議講課中報(bào)道，在菜市場(chǎng)隨機(jī)抽檢的菜品及地面垃圾中，非洲豬瘟病毒的檢出率高達(dá)80%。因此，非洲豬瘟病毒可能會(huì)在“不知不覺(jué)”中進(jìn)入豬場(chǎng)。而且，非洲豬瘟病毒基因缺失毒株感染的豬只表現(xiàn)發(fā)病晚、臨床癥狀不典型、病毒隱蔽性強(qiáng)，往往在豬只出現(xiàn)癥狀時(shí)，已經(jīng)有大批豬只感染了病毒，精準(zhǔn)清除等“拔牙”措施為時(shí)已晚。

1 如何應(yīng)對(duì)豬場(chǎng)內(nèi) “低烈度”病毒的存在

既然病毒隨時(shí)都會(huì)突破傳統(tǒng)的圍墻或“鐵桶”生物安全防控屏障，那么，養(yǎng)豬企業(yè)就要思考如何在豬場(chǎng)存在“低烈度”病毒的情況下阻止豬群不感染病毒，甚至是感染病毒而豬不發(fā)病的防控措施。一般病毒入侵豬體要經(jīng)過(guò)3個(gè)“關(guān)口”，如果能夠做好防控，增加病毒闖過(guò)這些“關(guān)口”的難度，病毒自然就會(huì)“知難而退”，最終再通過(guò)日常的嚴(yán)格消毒將病毒消滅。

1.1 第一關(guān)，病毒怎樣進(jìn)入豬體

豬體完整的皮膚黏膜對(duì)于非洲豬瘟病毒來(lái)說(shuō)就是一道堅(jiān)不可摧的“長(zhǎng)城”，體型“巨大”的非洲豬瘟病毒難以通過(guò)完整的皮膚進(jìn)入豬體內(nèi)。如果豬體有傷口，則病毒很容易侵入。

1.2 第二關(guān)，病毒如何進(jìn)入細(xì)胞

當(dāng)病毒進(jìn)入豬體內(nèi)后，會(huì)被豬體的免疫系統(tǒng)識(shí)別，觸發(fā)非特異性免疫而被吞噬細(xì)胞消滅。同時(shí)，體液中的抗體會(huì)粘附在病毒顆粒表面，并且互相結(jié)合，把單個(gè)微小的病毒聚合在一起，由巨噬細(xì)胞對(duì)病毒進(jìn)行吞噬和分解。

1.3 第三關(guān)，找到細(xì)胞核

在微觀環(huán)境上，豬體細(xì)胞的體積比病毒大800萬(wàn)倍。“無(wú)手無(wú)腳”不能自主運(yùn)動(dòng)的病毒在較大的空間中尋找細(xì)胞核，純憑“瞎貓遇上死耗子”般的運(yùn)氣，不是一件容易的事情。豬的細(xì)胞中有溶菌酶、免疫球蛋白等各種免疫物質(zhì)，并會(huì)對(duì)病毒進(jìn)行包裹和殺傷。進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)部的絕大多數(shù)病毒終其一生都未找到細(xì)胞核。病毒想感染豬體，只能依靠足夠多的數(shù)量去“碰運(yùn)氣”。

2 “非洲豬瘟病毒+豬≠非洲豬瘟”

據(jù)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所仇華吉研究員在2021年5月南昌召開(kāi)的“生物安全”大會(huì)上報(bào)道，在試驗(yàn)豬場(chǎng)，用非洲豬瘟活毒模擬自然感染豬只15 d后，檢測(cè)豬的血液、鼻拭紙和肛門拭紙，病毒抗原均為陰性，但環(huán)境病原檢測(cè)為陽(yáng)性。說(shuō)明非洲豬瘟病毒和豬共存的環(huán)境不等于會(huì)發(fā)生非洲豬瘟疫情。可以說(shuō)豬群環(huán)境中存在非洲豬瘟病毒，甚至豬的皮膚上存在病毒，豬也不一定表現(xiàn)非洲豬瘟疫病的癥狀。因此，豬群處在非洲豬瘟病毒污染的環(huán)境中發(fā)生非洲豬瘟疫情，還需要其他條件的配合。根據(jù)以往經(jīng)驗(yàn)，列舉“非洲豬瘟病毒＋豬≠非洲豬瘟”的一些條件，為存在“低烈度”非洲豬瘟病毒的豬場(chǎng)防控非洲豬瘟提供參考。

