王玉涵，王欣然，李熠，2，3，4，周金慧，2，3，4*

（1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蜜蜂研究所，北京 100093；2.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部蜂產(chǎn)品質(zhì)量安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100093；3.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部蜂產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室（北京），北京 100093；4.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部蜂產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（北京），北京 100093）

在養(yǎng)蜂業(yè)中，蜂群易受到病毒的侵害，其中包括由慢性麻痹病毒或急性麻痹病毒引起的蜜蜂麻痹病（又叫“癱瘓病”、“黑蜂病”）[1]，這種成年蜜蜂傳染病，對(duì)蜜群的危害大，如不及時(shí)防治，會(huì)引起蜂蜜減產(chǎn)蜜蜂死亡等嚴(yán)重?fù)p失。酞丁安是一種抗病毒藥物，具有抗沙眼衣原體、皰疹病毒、金黃色葡萄球菌、鏈球菌、肺炎雙球菌和皮膚癬菌的作用，多用于單純皰疹、帶狀皰疹等[2-3]。酞丁安的化學(xué)結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖1。

圖1 酞丁安的化學(xué)結(jié)構(gòu)式Fig.1 Chemical structures of ftibamzone and chromatographic conditions

由圖1可知，結(jié)構(gòu)中的雙縮氨硫脲基團(tuán)為抗病毒的活性成分[4]，其作用機(jī)制主要是抑制病毒DNA和早期蛋白質(zhì)合成，對(duì)正常細(xì)胞的DNA合成幾乎無(wú)影響[5-6]。蜂農(nóng)通常通過(guò)飼喂含有酞丁安的飼料或在水溶液中加入酞丁安來(lái)防治蜜蜂麻痹病，但酞丁安藥物的不當(dāng)使用可能導(dǎo)致蜜蜂產(chǎn)生耐藥性，同時(shí)含有酞丁安殘留的蜂蜜被消費(fèi)者食用后可能引發(fā)系列過(guò)敏癥狀如皮膚的灼燒感、瘙癢、紅腫等，所以建立蜂蜜中酞丁安殘留檢測(cè)方法，對(duì)蜂蜜質(zhì)量進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)控，保障消費(fèi)者的身體健康是十分必要的。

目前為止，關(guān)于酞丁安類藥物的測(cè)定方法均為利用高效液相色譜法對(duì)酞丁安類藥物的成分含量以及純度的測(cè)定研究[6，7-9]，通過(guò)頂空氣相色譜法測(cè)定酞丁安中二氧六環(huán)來(lái)對(duì)酞丁安藥品進(jìn)行質(zhì)量控制，但世界各國(guó)尚沒(méi)有食品中殘留的酞丁安類藥物檢測(cè)方法的相關(guān)研究報(bào)道。因此，為保證我國(guó)蜂蜜的質(zhì)量安全和減少進(jìn)出口過(guò)程中的貿(mào)易壁壘，有必要建立一種準(zhǔn)確、可靠的分析方法，對(duì)蜂蜜中酞丁安殘留量進(jìn)行檢測(cè)。隨著質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry，HPLC-MS/MS）的廣泛適用性、靈敏度、分析速度以及定量準(zhǔn)確度，可滿足在食品復(fù)雜基質(zhì)中進(jìn)行痕量目標(biāo)分析物準(zhǔn)確篩查定量要求[10-12]。本研究中建立了對(duì)蜂蜜基質(zhì)快速高效的提取殘留酞丁安藥物的方法并采用HPLC-MS/MS法進(jìn)行定性、定量分析；考察了提取溶劑、固相萃取柱以及淋洗、洗脫條件等因素對(duì)蜂蜜中殘留酞丁安的提取、凈化效率的影響；對(duì)色譜和質(zhì)譜分析條件進(jìn)行了優(yōu)化，以達(dá)到分析樣品基質(zhì)中目標(biāo)物所需的分離、靈敏度和穩(wěn)定性。同時(shí)，本方法的建立可為其它食品中酞丁安殘留測(cè)定分析提供方法指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1290 HPLC高效液相色譜儀/6495三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀（配電噴霧電離源）：美國(guó)Agilent公司；G560E渦動(dòng)儀：美國(guó)Scientific Industries公司；1-15PK離心機(jī)：美國(guó)Sigma公司；Milli-Q純水發(fā)生器：美國(guó)Millipore公司；BSA124S電子天平：德國(guó)賽多利斯有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

