摘要： 目的 研究低溫脅迫下桑寄生種子的各生理指標(biāo)變化。方法 2018年6月-2019年5月采集20批桑寄生種子，分別選擇不同溫度處理，并在不同時(shí)間取樣開(kāi)展各項(xiàng)生理指標(biāo)的檢測(cè)，分析其指標(biāo)變化。結(jié)果 -5、0、5、10攝氏度時(shí)處理1、2、3、4d后的相對(duì)電導(dǎo)率均高出對(duì)照組（P<0.05）。-5、0、5、10攝氏度時(shí)處理1、2、3、4d后的可溶性糖與對(duì)照組差異顯著（P<0.05）。-5、0、5、10攝氏度時(shí)處理1、2、3、4d后的可溶性淀粉與對(duì)照組比較差異顯著（P<0.05）。-5、0、5、10攝氏度時(shí)處理1、2、3、4d后的可溶性蛋白與對(duì)照組比較差異顯著（P<0.05）。結(jié)論 低溫脅迫下桑寄生種子的電導(dǎo)率、可溶性糖、可溶性淀粉及可溶性蛋白發(fā)生明顯變化，尤其是0攝氏度及以下的條件不利于種子保存。

關(guān)鍵詞：桑寄生;相對(duì)電導(dǎo)率;低溫脅迫;種子

【中圖分類(lèi)號(hào)】R4 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2107-2306（2021）06-225-01

桑寄生屬于我國(guó)傳統(tǒng)中藥材之一，具有強(qiáng)筋骨、除風(fēng)濕、安胎及補(bǔ)肝腎的作用，同時(shí)成為國(guó)內(nèi)特色的道地寄生類(lèi)藥材。而桑寄生種子具有一定頑拗性，其低溫敏感性較強(qiáng)，且容易失活，加上其僅可經(jīng)過(guò)種子繁殖，可直接影響其繁殖發(fā)展[1]。以往臨床曾針對(duì)頑拗性種子進(jìn)行低溫保存的研究，但實(shí)際能夠長(zhǎng)時(shí)間低溫保存的報(bào)道較少，可能與其低溫敏感的響應(yīng)機(jī)制存在關(guān)系，同時(shí)成為頑拗性種子死亡的主要因素[2-3]。一旦種子受到低溫脅迫，其不僅出現(xiàn)生物膜改變，還可導(dǎo)致膜系統(tǒng)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，促使膜上各類(lèi)酶活性受損，最終造成種子變質(zhì)死亡[4]。另外為了減輕低溫帶來(lái)的損害，種子可能通過(guò)產(chǎn)生小分子物質(zhì)或者分解原本物質(zhì)的方式，來(lái)穩(wěn)定細(xì)胞膜系統(tǒng)，進(jìn)而避免低溫脅迫引發(fā)的傷害[5]。因此本文展開(kāi)試驗(yàn)，結(jié)果如下：

1 資料與方法

1.1 材料

2018年6月-2019年5月采集20批桑寄生種子，其種子的成熟度、飽滿度一致，且無(wú)機(jī)械損傷或者病蟲(chóng)害。分別進(jìn)行常規(guī)清洗、剝除果皮果膠，放在不同溫度下處理，同時(shí)選擇25攝氏度下處理的種子作為對(duì)照組。其中不同溫度為-5、0、5、10攝氏度，其環(huán)境相對(duì)濕度均處于70-75%左右，而對(duì)照品在人工氣候的培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行。

1.2 方法

選擇電導(dǎo)儀（DDS-307）檢測(cè)-5、0、5、10攝氏度及處理后1、2、3、4d的電導(dǎo)率，并遵照蒽酮比色法檢測(cè)可溶性糖與淀粉，按考馬斯亮藍(lán)G-250法檢測(cè)可溶性蛋白，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比不同溫度處理桑寄生種子1、2、3、4d后的相對(duì)電導(dǎo)率、可溶性糖、可溶性淀粉及可溶性蛋白水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

