鞠博名 王澤鑫 鮑琦文 陳東卓 徐銘鴻 竇薇

摘要：目的：探究臨床常見用藥中藥逍遙丸對(duì)昆明小鼠糖皮質(zhì)激素抑郁模型療效。方法：雌性昆明小鼠共60只，每組15只，共四組分別為：正常、對(duì)照、中藥、西藥組，除正常組外其余各組灌胃氫化可的松，每日一次，一次0.1ml，正常組同上式灌胃0.1ml生理鹽水，連續(xù)21天后，中藥與西藥分別采用逍遙丸與氟西汀進(jìn)行治療，制特定劑量混懸液分別灌胃，每日一次，一次0.1ml，正常與對(duì)照組同上式灌胃0.1ml生理鹽水，持續(xù)14d，末次給藥后對(duì)小鼠進(jìn)行行為學(xué)試驗(yàn)。結(jié)果：行為學(xué)試驗(yàn)中，中藥與西藥組分別與對(duì)照組比較有差異（P<0.01），分別與正常組比較有差異（P<0.05）中藥組與西藥組對(duì)比小部分?jǐn)?shù)據(jù)有差異（P<0.5）。結(jié)論：逍遙丸治療糖皮質(zhì)激素抑郁模型具有很好的效果且中劑量療效就已與氟西汀相當(dāng)。

關(guān)鍵詞：小鼠;抑郁/藥物作用;行為學(xué)試驗(yàn);糖皮質(zhì)激素;逍遙丸;中藥;氟西汀;

抑郁癥是一種常見、嚴(yán)重和致殘性的精神障礙，有高發(fā)病、高復(fù)發(fā)、高自殺、高自殘以及低診斷的特點(diǎn)，且其發(fā)病不限于年齡，種族等因素[1][2]，雖然西藥抗抑郁與發(fā)展前景較好，但西藥抗抑郁效果有限，毒副作用大，易產(chǎn)生耐藥性等，因此還面臨著許多問題，而中藥療效較好且副作用小，價(jià)格低廉，不易產(chǎn)生耐藥性與不良反應(yīng)[3]。

1.1材料

選用昆明雌性小鼠為實(shí)驗(yàn)研究動(dòng)物對(duì)象，開始時(shí)小鼠重18～21g，由齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.2實(shí)驗(yàn)使用藥物

逍遙丸 ：河南省濟(jì)源市濟(jì)世藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào) ：1901092，氫化可的松：國(guó)藥集團(tuán)容生制藥有限公司生產(chǎn)，氟西汀：（Patheon France（法國(guó)）生產(chǎn)商生產(chǎn)，禮來蘇州制藥有限公司，編號(hào)：8802A）。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1小鼠抑郁模型建立

用糖皮質(zhì)激素——?dú)浠傻乃晒辔阜绞皆炷！?/p>

1.3.2小鼠的分組及治療

分為正常，對(duì)照，中藥和西藥共四組，每組15只，適應(yīng)性喂養(yǎng)3d后，除正常組外，余組建立抑郁模型，三模型組每只每日0.1ml氫化可的松，正常組每只每日0.1ml生理鹽水，持續(xù)21d，后中藥組給予逍遙丸灌胃，將100丸逍遙丸溶于125ml蒸餾水中制成混懸液，劑量為0.3g/ml（每8丸相當(dāng)于飲片3g，200，100，50丸逍遙丸分別溶于125ml蒸餾水分別制成劑量為高劑量0.6g/ml，中劑量0.3g/ml，低劑量0.15g/ml，本實(shí)驗(yàn)采用中劑量0.3g/ml），每只灌胃0.1ml，西藥組給予氟西汀灌胃，每只灌胃0.1ml（10mg/kg），正常與對(duì)照組每組每只灌胃0.1ml生理鹽水，治療14d，末次給藥后進(jìn)行小鼠行為學(xué)實(shí)驗(yàn)。

二.評(píng)價(jià)指標(biāo)與方法

2.1強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)

有機(jī)玻璃自制長(zhǎng)寬高為30cm×30cm×20cm的鼠游泳盒，水深10cm，水溫保持在21℃～23℃，強(qiáng)迫每只鼠游泳6min后觀察記錄鼠接下來4min內(nèi)累計(jì)不動(dòng)時(shí)間。

2.2懸尾試驗(yàn)

將鼠尾部（距尾尖約1.5cm）用醫(yī)用膠布固定在水平木板上，鼠頭部距離實(shí)驗(yàn)臺(tái)約10cm，鼠保持倒懸狀態(tài)2min后，連續(xù)觀察4min內(nèi)實(shí)驗(yàn)鼠倒懸活動(dòng)狀態(tài)，記錄鼠身體下垂、完全不動(dòng)總時(shí)間。

2.3曠場(chǎng)試驗(yàn)

自制長(zhǎng)寬高分別為50cm×50cm×40cm的曠場(chǎng)箱，箱內(nèi)部涂成黑色，箱底正方形均分為25小格，沿箱壁的16方格記為外周格，中心9小格為中央格。鼠初始被放在中央格內(nèi)隨機(jī)位，記錄實(shí)驗(yàn)5min內(nèi)鼠對(duì)各區(qū)域的探索表現(xiàn)。

2.4高架十字迷宮試驗(yàn)

試驗(yàn)與分析方法同韋史利，趙學(xué)軍的研究[4]，將每只鼠隨機(jī)放置于高架十字平臺(tái)位置后，拉遮光簾形成暗環(huán)境通過攝像機(jī)及軟件記錄鼠在5min內(nèi)的各種活動(dòng)。