酞丁安（CAS：210165-00-7，純度≥95%）：美國(guó)BioRuler公司；甲醇（色譜純）：美國(guó)MREDA公司；乙腈（色譜純）：賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司；甲酸（色譜純）：上海安譜試驗(yàn)科技有限公司；二氯甲烷（分析純）：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；PH苯基固相萃取柱（200 mg，6 mL）：美國(guó) Agilent公司；0.22 μm 聚四氟乙烯（poly tetra fluoroethylene，PTFE）濾膜：上海安譜實(shí)驗(yàn)科技有限公司；超純水為符合GB/T 6682—2008《分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法》中規(guī)定的一級(jí)水。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液制備

準(zhǔn)確稱取酞丁安標(biāo)準(zhǔn)品10 mg，用乙腈-二甲基亞砜（95∶5，體積比）溶解，配制成1 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，于-20℃棕色瓶中避光保存。根據(jù)檢測(cè)樣品中酞丁安的測(cè)定要求，用乙腈配制成 5、10、50、100、200、500、1000 μg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，于4℃棕色瓶中避光保存。

1.4 樣品前處理

1.4.1 樣品制備

未結(jié)晶的蜂蜜試樣將其用力攪拌均勻；對(duì)有結(jié)晶析出的蜂蜜樣品可將樣品瓶蓋塞緊后，置于不超過(guò)50℃的水浴中溫?zé)?，待樣品全部融化后攪勻，將蜂蜜試樣于室溫?5℃）下避光保存。

1.4.2 提取

稱取制備得到的蜂蜜樣品5.0 g（精確至±0.05 g）于50 mL具塞塑料離心管中，加入10 mL水，渦旋振蕩5 min，于4℃下8 000 r/min離心10 min，保留上清液。

1.4.3 凈化

PH苯基固相萃取柱使用前依次用10 mL甲醇和10 mL水活化，將離心后得到的上清液轉(zhuǎn)移至已活化的PH苯基柱中，調(diào)節(jié)流速以≤3 mL/min通過(guò)PH苯基柱，待上清液完全流出后，用10 mL 10%甲醇水淋洗，棄去流出液，負(fù)壓抽干，用10 mL 20%二氯甲烷/乙腈洗脫，洗脫液收集于15 mL離心管中，于40℃下氮吹至近干，1 mL乙腈復(fù)溶，經(jīng)0.22 μm PTFE有機(jī)濾膜過(guò)濾后進(jìn)行HPLC-MS/MS測(cè)定。

1.5 色譜條件

色譜柱：Poroshell 120 EC-C18色譜柱（3.0 mm×100 mm，2.7 μm）；流動(dòng)相：A：0.1%甲酸水溶液；流動(dòng)相B：乙腈。梯度洗脫：0～2.0 min，45%B；2.0 min～3.0 min，100%B；3.0 min～3.1 min，45%B；3.1 min～6.0 min，45%B。流速：0.3 mL/min；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣量：5 μL。

1.6 質(zhì)譜條件

電噴霧離子源（electrospray ionization source，ESI+）；正離子模式；掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（multiple reaction monitoring，MRM）；毛細(xì)管電壓：3 500 V；噴嘴電壓：0 V；干燥氣溫度：150 ℃；干燥氣流速：13 L/min；霧化器壓力：206.85 kPa；鞘氣溫度：325℃；鞘氣流速：11 L/min；噴嘴電壓：0 V；質(zhì)譜選擇離子參數(shù)設(shè)定見(jiàn)表1。

