周珺珺，趙 潔，湯靜燕，蔣馬偉，馬秀梅，白永瑞

1.上海交通大學醫(yī)學院附屬仁濟醫(yī)院放射診療科，上海 200127；2.上海交通大學醫(yī)學院附屬上海兒童醫(yī)學中心血液腫瘤科，上海 200127；3.上海交通大學醫(yī)學院附屬新華醫(yī)院放射診療科，上海 200092

神經(jīng)母細胞瘤（neuroblastoma，NB）是兒童最高發(fā)的顱外實體腫瘤。NB患者群體間存在廣泛的異質(zhì)性，預(yù)后也隨著分期和危險因素不同有明顯差別。NB引起的癥狀多取決于腫瘤所侵犯的相應(yīng)器官。對于低危NB，年幼者可自行消退，單純手術(shù)也可以取得很好的療效。對于高危NB，目前國內(nèi)外多采用手術(shù)切除聯(lián)合化學治療（化療）及自體骨髓移植（autologous bone marrow transplantation，ABMT）或放射治療（放療）的綜合治療方式。即使采用了高強度的綜合治療，Ⅲ～Ⅳ期的高危及極高?；純?年生存率仍僅為30%～50%［1］。放療作為局部治療手段，在提高局部控制率及減輕晚期患兒腫瘤壓迫、出血、疼痛等癥狀方面的作用已明確，但接受放療患兒的臨床特征是否與預(yù)后相關(guān)仍不明確。本研究回顧性分析影響高危NB患兒放療效果的相關(guān)因素，探討高危NB患兒中放療的可能獲益人群，為規(guī)范多學科診療流程提供依據(jù)。

1 對象與方法

1.1 研究對象

納入2008年9月—2018年8月在上海交通大學醫(yī)學院附屬上海兒童醫(yī)學中心血液腫瘤科、附屬仁濟醫(yī)院，以及附屬新華醫(yī)院放射診療科接受放療的Ⅲ～Ⅳ期NB患兒共132例。納入標準：①病理按1999年國際神經(jīng)母細胞瘤病理學分類系統(tǒng)（The International Neuroblastoma Pathology Classification the Shimada System）或骨髓細胞學診斷確診。②通過X線檢查、B超、CT或MRI、PET-CT以明確腫瘤的原發(fā)部位、周圍組織受累程度，以及腫瘤轉(zhuǎn)移情況，且根據(jù)國際神經(jīng)母細胞瘤分期系統(tǒng)（International Neuroblastoma Staging System，INSS）判定為Ⅲ期或Ⅳ期。排除標準：①年齡小于18個月。②病例合并心、肝、腎等重要器官嚴重損害或嚴重的全身感染、敗血癥或膿毒血癥且未控制者。③晚期病例合并貧血、消瘦或處于惡病質(zhì)狀態(tài)或腫瘤所在臟器有穿孔可能或已經(jīng)穿孔者。本研究經(jīng)上海交通大學醫(yī)學院附屬上海兒童醫(yī)學中心倫理委員會批準，所有研究對象均簽署了知情同意書。

1.2 診斷及分期方法

首先根據(jù)神經(jīng)母細胞瘤病理組織學分類系統(tǒng)（the Shimada System）進行病理形態(tài)學分類；然后參照影像學定義的危險因素（image-defined risk factor，IDRF）評估疾病的危險程度：無IDRF的為L1，存在1項或多項IDRF的為L2；M為任何原發(fā)腫瘤伴有遠處淋巴結(jié)、骨髓、肝、皮膚和（或）其他器官播散（除Ms期），Ms為轉(zhuǎn)移僅限于皮膚、肝和（或）骨髓轉(zhuǎn)移（僅限于年齡小于18個月的嬰兒）。其中IDRF危險因子劃分的標準有：①單側(cè)病變，延伸到2個體腔，包括頸部-胸腔、胸腔-腹腔、腹腔-盆腔。②腫瘤包繞血管神經(jīng)、壓迫氣管、腫瘤侵及椎管。③鄰近器官/組織受累：包括心包、橫膈、腎臟、肝臟、胰-十二指腸和腸系膜。結(jié)合腫瘤可通過手術(shù)切除的程度，按INSS進行分期，可分為Ⅰ、ⅡA、ⅡB、Ⅲ、Ⅳ、Ⅳs期。最后綜合腫瘤分期、年齡、IDRF、MYCN原癌基因情況將病例危險度分為低、中、高、超高危4組［1］。并按照危險度的情況制定不同的治療方案。