2.1 非洲豬瘟病毒與豬接觸需要一定的量才能使豬發(fā)病

非洲豬瘟病毒感染豬只需要一定的病毒數(shù)量才能使其發(fā)病，據(jù)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所報(bào)道[1]，感染不同劑量非洲豬瘟病毒分離株的田間試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，非洲豬瘟病毒數(shù)量達(dá)102HAD50才能具有致病性。

2.2 非洲豬瘟病毒與豬接觸需要有利于病毒存活的環(huán)境條件

非洲豬瘟病毒必須在宿主活的細(xì)胞內(nèi)才能復(fù)制，存在于環(huán)境中的病毒只能隨著時(shí)間的推進(jìn)不斷減少。病毒本身在環(huán)境中不能長(zhǎng)久生存，在有利的環(huán)境下，病毒半衰期會(huì)長(zhǎng)一些。而在不利的環(huán)境（強(qiáng)酸、強(qiáng)堿）下，病毒的半衰期會(huì)大大縮短。如表1、表2和表3所示[2]，非洲豬瘟病毒怕高溫、怕干燥、怕強(qiáng)酸強(qiáng)堿。

表2 非洲豬瘟病毒在不同環(huán)境下的存活時(shí)間 [2]

表3 非洲豬瘟病毒在原料中30 d的適應(yīng)性 [2]

2.3 不同接觸途徑感染發(fā)病所需病毒數(shù)量差異顯著

非洲豬瘟病毒主要感染途徑是口鼻或鼻咽，然后通過(guò)經(jīng)扁桃體或胃腸道進(jìn)入豬體內(nèi)。ASFV的pH值耐受范圍是3.9～13.4[3]，而胃酸環(huán)境pH值是1.0～3.5，因此，非洲豬瘟病毒在胃腸道中引起感染的可能性不大。飲水（液體介質(zhì)）為病毒與扁桃體接觸提供了理想的基質(zhì)，病毒在扁桃體內(nèi)復(fù)制。飼料（固體介質(zhì)）可抑制病毒與扁桃體接觸，減少病毒在胃腸道前暴露于淋巴和上皮組織，因此飲水方式更容易使豬感染非洲豬瘟病毒。有研究表明[4]，在飲水途徑中，非洲豬瘟病毒的最小感染劑量是100TCID50；飼料途徑中，病毒的最小感染劑量是104TCID50。因?yàn)轱暳峡赡艽碳ね僖旱鞍酌附到獠《荆ㄒ?jiàn)表4）。此外，飼料中的物質(zhì)可能包裹病毒而抑制其與扁桃體接觸，減少病毒在進(jìn)入胃腸道前暴露給淋巴組織和上皮組織。總體來(lái)說(shuō)，在飼料和水中，ASFV的感染可能性隨著劑量的增加而升高。當(dāng)病毒多次暴露時(shí)，飲水和飼料在各個(gè)劑量水平的感染率都會(huì)顯著增加。

表4 非洲豬瘟病毒在不同介質(zhì)中的傳播和感染特性

2.4 豬非特異性免疫是阻止非洲豬瘟病毒感染的“阻燃劑”

當(dāng)非洲豬瘟病毒進(jìn)入豬體后，病毒會(huì)被豬體免疫系統(tǒng)識(shí)別，觸發(fā)非特異性免疫。體液中的抗體會(huì)粘附在病毒顆粒表面，并且互相結(jié)合，把單個(gè)微小的病毒聚合在一起，由巨噬細(xì)胞進(jìn)行吞噬和分解。有少量病毒侵入黏膜系統(tǒng)時(shí)，可以通過(guò)提高豬體的非特異性免疫機(jī)制而被機(jī)體清除掉。