表1 質(zhì)譜選擇離子參數(shù)Table 1 MS parameters of mass spectrometry select ion

2 結(jié)果與討論

2.1 質(zhì)譜條件的確定

由于酞丁安具有多氨基結(jié)構(gòu)，在正電噴霧電離模式下可以很容易地獲得穩(wěn)定的分子離子[M+H]+。本試驗(yàn)中將1.0 mg/L的酞丁安標(biāo)準(zhǔn)溶液注入電噴霧離子源，正離子（ESI+）全掃描模式下獲得酞丁安分子離子[M+H]+。之后在碎片離子描模式下得到子離子信息。最后通過(guò)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）掃描模式對(duì)各子離子碰撞能進(jìn)行優(yōu)化，獲得最佳質(zhì)譜參數(shù)。

2.2 色譜條件的確定

流動(dòng)相體系的優(yōu)化是為了使待測(cè)物質(zhì)在分析過(guò)程中獲得最高的靈敏度，并與雜質(zhì)盡可能的分離，減少基質(zhì)的干擾。因此，對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行優(yōu)化是十分關(guān)鍵的。本研究比較了水-甲醇體系，和水-乙腈體系，發(fā)現(xiàn)在水-乙腈體系中酞丁安的質(zhì)譜響應(yīng)較高，此外，有機(jī)酸的添加有利于提高分析物在正離子模式下的離子化效率。在流動(dòng)相中加入0.1%甲酸時(shí)，獲得了更高的響應(yīng)值和更尖銳的峰形，因此最終選用0.1%甲酸水-乙腈體系作為流動(dòng)相。同時(shí)通過(guò)優(yōu)化流動(dòng)相洗脫程序、柱溫等色譜條件，使酞丁安與基質(zhì)中雜質(zhì)峰分離，并提高酞丁安在質(zhì)譜中的響應(yīng)。在優(yōu)化的質(zhì)譜和液相色譜條件下酞丁安標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 mg/L）MRM色譜圖見(jiàn)圖2。

圖2 酞丁安標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 mg/L）和空白蜂蜜基質(zhì)在最優(yōu)質(zhì)譜、色譜條件下MRM色譜圖Fig.2 MRM chromatogram offtibamzone standard solution at 1 mg/L and blank sample in optimal mass

2.3 樣品前處理方法優(yōu)化

2.3.1 提取劑優(yōu)化

蜂蜜易溶于水，因此本研究分別測(cè)試了水、0.1%甲酸水、0.4%NaOH溶液3種不同提取劑對(duì)蜂蜜基質(zhì)中目標(biāo)待測(cè)物的提取效果。結(jié)果表明，0.4%NaOH溶液無(wú)法從蜂蜜基質(zhì)中提取酞丁安。酞丁安雖然在堿性環(huán)境下易呈離子解離態(tài)且親水性增加[13]，但其在堿性環(huán)境中易被降解破壞[9]，導(dǎo)致酞丁安無(wú)法被有效提取。水和0.1%甲酸水均可從蜂蜜基質(zhì)中提取出酞丁安，當(dāng)0.1%甲酸水作為提取溶劑時(shí)，提取回收率為54.68%；當(dāng)水作為提取溶劑時(shí)，提取回收率為69.81%，酞丁安的質(zhì)譜響應(yīng)高且峰型尖銳對(duì)稱。因此，最終選用水作為提取溶劑。

2.3.2 凈化條件優(yōu)化

為實(shí)現(xiàn)蜂蜜基質(zhì)的凈化和酞丁安的保留富集，本試驗(yàn)中比較了Plexa、PCX、PAX、MAX、SAX以及PH苯基固相萃取柱的凈化效果。6種不同固相萃取柱凈化處理效果如圖3所示。

圖3 Plexa、PCX、PAX、MAX、SAX、PH 6種固相萃取柱凈化蜂蜜基質(zhì)中酞丁安的MRM色譜圖Fig.3 MRM chromatograms of purifying honey matrix using Plexa，PCX，PAX，MAX，SAX，and PH solid-phase extraction cartridges