3.數(shù)據(jù)分析

spss22.0軟件分析，P分析計(jì)量資料采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用單因素方差分析比較組間差異，兩兩比較時(shí)，采用LSD校正組間差異，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

三.結(jié)果

以下結(jié)果敘述中，N為正常組，A為中藥逍遙丸組，B為西藥氟西汀組，C為對(duì)照組

3.1強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)

游泳不動(dòng)時(shí)間A，C和N有差異， B與C有差異。

3.2懸尾試驗(yàn)

懸尾不動(dòng)時(shí)間A，B，C和N有差異，A，B與C有差異。B的懸尾不動(dòng)時(shí)間顯著高于A。

3.3曠場(chǎng)試驗(yàn)

5min內(nèi)總格數(shù)A，C和N有差異，A和B與C之間有差異。5min內(nèi)九宮格靜止數(shù)，A，B以及和N有差異，A，B與C有差異。5min內(nèi)總靜止時(shí)間數(shù)，A，C和N有差異，A，B與C有差異。B的5min內(nèi)九宮格靜止數(shù)，顯著高于A。

3.4高架十字迷宮試驗(yàn)

（OE+CE），OE/ （OE+CE）和OT/ （OT+CT）均具有差異，兩兩比較發(fā)現(xiàn)，高架總次數(shù)A，B和N均與C有差異，次數(shù)百分比B和N均與C有差異，A和B與N之間有差異。時(shí)間百分比B和N均與C有差異，且A和B與N之間有差異。

四.分析

逍遙丸可追溯于宋代，首見于《太平惠民合劑局方》中逍遙散后制為丸劑，由君藥柴胡，臣藥當(dāng)歸、白芍，佐藥白術(shù)、茯苓、甘草、薄荷，君臣佐使配伍嚴(yán)謹(jǐn)性效及佳，具有疏肝解郁，養(yǎng)血健脾之功效，其治療范圍大，在臨床各個(gè)科室內(nèi)應(yīng)用廣泛，療效好，安全且穩(wěn)定，近幾年發(fā)現(xiàn)其對(duì)產(chǎn)后抑郁癥，老年期抑郁癥也具有療效[5]，且顏巧觀[6]和張華東，蘇慧[7]及孫淑榮[8]等人臨床研究顯示中藥逍遙丸聯(lián)合西藥使用進(jìn)行部分抑郁癥治療比單一使用西藥治療效果更好，具有重要臨床意義。

但抑郁癥發(fā)病機(jī)制，病理病因尚不明確。現(xiàn)在機(jī)制機(jī)理多為單胺假說，谷氨酸假說，應(yīng)激假說，去甲腎上腺素、5-羥色胺、多巴胺與其各自受體學(xué)說，乙酰膽堿能學(xué)說，HPA亢進(jìn)、HPT功能減退學(xué)說，神經(jīng)元與神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞自身變化等。[9][10]

蔡辰與陶河清[11]淺析后指出抑郁癥發(fā)病機(jī)制與5-HT含量下降，糖皮質(zhì)激素含量上升，谷氨酸含量上升以及海馬神經(jīng)元突觸可塑性降低有關(guān)，大多實(shí)驗(yàn)研究都集中在了HPA軸病理性亢進(jìn)從而引起了糖皮質(zhì)激素含量升高，吳斌[12]更是從中醫(yī)方面表示HPA與“腎”有極大聯(lián)系，由于糖皮質(zhì)激素破壞了人體腎之陰陽平衡導(dǎo)致了腎陽虛，且現(xiàn)在也有部分研究者如李雷[13]通過激素加減進(jìn)行治療，何貴平，包祖曉等人[14]指出糖皮質(zhì)激素是一種全新制造抑郁動(dòng)物模型方法，模型動(dòng)物會(huì)表現(xiàn)出一系列有關(guān)的“耗竭”現(xiàn)象，而這種現(xiàn)象又與腎陽虛臨床表現(xiàn)極其相似，所以由于這種HPA軸紊亂導(dǎo)致腎陽虛可能也是導(dǎo)致患者抑郁的病因。

通過觀察試驗(yàn)結(jié)果，行為學(xué)試驗(yàn)中，中藥和西藥組分別與對(duì)照（P<0.01）和正常組（P<0.05）相比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表示中藥和西藥均能夠治療糖皮質(zhì)激素抑郁模型小鼠，而中藥組與西藥組相比較僅有兩小點(diǎn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），大體可以認(rèn)為中劑量逍遙丸療效已與氟西汀的療效相當(dāng)，若采用高劑量療效可能會(huì)持平甚至超越。

因此逍遙丸可能是通過改善體內(nèi)5-HT、DA、NE等含量、并改善體內(nèi)HPA軸、HPT軸從而改善抑郁癥狀從而達(dá)成治療效果。

綜上所述，我們發(fā)現(xiàn)逍遙丸對(duì)于糖皮質(zhì)激素抑郁模型小鼠具有很好的療效，但具體對(duì)糖皮質(zhì)激素抑郁模型小鼠干預(yù)治療機(jī)理尚不明確，可為今后動(dòng)物抑郁模型以及逍遙丸治療抑郁癥提供思路與靶點(diǎn)。

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本文通訊作者 竇薇 齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院臨床病理診斷中心

大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目編號(hào)：201911230030