2.5 豬群應(yīng)激是非洲豬瘟病毒感染的 “催化劑”

從嚴(yán)格意義上講，非洲豬瘟病毒不依靠空氣傳播，非洲豬瘟病毒粒子大小為170～215 nm，無(wú)法進(jìn)入正常的細(xì)胞。如果豬只的皮膚、天然孔黏膜屏障、細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，巨型的非洲豬瘟病毒粒子無(wú)法感染豬只，而傷口、應(yīng)激、血液是非洲豬瘟病毒直接接觸傳播的最主要途徑。如圖1所示，豬群存在應(yīng)激時(shí)，會(huì)產(chǎn)生大量自由基，從而破壞黏膜的通透性；應(yīng)激會(huì)減少黏膜血液供應(yīng)，改變黏膜形態(tài)；應(yīng)激會(huì)使免疫球蛋白減少，從而破壞黏膜功能。因此，應(yīng)激發(fā)生時(shí)，由于黏膜緊密性形態(tài)改變、防御功能下降以及通透性增加，為非洲豬瘟病毒的入侵打開(kāi)了“方便之門”。

圖1 應(yīng)激破壞黏膜的途徑

2.6 “幫兇”性疾病的感染是非洲豬瘟病毒感染發(fā)病的 “助燃劑”

臨床發(fā)現(xiàn)，豬藍(lán)耳病、豬偽狂犬病以及腸道病毒性疾病的發(fā)病與非洲豬瘟感染高度重疊。從發(fā)病機(jī)制上看，如圖2，一方面是豬藍(lán)耳病、豬偽狂犬病以及腸道病毒性疾病的發(fā)生降低了豬群的非特異性免疫力，另一方面是這些疾病的發(fā)生破壞了豬體黏膜的物理屏障功能。

圖2 “幫兇”性疾病的感染與非洲豬瘟病毒窗口期重合

3 小結(jié)

綜上所述，讓非洲豬瘟病毒不接觸到豬是一個(gè)理想的防控非洲豬瘟疫情的策略，但在萬(wàn)一非洲豬瘟病毒突破圍墻、“鐵桶”屏障進(jìn)入豬場(chǎng)的情況下，豬場(chǎng)也決不可“坐以待斃”，必須“以豬為本”筑起一道道物理性、生物性屏障，如通過(guò)強(qiáng)化豬場(chǎng)的“五分”，防止場(chǎng)內(nèi)病毒交叉感染和病毒載量升高。其中“五分”分別為①分區(qū)：嚴(yán)格區(qū)分臟區(qū)、灰區(qū)和凈區(qū)；②分人：嚴(yán)格控制不同崗位人員的流動(dòng)，嚴(yán)禁串舍；③分路：嚴(yán)格劃分人走的路、豬只單向流動(dòng)的路、糞便流向及處理路徑；④分物：嚴(yán)格執(zhí)行一次性使用物品的及時(shí)銷毀，重復(fù)使用物品的及時(shí)清洗消毒；⑤分度：嚴(yán)格消毒的程序和時(shí)間，例如人洗澡手泡藥時(shí)間，物料的熏蒸時(shí)間和熏蒸濃度，車清洗的清潔度。規(guī)?；i場(chǎng)要做到工作職責(zé)不交叉、行走路線不交叉、洗消工具不交叉。并且，通過(guò)抗應(yīng)激和清除“幫兇”等方法，保護(hù)豬的黏膜屏障，讓非洲豬瘟病毒無(wú)從下口，從而提升豬的非特異性免疫力、增強(qiáng)豬的抗感染能力。最后通過(guò)筑起的一道道屏障，使得“非洲豬瘟病毒＋豬≠非洲豬瘟”的“不等式”能夠成立。