酞丁安含有縮氨基硫脲結(jié)構(gòu)可解離為離子態(tài)，因此測(cè)試了離子交換型固相萃取柱的保留凈化效果。結(jié)果顯示，混合型陽(yáng)離子交換固相萃取小柱（PCX）、混合型陰離子固相萃取柱（PAX、MAX）對(duì)酞丁安幾乎無(wú)保留；SAX強(qiáng)陰離子交換型[14]固相萃取柱對(duì)酞丁安有少量保留，但酞丁安質(zhì)譜峰型較寬并存在基質(zhì)干擾。酞丁安無(wú)法在離子交換型固相萃取柱中有效保留，可能與酞丁安結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定易在前處理過(guò)程中出現(xiàn)降解有關(guān)[9]。酞丁安含有非極性的苯環(huán)結(jié)構(gòu)，苯環(huán)可與固相萃取柱上的特異性填料結(jié)合，從而實(shí)現(xiàn)酞丁安在固相萃取柱上的保留富集。本研究選取可與苯環(huán)基團(tuán)結(jié)合的Plexa非極性保留固相萃取柱[15]和PH苯基固相萃取柱進(jìn)行了測(cè)試，結(jié)果表明酞丁安可在PH苯基柱上得以保留并被洗脫，在Plexa柱上有極少保留。PH苯基柱主要通過(guò)待測(cè)物與固相萃取柱之間的疏水作用力使待測(cè)物保留于固相萃取柱上，同時(shí)PH苯基柱填料上的修飾基團(tuán)只與帶有苯環(huán)結(jié)構(gòu)的物質(zhì)結(jié)合[16]，而蜂蜜中含量最高的糖類物質(zhì)不具有苯環(huán)結(jié)構(gòu)，所以不能在PH苯基柱上保留，因此PH苯基柱可富集保留酞丁安，同時(shí)凈化基質(zhì)并降低雜質(zhì)干擾。

為進(jìn)一步去除基質(zhì)中的雜質(zhì)干擾，降低基質(zhì)效應(yīng)，提高目標(biāo)分析物回收率，對(duì)固相萃取凈化處理過(guò)程中淋洗和洗脫條件進(jìn)行優(yōu)化。本試驗(yàn)比較了不淋洗，水淋洗和10%甲醇水淋洗時(shí)固相萃取柱的凈化效果。不淋洗時(shí)回收率僅為16.52%，水淋洗時(shí)回收率為54.68%，10%甲醇水淋洗時(shí)，酞丁安回收率最高為82.18%。最終，選用10%甲醇水（10 mL）進(jìn)行淋洗。

進(jìn)一步對(duì)洗脫溶劑進(jìn)行選擇及優(yōu)化，以獲得酞丁安藥物的最佳回收。本試驗(yàn)中先后嘗試了采用甲酸-乙腈，NaOH-乙腈，二甲基亞砜-乙腈，丙酮-乙腈以及二氯甲烷-乙腈進(jìn)行洗脫處理。試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，二甲基亞砜-乙腈未能洗脫出酞丁安；甲酸-乙腈、NaOH-乙腈以及丙酮-乙腈體系洗脫效果均不理想。其中，甲酸-乙腈體系進(jìn)行洗脫時(shí)，隨酸含量增加其洗脫效率降低；NaOH-乙腈體系進(jìn)行洗脫時(shí)，隨NaOH含量的增高，其洗脫能力增強(qiáng)，但NaOH含量過(guò)高，不利于氮吹濃縮，且易產(chǎn)生[M+Na]+峰以及離子抑制效應(yīng)作用，不利于儀器檢測(cè)[17]；丙酮-乙腈體系進(jìn)行洗脫時(shí)，隨丙酮含量的升高，洗脫能力減弱；異丙醇-乙腈，氨化乙腈，二氯甲烷-乙腈體系，均可洗脫出酞丁安，但異丙醇-乙腈洗脫時(shí)回收率相較其他兩種體系較低，且氮吹濃縮時(shí)間較長(zhǎng)；氨化乙腈體系的洗脫回收率為53.8%～65.66%；二氯甲烷-乙腈體系的洗脫回收率為61.75%～69.81%。由于，二氯甲烷-乙腈體系洗脫能力強(qiáng)且回收率最高，可作為洗脫劑的較優(yōu)選擇。

