朱道仙 劉 莉 陸 江

江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇泰州225300

動(dòng)物腸道內(nèi)存在著數(shù)量龐大、結(jié)構(gòu)復(fù)雜的微生物群落，對(duì)宿主營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收、疾病預(yù)防起著重要作用[1]。不同的飲食習(xí)慣和生活環(huán)境對(duì)犬的胃腸道菌群有重要影響，許多研究表明犬胃腸道菌群的改變與不同疾病有關(guān)，如炎癥性腸?。↖BD）、慢性腸病及急性腹瀉等[2]。動(dòng)物雙歧桿菌可抑制腸道內(nèi)致病菌生長(zhǎng)繁殖，能夠合成維生素B1、B2、B6和K等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并具有調(diào)理胃腸的功能[3]。但關(guān)于動(dòng)物雙歧桿菌在寵物犬上應(yīng)用報(bào)道較少，本研究通過(guò)觀察動(dòng)物雙歧桿菌CP-9 對(duì)犬腸道菌群及糞便化學(xué)性狀的影響，為該益生菌在犬上的應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

動(dòng)物雙歧桿菌CP-9 由浙江民生生物科技有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與設(shè)計(jì)

8條1歲左右的Beagle 犬，體重（7±1）kg，購(gòu)于江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院實(shí)驗(yàn)犬房。試驗(yàn)期間所有犬環(huán)境條件、基礎(chǔ)日糧、飼養(yǎng)管理相同，試驗(yàn)前飼喂基礎(chǔ)日糧2 d，試驗(yàn)期間飼喂基礎(chǔ)日糧+益生菌（0.5 g/kg），試驗(yàn)期7 d。

1.3 樣品采集與指標(biāo)測(cè)定

1）生產(chǎn)性能觀察。每天記錄采食量、精神狀態(tài)、腹瀉情況等生理活動(dòng)變化。

2）菌群結(jié)構(gòu)檢測(cè)。分別在試驗(yàn)的1、3、5、7 d，經(jīng)直腸采集無(wú)菌糞便，用天平稱(chēng)取每份100 mg，根據(jù)試驗(yàn)要求處理后，按細(xì)菌基因組DNA 提取試劑盒提供的說(shuō)明提取各組的糞便細(xì)菌DNA。將待測(cè)糞便樣品中提取的DNA 分別進(jìn)行4 種細(xì)菌的實(shí)時(shí)熒光定量PCR 反應(yīng)，根據(jù)溶解曲線分析PCR 產(chǎn)物的特異性，并由Light Cycler PCR 儀分析定量結(jié)果，應(yīng)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

3）糞便水分含量測(cè)定。分別在試驗(yàn)的1、3、5、7 d，收集新鮮糞便，用烘干法測(cè)定。

4）糞便氨含量測(cè)定。分別在試驗(yàn)的1、3、5、7 d，收集新鮮糞便，用測(cè)氨儀測(cè)定。

5）糞便吲哚含量測(cè)定。分別在試驗(yàn)的1、3、5、7 d，收集新鮮糞便，用氣相色譜法測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，P<0.05 表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 生產(chǎn)性能觀察

飼喂期間，各組犬只采食狀態(tài)良好，排糞及糞便正常，體溫、脈搏及呼吸等生理活動(dòng)均正常。

2.2 糞中含水量的變化

由圖1可知，隨著飼喂時(shí)間推移，糞中含水量逐漸升高，第5天變化最為明顯，之后趨于平緩。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)比第1 天升高了13.11%，差異顯著，但未超出正常參考范圍。說(shuō)明該益生菌可以適量提高健康犬糞便中的水分，軟化糞便，減少便秘的發(fā)生。

圖1 益生菌對(duì)糞便含水量的影響

2.3 糞中氨的變化

從圖2可以看出，隨著飼喂時(shí)間的推移，糞中氨含量逐漸降低，第3 天出現(xiàn)顯著差異，第7 天比第1天降低了14.81%。說(shuō)明益生菌可以促進(jìn)腸道氮的吸收，減少氨的排泄。

圖2 益生菌對(duì)糞中氨含量的影響

2.4 糞中吲哚含量變化

由圖3可知，隨著飼喂時(shí)間的推移，糞中吲哚逐漸降低，第5天出現(xiàn)顯著差異，第7天比第1天降低了18.07%。說(shuō)明益生菌可以減少糞便中吲哚的排泄。

圖3 益生菌對(duì)糞中吲哚含量的影響

2.5 腸道菌群的變化

由圖4可知，益生菌可以升高犬腸道中乳酸桿菌、雙歧桿菌數(shù)量和B/E值，降低大腸桿菌數(shù)。從第5天開(kāi)始，效果顯著升高，說(shuō)明該益生菌可以提高腸道有益菌數(shù)量，降低有害菌數(shù)量，對(duì)維持腸道健康有促進(jìn)作用。

圖4 益生菌對(duì)腸道菌群的影響

3 討 論

研究表明，當(dāng)腸道內(nèi)有高濃度水平的動(dòng)物雙歧桿菌時(shí)，可抑制外侵的病原大腸埃希菌、痢疾志賀菌、傷寒沙門(mén)菌、變形桿菌、金黃色葡萄球菌、白假絲酵母菌或內(nèi)源的腐生菌、條件致病菌的生長(zhǎng)繁殖。本研究結(jié)果表明，服用動(dòng)物雙歧桿菌CP-9 后，犬腸道中乳酸桿菌及雙歧桿菌等有益菌數(shù)量增多，而大腸桿菌數(shù)量降低。說(shuō)明動(dòng)物雙歧桿菌CP-9 可以改善犬腸道菌群。

大部分有害菌能產(chǎn)生氨和吲哚等代謝產(chǎn)物[4]。氨隨糞便排出后可對(duì)環(huán)境造成污染；吲哚等需要在肝臟中代謝解毒，隨尿以葡萄醛酸鹽和硫酸鹽等形式排出[5]。如果不能及時(shí)解毒，將導(dǎo)致肝功能紊亂和腎損傷[5]。本研究發(fā)現(xiàn)，動(dòng)物雙歧桿菌CP-9 可以顯著降低糞便中的氨和吲哚含量，這可能與其有調(diào)節(jié)腸道菌群的作用有關(guān)。此外，動(dòng)物雙歧桿菌CP-9可以提高糞中水分含量，促進(jìn)排便。綜上所述，動(dòng)物雙歧桿菌CP-9 可以改善犬腸道菌群，減少有害代謝物產(chǎn)生，促進(jìn)犬的健康成長(zhǎng)。