李莉 劉苗苗 丁宗博 王海波 張興龍 魏亦山

摘 要：本研究在標(biāo)準(zhǔn)方法《蔬菜中滅蠅胺殘留量的測(cè)定 高效液相色譜法》（NY/T 1725—2009）的基礎(chǔ)上，省掉凈化步驟，通過(guò)提取與濃縮，建立液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定蔬菜中的滅蠅胺分析方法。結(jié)果表明，采用簡(jiǎn)化后的前處理方法測(cè)定7種不同種類的樣品，在0.01～1.00 mg/L范圍內(nèi)，加標(biāo)回收率為78%～107%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.8%～5.5%，其回收率和精密度都能達(dá)到分析檢測(cè)要求。運(yùn)用該方法對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行分析，操作簡(jiǎn)單，準(zhǔn)確度高，可為蔬菜中滅蠅胺的批量快速檢測(cè)方法研究提供數(shù)據(jù)參考。

關(guān)鍵詞：液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法;蔬菜;滅蠅胺

滅蠅胺（Cyromazine）是一種三嗪類化合物，屬于強(qiáng)內(nèi)吸性昆蟲(chóng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，極性強(qiáng)，具有觸殺和胃毒作用。目前，滅蠅胺被廣泛用于豇豆、菜豆、黃瓜和茄子等農(nóng)作物的雙翅目昆蟲(chóng)病蟲(chóng)害防治中[1]。

《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2019）[2]規(guī)定，滅蠅胺殘留量指定的檢驗(yàn)方法為《蔬菜中滅蠅胺殘留量的測(cè)定 高效液相色譜法》（NY/T 1725—2009）[3]（以下簡(jiǎn)稱標(biāo)準(zhǔn)方法），但該方法的前處理步驟煩瑣、溶劑消耗量大，耗時(shí)長(zhǎng)，不適用于大批量檢測(cè)工作。因此，本研究通過(guò)簡(jiǎn)化前處理步驟，建立了快速檢測(cè)滅蠅胺殘留的樣品前處理方法，并采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析測(cè)定，為不斷探尋更優(yōu)質(zhì)、更快速的檢測(cè)方法具有重要的指導(dǎo)意義[4-5]。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

Agilent technologies 6460 Triple Quad LC/MS，配有ESI源，美國(guó)安捷倫公司;電子天平，奧豪斯有限公司;高速組織搗碎機(jī)，德國(guó)IKA公司;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，德國(guó)KNF。

滅蠅胺標(biāo)準(zhǔn)品，濃度為1 000 μg/mL，購(gòu)自農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（天津）;乙腈、甲醇、乙酸銨、甲酸、甲酸銨（色譜純）;實(shí)驗(yàn)用水為屈臣氏蒸餾水。

大白菜、番茄、蔥、蒜、香菇、西葫蘆和山藥，均購(gòu)自于市場(chǎng)，經(jīng)檢測(cè)均為陰性樣品;結(jié)球甘藍(lán)為能力驗(yàn)證剩余樣品（已知添加濃度）。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

①滅蠅胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：移取1 000 mg/L滅蠅胺標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL于100 mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，濃度為10 mg/L。②滅蠅胺標(biāo)準(zhǔn)中間液：移取1 mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液加入乙腈，定容至10 mL，配制成1 mg/L標(biāo)準(zhǔn)中間液。③滅蠅胺標(biāo)準(zhǔn)工作液：吸取100 μL標(biāo)準(zhǔn)中間液，加入900 μL空白基質(zhì)，配制成0.1 mg/L的基質(zhì)標(biāo)液。

1.3 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀器條件

1.3.1 色譜條件

色譜柱：Infinity Lab Proshell 120 EC -C18（2.7 μm，3.0×100 mm）;流動(dòng)相：A-水（含5 mmol/L甲酸銨+0.1%甲酸）、B-甲醇;梯度洗脫程序見(jiàn)表1，流速為0.4 mL/min，進(jìn)樣體積2 μL，柱溫40 ℃。

1.3.2 質(zhì)譜條件

離子源：AJS-ESI;掃描方式：正離子掃描;干燥氣溫度：285 ℃;干燥氣流速：10 L/min;鞘氣溫度：375 ℃;