為得到最佳洗脫效果，對(duì)二氯甲烷-乙腈體系洗脫劑比例進(jìn)行優(yōu)化。分別測(cè)試了10%、20%、30%、50%二氯甲烷-乙腈以及二氯甲烷對(duì)酞丁安的洗脫能力見(jiàn)圖4。

圖4 不同比例二氯甲烷-乙腈洗脫時(shí)蜂蜜中酞丁安的回收率和基質(zhì)效應(yīng)Fig.4 Recoveries and MES of ftibamzone in honey eluted with different volume ratios of dichloromethane-acetonitrile mixtures

結(jié)果表明，50%二氯甲烷-乙腈洗脫能力最強(qiáng)，但其基質(zhì)效應(yīng)最大，表現(xiàn)為接近10%的基質(zhì)抑制。同時(shí)通過(guò)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，隨二氯甲烷使用量的增加，洗脫液流經(jīng)固相萃取柱的時(shí)間以及氮吹濃縮時(shí)間也隨之延長(zhǎng)；20%二氯甲烷-乙腈和30%二氯甲烷-乙腈體系效果相當(dāng)，回收較好，且基質(zhì)增強(qiáng)在10%以內(nèi)，因此最終選用20%二氯甲烷-乙腈作為洗脫劑。

2.4 復(fù)溶液的選擇

本試驗(yàn)中對(duì)上機(jī)復(fù)溶液進(jìn)行了比較分析，測(cè)試了0.1%甲酸水以及乙腈的復(fù)溶效果。添加水平為1mg/kg的酞丁安提取物在不同復(fù)溶液中穩(wěn)定性變化如圖5所示。

圖5 酞丁安提取物經(jīng)不同復(fù)溶液0.1%甲酸水，乙腈復(fù)溶后的相對(duì)濃度Fig.5 The relative concentrations of ftibamzone extract in 0.1% formic acid and acetonitrile solvent

結(jié)果表明在0.1%甲酸水體系下，酞丁安在8h內(nèi)，出現(xiàn)明顯降解，而在乙腈體系中在8 h內(nèi)，幾乎不出現(xiàn)降解。本試驗(yàn)結(jié)果與余小平[18]關(guān)于酞丁安軟膏在二甲基甲酞胺中可穩(wěn)定存在6 h的研究相近。同時(shí)，乙腈作為復(fù)溶液時(shí)，色譜峰峰型對(duì)稱，沒(méi)有明顯的基質(zhì)影響，因此，最終選用乙腈為復(fù)溶液。

2.5 方法驗(yàn)證

2.5.1 方法線性關(guān)系

將1.3中乙腈溶劑配制濃度為5 μg/L～1 000 μg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液，對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)（X），做線性回歸。經(jīng)繪制峰面積（Y）與分析物濃度（X）的比值，得到了溶劑標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)曲線方程為Y=758.78X+2 893.9（R2=0.998 6）。結(jié)果表明，酞丁安在 5 μg/L～1 000μg/L范圍內(nèi)與其定量離子的響應(yīng)峰面積呈良好線性關(guān)系，線性相關(guān)系數(shù)大于0.99，滿足殘留分析的要求。

2.5.2 基質(zhì)效應(yīng)