1.3 治療方案

1.3.1 中危組方案 化療前或化療中（約4個療程）擇期手術(shù)，術(shù)后化療至部分緩解（partial response，PR）后進行4個療程，總療程不超過8個，必要時進行二次手術(shù)?；熃Y(jié)束后用13-順式-視黃酸（13-cis-RA）160 mg/m2維持治療，14 d/月，共6個月。

1.3.2 高危和超高危組治療方案 治療包括3個階段，即誘導(dǎo)期（包括化療和手術(shù)）、鞏固期（序貫移植及針對原發(fā)腫瘤以及殘余轉(zhuǎn)移部位的放療），以及鞏固期后維持治療（免疫治療和13-cis-RA）。具體實施：先化療2個療程后，進行自體骨髓干細胞采集，然后繼續(xù)化療2個療程后擇期手術(shù)；術(shù)后再化療2個療程，總療程不超過6個。常規(guī)化療結(jié)束后行ABMT和瘤床區(qū)放療（推薦行序貫ABMT，瘤床放療在2次ABMT之間進行）；之后進行免疫治療聯(lián)合13-cis-RA治療。

1.3.3 放療適應(yīng)證 大于18月齡高危及超高?；純盒杞邮茉l(fā)部位及轉(zhuǎn)移病灶的放療。姑息放療則適用于患兒病情進展危及生命器官，或腫瘤短時間內(nèi)明顯增大而影響呼吸系統(tǒng)或?qū)е孪到y(tǒng)梗阻，或患兒存在骨和軟組織轉(zhuǎn)移灶的疼痛、壓迫、出血等癥狀時。

1.4 放療實施流程

1.4.1 放療前定位準備 運用負壓成型真空墊或熱塑膜固定體位，Philips Brilliance大孔徑四維CT模擬定位機進行治療位CT掃描，層厚3～5 mm。幼兒如不能配合，需常規(guī)麻醉。

1.4.2 放療靶區(qū)的設(shè)定 腫瘤靶區(qū)（grosstumor volume，GTV），包括術(shù)前CT、MRI和PET等影像資料顯示的腫瘤，以及術(shù)中發(fā)現(xiàn)的腫瘤組織或轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)，并需要考慮在化療和手術(shù)治療后影像檢查提示的殘留腫瘤組織。臨床靶區(qū)（clinical target volume，CTV）是指亞臨床腫瘤區(qū)域，參考不同的解剖結(jié)構(gòu)和腫瘤生長方式界定。計劃靶區(qū)（planning target volume，PTV），一般由CTV外放0.5 cm。

1.4.3 放療范圍和劑量的界定 放療范圍包括化療前原發(fā)腫瘤、累及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)和轉(zhuǎn)移灶。如果照射野包括了椎體，則必須包括該脊椎椎體的全部寬度，避免發(fā)生嚴重的脊柱側(cè)彎畸形。靶區(qū)內(nèi)也包括了相鄰淋巴結(jié)區(qū)，以減少淋巴結(jié)區(qū)復(fù)發(fā)。對椎旁啞鈴形病灶，若為中線部位原發(fā)腫瘤，靶區(qū)包括脊柱內(nèi)外（髓內(nèi)部分及椎體外部分）。對于鞏固化療后達到完全緩解（completeresponse，CR）的病灶瘤床給予21.6 Gy照射劑量，而PR患者需在治療21.6 Gy后，選擇性對殘留病灶縮野加量14.4 Gy，總量為36 Gy。另外對需要骨髓移植的患者實施移植前全身照射（total body irradiation，TBI）。TBI采用2 Gy/次，2次/d，總量12 Gy的照射方法；對骨轉(zhuǎn)移及腹部或頸部軟組織轉(zhuǎn)移灶有疼痛壓迫等癥狀的患者則加用姑息減癥放療，放療劑量為30～36 Gy。