鞘氣流速：12 L/min;霧化器35 psi;監(jiān)測(cè)模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）;定量/定性離子對(duì)：167.1/85.1、167.1/68.1。

1.4 樣品前處理

準(zhǔn)確稱取粉碎混勻后的試樣20 g（精確到0.01 g），加入乙酸銨-乙腈（1+4）溶液均質(zhì)、沖洗、過(guò)濾，并定容至100 mL具塞比色管中。用移液管準(zhǔn)確移取10 mL提取液至圓底燒瓶中，旋蒸濃縮至只含水的溶液（冷凝裝置無(wú)液滴滴下）。將只含水的溶液轉(zhuǎn)移至帶刻度線的10 mL樣品小管，加水定容至5 mL，混勻過(guò)0.22 μm濾膜，上液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定。

與標(biāo)準(zhǔn)方法相比，省去了凈化步驟，僅保留提取和濃縮步驟。

1.5 加標(biāo)回收試驗(yàn)

選取大白菜、番茄、蔥、蒜、香菇、西葫蘆和山藥7種空白基質(zhì)，添加0.1 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，平行測(cè)定6份，按上述前處理方法處理后上機(jī)測(cè)定，計(jì)算回收率和精密度。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性范圍

研究分析發(fā)現(xiàn)，滅蠅胺在0.01～1.00 mg/L范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，線性方程為y=16.311 8x（其中，y為響應(yīng)值;x為滅蠅胺的濃度，mg/L），線性相關(guān)系數(shù)r為0.999 4。

2.2 定量限

選取大白菜、香菇、蒜空白基質(zhì)，添加濃度為0.010 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，用上述方法平行測(cè)定6次，測(cè)得其平均回收率分別為92%、72%、75%，RSD分別為4.6%、5.4%、7.6%，其準(zhǔn)確度和精密度符合檢測(cè)要求，因此，將0.01 mg/L作為此方法滅蠅胺的定量限。

2.3 回收率和精密度

7種不同基質(zhì)的加標(biāo)回收和精密度結(jié)果見(jiàn)表2。從表2可以看出，在7種不同種類的基質(zhì)中，滅蠅胺的回收率比較穩(wěn)定，在78%～107%范圍內(nèi)，符合準(zhǔn)確度要求;同時(shí)，RSD在2.8%～5.5%，符合精密度要求，滿足檢測(cè)分析要求。

2.4 實(shí)際樣品分析

將能力驗(yàn)證的樣品結(jié)球甘藍(lán)（已知添加滅蠅胺的濃度為0.140 mg/L）用上述方法進(jìn)行前處理后上機(jī)測(cè)定，測(cè)得其結(jié)果為0.147 mg/L。

3 結(jié)論

本研究通過(guò)改進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)方法中的前處理步驟，僅通過(guò)提取和濃縮，省略了凈化步驟，建立了測(cè)定蔬菜中滅蠅胺殘留量的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法。該方法簡(jiǎn)單，快速、準(zhǔn)確可靠，既可滿足蔬菜中滅蠅胺殘留的技術(shù)要求，又可用于大量樣品的快速檢測(cè)。但是，由于省掉了凈化步驟，提取出的基質(zhì)會(huì)比標(biāo)準(zhǔn)方法更復(fù)雜，對(duì)色譜柱和儀器的污染程度會(huì)更高一些。因此，在平時(shí)的檢測(cè)過(guò)程中，要更加注意色譜柱的沖洗和儀器的維護(hù)保養(yǎng)。

參考文獻(xiàn)

[1]劉瑛，余晟，于峰，等.滅蠅胺的毒性研究[J].農(nóng)藥，2000，39（9）：25-33.

[2]國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)，中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部，國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局.食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量： GB 2763—2019[S].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2019.

[3]中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部.蔬菜中滅蠅胺殘留量的測(cè)定 高效液相色譜法：NY/T 1725-2009[S].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2009.

[4]趙馨.QuEChERS方法在HPLC測(cè)定豇豆中滅蠅胺殘留量的應(yīng)用研究[J].福建農(nóng)業(yè)科技，2020（8）：7-12.

[5]徐軍，張盈，董豐收，等.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速檢測(cè)菜豆及土壤中的滅蠅胺殘留[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2012，14（6）：654-658.