基質(zhì)效應(yīng)指不同的樣品基質(zhì)在質(zhì)譜檢測(cè)（特別是使用電離源）時(shí)由于離子化效應(yīng)而產(chǎn)生的離子增強(qiáng)或抑制作用[19]。為獲得準(zhǔn)確的目標(biāo)物定量分析，評(píng)估樣品的基質(zhì)效應(yīng)是十分必要的?；|(zhì)效應(yīng)（%）計(jì)算公式為B/A×100，其中A表示溶劑標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)曲線的斜率，B表示基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率?；|(zhì)效應(yīng)低于100%時(shí)表明存在基質(zhì)抑制，高于100%時(shí)表明存在基質(zhì)增強(qiáng)。而且，基質(zhì)效應(yīng)在80%到120%之間被認(rèn)為是可被接受的低基質(zhì)效應(yīng)，小于80%或大于120%則被判定為是對(duì)目標(biāo)分析物定量產(chǎn)生影響的高基質(zhì)效應(yīng)[20]。

采用空白蜂蜜樣品（不含目標(biāo)化合物的蜂蜜基質(zhì)）經(jīng)1.3中制備得到空白基質(zhì)液，配制濃度為5 μg/L～1 000 μg/L的系列基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液，并按2.5.1計(jì)算得酞丁安樣品基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線方程Y=733.36X+2 166.8（R2=0.999 0）。用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線與溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率之比對(duì)基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果表明，基質(zhì)效應(yīng)為96.65%，基質(zhì)抑制效應(yīng)低于10%，因此本試驗(yàn)中采用溶劑配制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線溶液進(jìn)行定量分析。

2.5.3 方法檢出限

采用空白蜂蜜樣品（不含目標(biāo)化合物的蜂蜜基質(zhì)）經(jīng)1.3中制備得到空白基質(zhì)液中添加系列濃度的酞丁安標(biāo)準(zhǔn)溶液并進(jìn)行測(cè)定分析，根據(jù)6個(gè)空白樣品中基線噪音的平均值，以3倍信噪比（S/N=3）計(jì)算得到該方法檢測(cè)限；以10倍信噪比（S/N=10）計(jì)算得到該方法定量限。經(jīng)測(cè)定本方法檢測(cè)限和定量限分別為2μg/kg和 5 μg/kg。

2.5.4 方法加標(biāo)回收率和精密度

在空白蜂蜜樣品中分別添加3個(gè)不同濃度水平（5、50、200 μg/kg），每個(gè)水平設(shè) 6 個(gè)平行，設(shè)置 1 組空白對(duì)照。計(jì)算得到回收率及精密度，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 方法回收率、精密度、檢測(cè)限和定量限（n=6）Table 2 Recovery，precision，limit of detection and limit of quantification of the method（n=6）

蜂蜜樣品中酞丁安在3個(gè)添加濃度的回收率在82.41%～103.08%之間。日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.74%～7.73%；日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.30%～3.87%。由回收率和精密度可見(jiàn)，該方法準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性良好，可滿足殘留檢測(cè)的要求。

3 結(jié)論

本研究建立了高效液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜結(jié)合固相萃取凈化法測(cè)定蜂蜜中殘留的酞丁安藥物的定性篩查與定量分析方法。經(jīng)優(yōu)化的前處理方法便捷、高效，經(jīng)水提取，經(jīng)PH苯基固相萃取柱凈化蜂蜜基質(zhì)，可實(shí)現(xiàn)酞丁安藥物的有效提取與富集凈化，選擇的乙腈復(fù)溶溶液可實(shí)現(xiàn)在有效檢測(cè)時(shí)間內(nèi)保持酞丁安藥物的穩(wěn)定性。該方法的準(zhǔn)確度、精密度和靈敏度均經(jīng)過(guò)方法學(xué)評(píng)價(jià)，滿足殘留檢測(cè)的要求，本方法可用于準(zhǔn)確檢測(cè)蜂蜜中酞丁安殘留水平。本方法的建立與推廣應(yīng)用將助力于監(jiān)控蜂蜜品質(zhì)，保證蜂產(chǎn)品質(zhì)量安全，減少進(jìn)出口過(guò)程中的貿(mào)易壁壘，以及保障消費(fèi)者飲食健康安全。