1.5 療效評估

無事件生存期（event-free survival，EFS）指從入組開始到發(fā)生任何事件的時間，包括死亡、疾病進展、加用其他治療、發(fā)生致死性或不耐受的副作用等事件。疾病進展定義為出現(xiàn)新病灶或原有病灶在影像學中評判增加＞25%?？偵嫫冢╫verall survival，OS）指從入組至因任何原因引起死亡的時間。隨訪時間截至2019年6月31日，終點事件為無事件發(fā)生情況和生存狀態(tài)。

1.6 統(tǒng)計學分析

2 結(jié)果

2.1 患者一般資料

NB患兒共132例，其中男76例、女56例；診斷時年齡≤24個月有21例，＞24～120個月的105例，＞120個月的6例。腫瘤分期為Ⅲ期48例、Ⅳ期83例、Ⅳs期1例；其中中危組6例（4.54%）、高危組48例（36.36%）、極高危組78例（59.10%），因此本組病例中多為預(yù)后不良的高危及極高?；純?。原發(fā)灶位于腹部81例、胸部15例、頭頸部3例、盆腔1例、多體腔累及32例。初診時骨髓浸潤68例、中樞神經(jīng)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移10例、肝臟轉(zhuǎn)移6例。接受ABMT 26例（19.69%），MYC N基因檢測陰性16例（12.12%）、突變81例（61.36%）、擴增35例（26.52%）；MYC N基因擴增病例中，放療后局部復(fù)發(fā)病例為15例，局部復(fù)發(fā)率為42.85%。本組資料中接受姑息放療的患兒46例，其中骨轉(zhuǎn)移灶姑息放療35例，劑量為30 Gy，療效評價PR+CR為24例，緩解率達到68.57%；給予腹部及頸部轉(zhuǎn)移灶軟組織壓迫的患者姑息放療11例，劑量為30～36 Gy，5例療效評價為PR+CR，緩解率為45.45%。

2.2 生存結(jié)果

全組接受放療的患兒132例，至隨訪結(jié)束時死亡34例，其中4例因并發(fā)重癥感染或多器官衰竭導(dǎo)致死亡。69例出現(xiàn)疾病進展，其中40例出現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)移，29例同時出現(xiàn)局部復(fù)發(fā)（包括靶區(qū)內(nèi)和靶區(qū)外）和遠處轉(zhuǎn)移；靶區(qū)外復(fù)發(fā)的有2例，出現(xiàn)在相鄰淋巴結(jié)區(qū)。中位隨訪時間為40.3個月，整組患兒1年、2年、3年、5年EFS率分別為87.41%、55.25%、45.02%、38.67%，OS率分別為96.02%、83.54.%、72.15%、57.79%（圖1）。

圖1 Ⅲ～Ⅳ期NB患兒OS（A）及EFS（B）曲線Fig 1 OS(A)and EFS(B)curves of the NB patients withⅢ-Ⅳstage

2.3 預(yù)后因素分析

單因素分析結(jié)果見表1。結(jié)果顯示：患兒疾病分期［EFS（P=0.002）和OS（P=0.024）］、危險度分組［EFS（P=0.002）和OS（P=0.036）］及有無腦轉(zhuǎn)移［EFS（P=0.000）和OS（P=0.001）］、血液乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）水 平［EFS（P=0.005）和OS（P=0.037）］及血清鐵蛋白水平［EFS（P=0.014）和OS（P=0.048）］與EFS和OS有關(guān)；有無骨髓浸潤［EFS（P=0.007）和OS（P=0.091）］影響EFS，但不影響患兒OS；病例性別、是否接受ABMT治療、M YCN基因擴增情況、有無肝臟浸潤等與EFS和OS均不相關(guān)。多因素分析提示，僅無腦轉(zhuǎn)移這1個因素為放療后OS［HR（95%CI）=0.179（0.027～0.891），P=0.029］和EFS［HR（95%CI）=0.246（0.069～0.885），P=0.032］的獨立預(yù)測因素。