全文數(shù)據(jù)選擇SPSS 20.0系統(tǒng)計(jì)算，表達(dá)計(jì)量數(shù)據(jù)，選擇t檢驗(yàn);百分比表達(dá)計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)，選擇X2檢驗(yàn)，P<0.05為兩組數(shù)據(jù)存在差異。

2 結(jié)果

2.1 不同溫度處理后的相對(duì)電導(dǎo)率

-5、0、5、10攝氏度時(shí)處理1、2、3、4d后的相對(duì)電導(dǎo)率均高出對(duì)照組（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 不同溫度處理后的可溶性糖水平

-5、0、5、10攝氏度時(shí)處理1、2、3、4d后的可溶性糖與對(duì)照組差異顯著（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 不同溫度處理后的可溶性淀粉水平

-5、0、5、10攝氏度時(shí)處理1、2、3、4d后的可溶性淀粉與對(duì)照組比較差異顯著（P<0.05）。見(jiàn)表3。

2.4 不同溫度處理后的蛋白水平

-5、0、5、10攝氏度時(shí)處理1、2、3、4d后的可溶性蛋白與對(duì)照組比較差異顯著（P<0.05）。見(jiàn)表4。

3 討論

由于頑拗性種子難以耐受低溫，難以使用低溫種子庫(kù)等常規(guī)方式進(jìn)行保存，明顯提升種子保存的困難程度[6]。因此全面掌握頑拗性種子低溫敏感的機(jī)理成為關(guān)鍵，但其過(guò)程較為復(fù)雜，目前臨床僅對(duì)其脫水敏感性進(jìn)行觀察，并未重視低溫敏感的研究[7]。因此本文展開(kāi)分析，對(duì)桑寄生種子在低溫脅迫下的生理指標(biāo)進(jìn)行觀察，為低溫敏感機(jī)制提供參考依據(jù)。

桑寄生種子通常對(duì)低溫較為敏感，本文結(jié)果中看到：-5、0、5、10攝氏度時(shí)處理1、2、3、4d后的相對(duì)電導(dǎo)率、可溶性淀粉、可溶性糖及可溶性蛋白與對(duì)照組差異顯著（P<0.05），提示低溫脅迫下桑寄生種子的電導(dǎo)率、可溶性糖及可溶性淀粉受到一定影響，特別是0攝氏度及以下條件時(shí)，不利于種子保存。經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，電導(dǎo)率與低溫脅迫的時(shí)長(zhǎng)存在一定關(guān)系，隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，其溫度越低，細(xì)胞膜受到的傷害越大，且電導(dǎo)率隨之升高[8]。而可溶性糖、淀粉及蛋白均屬于植物滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)及內(nèi)容物，經(jīng)過(guò)分解滲透或者積累方式調(diào)節(jié)物質(zhì)，可達(dá)到平衡細(xì)胞滲透的效果，進(jìn)而避免逆境條件對(duì)植物造成的傷害[9-10]。曾有研究指出[11]，較高水平的可溶性糖以及蛋白在增強(qiáng)植物抗寒性上具有重要意義。而桑寄生種子在低溫環(huán)境中，可能出現(xiàn)相關(guān)糖來(lái)抵抗低溫脅迫，但隨著處理時(shí)長(zhǎng)的增加，其合成能力受到損害。由此可見(jiàn)，不同溫度及處理時(shí)間下，桑寄生種子上可溶性糖、淀粉及蛋白水平發(fā)生一系列變化，尤其是0攝氏度及以下條件時(shí)變化更明顯，不利于其保存及萌發(fā)。

綜上所述，低溫脅迫下桑寄生種子的電導(dǎo)率、可溶性糖、可溶性淀粉及可溶性蛋白發(fā)生明顯變化，尤其是0攝氏度及以下的條件不利于種子保存。

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欽州市科學(xué)研究與技術(shù)開(kāi)發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目 合同編號(hào)：201811503

作者簡(jiǎn)介：裴河歡（1981-），男，在職研究生，副主任藥師，主要從事藥用植物學(xué)、天然藥物開(kāi)發(fā)和中藥制劑研發(fā)，E-mail：pei.hehuan@163.com。