表1 影響Ⅲ～Ⅳ期NB患兒EFS及OS的單因素分析Tab 1 Uni-variate analysisof OSand EFSin the NB patientswithⅢ-Ⅳstage

3 討論

NB是一類嚴重威脅兒童健康的惡性腫瘤，死亡人數(shù)占兒童腫瘤相關(guān)死亡總?cè)藬?shù)的15%左右［2］，多原發(fā)于腎上腺、后腹膜區(qū)域，易累及骨、骨髓、肝臟、淋巴結(jié)、皮膚及腦等。治療方案包括化療、手術(shù)、自體造血干細胞移植和放療等方式，后續(xù)輔以維甲酸或免疫治療加以維持。高危NB患者5年生存率一般為50%左右［1］。本研究分析結(jié)果顯示5年生存率為57.79%，略高于既往文獻報道數(shù)據(jù)。

Ⅲ～Ⅳ期患兒因腫瘤巨大、包繞血管或誘導(dǎo)化療效果欠佳等因素導(dǎo)致手術(shù)未能全切。有研究［1］顯示不完整切除術(shù)后輔以局部放療的局部控制率和生存情況與完整切除患者之間無明顯差異。高危NB的局部復(fù)發(fā)率為17%～74%，CCG3891研究［2］報告原發(fā)灶復(fù)發(fā)是主要的復(fù)發(fā)部位，提示加用外照射能夠提高局部控制率。對于NB的局部控制主要在于手術(shù)結(jié)合放療的模式應(yīng)用。CCG3891研究中539病例的放療與原發(fā)灶控制率及生存期之間有明顯正相關(guān)性［2］。同樣，NB97試驗亦表明無論在局部失敗率還是總生存期上，加用外照射的Ⅳ期NB患者均較未放療患者明顯得到獲益［3］。對于放療劑量的加量與生存的相關(guān)性也有研究探討過。COGANBL0532研究探索瘤床區(qū)加至36 Gy的高劑量放療，與COGA3973研究做歷史對照；后者所有病例均接受21.6 Gy放療。COGANBL0532研究組5年EFS率和OS率分別為56.2%和68.4%，而COGA3973組則分別為47.0%（P=0.009）和57.4%（P=0.009），可見加量放療對NB患者的EFS和OS均有所改善［4］。另一項研究［5］也提出了相同的結(jié)論，但對于轉(zhuǎn)移灶的姑息放療是否對預(yù)后有價值尚不能肯定。另外放療也會引起患兒長期不良反應(yīng)，如生長發(fā)育障礙、神經(jīng)認知問題、慢性腎功能不全或內(nèi)分泌紊亂等異常；尤其在全身系統(tǒng)化療后，TBI和外照射同時應(yīng)用的情況下，更有可能增加第二原發(fā)腫瘤的危險。

本組患兒采用的放療照射范圍和劑量模式顯示了良好的疾病控制效果。若有轉(zhuǎn)移病灶引起壓迫梗阻或疼痛的癥狀則加用姑息放療。對于骨和軟組織轉(zhuǎn)移灶，放療可有效止痛和改善壓迫或出血癥狀。研究［6］提示對于NB患兒骨轉(zhuǎn)移等部位放療后疼痛有緩解，PR+CR率為65%，軟組織轉(zhuǎn)移灶PR+CR率為67%。而本組患兒骨轉(zhuǎn)移灶姑息放療后疼痛PR+CR率達到69%；轉(zhuǎn)移灶姑息放療后PR+CR率為46%，因此姑息放療對患兒的臨床癥狀的減輕及生活質(zhì)量的提高有幫助。

既往研究［7］表明MYCN基因擴增會造成NB侵襲性增加，且多與較短的生存期相關(guān)。一項針對35例MYCN基因擴增NB患者的研究［8］中，97%為轉(zhuǎn)移性病變（24例為Ⅳ期，10例為Ⅳs期），所有患者都接受了21 Gy的局部放療；中位生存期為12個月，2年OS率為30%，2年EFS率為29%，較未擴增患者預(yù)后情況更差。另有一項回顧性研究［9］分析了58例NB患者，接受放療的患兒5年EFS和OS分別為36%和46%，而未接受放療者僅為22%和27%（P=0.026），其中多因素分析顯示存在MYCN擴增患者療效更差。MYCN基因擴增患者的局部復(fù)發(fā)率為（70±10）%［2］。而本組MYCN基因檢測擴增病例放療后局部復(fù)發(fā)率為43%，可見放療可減少局部區(qū)域復(fù)發(fā)，但此部分患者生存率與無MYCN基因擴增組無差異。一些與NB疾病相關(guān)的血液指標，如LDH、鐵蛋白等，與預(yù)后是否相關(guān)在多項研究中無明確一致性結(jié)果。本研究發(fā)現(xiàn)這些血液指標在單因素分析中與EFS和OS都有統(tǒng)計學意義，但多因素分析中未表現(xiàn)出具有統(tǒng)計學意義的相關(guān)性。

NB易出現(xiàn)多部位侵犯，且多預(yù)后不佳。本研究分析了骨髓、肝臟及腦轉(zhuǎn)移患者的生存狀況發(fā)現(xiàn)，初診時肝轉(zhuǎn)移與否不影響放療患者預(yù)后，但有無腦轉(zhuǎn)移為獨立預(yù)后因素。有研究者分析203例骨髓轉(zhuǎn)移的NB患兒給予放療聯(lián)合移植可進一步提高生存率［10］，該研究單因素分析顯示，LDH≥1 500 U/L及MYCN基因擴增者生存更差。而在本研究中骨髓浸潤的NB患兒與無浸潤患者相比，預(yù)后差異無統(tǒng)計學意義；LDH分組及MYCN基因擴增與否、是否進行過ABMT也未呈現(xiàn)出預(yù)后差異，可能臨床數(shù)據(jù)的欠缺導(dǎo)致缺乏了統(tǒng)計學效力。

綜上，本研究為針對Ⅲ～Ⅳ期患兒的回顧性分析，患兒多為高危及極高?；颊?，從總體生存情況看本年齡組OS率較以往文獻略高，提示包括放療在內(nèi)的綜合治療的必要性。多因素生存分析得出腦轉(zhuǎn)移為獨立預(yù)后指標，提示存在腦轉(zhuǎn)移的患兒預(yù)后不良。目前臨床應(yīng)充分利用各醫(yī)療單位的醫(yī)療資源，實施多學科聯(lián)合治療才能為病患取得最大的臨床獲益。但NB患兒多因遠端轉(zhuǎn)移未控而死亡，因此放療是否對所有Ⅲ～Ⅳ期患兒都有提高生存的作用仍無明確定論［5］。NB放療的研究目前多為回顧性分析，對高危獲益人群尚缺乏前瞻性、大樣本研究驗證。因此尚需大樣本研究和前瞻性隨機對照試驗的更多結(jié)果來指導(dǎo)臨床進行精準治療。

參·考·文·獻

[1] MacFarland S,Bagatell R.Advances in neuroblastoma therapy[J].Curr Opin Pediatr,2019,31(1):14-20.

[2] Haas-Kogan DA,Swift PS,Selch M,et al.Impact of radiotherapy for highrisk neuroblastoma:a Children's Cancer Group study[J].Int JRadiat Oncol Biol Phys,2003,56(1):28-39.

[3] Valteau-Couanet D,Michon J,Boneu A,et al.Results of induction chemotherapy in children older than 1 year with a stage 4 neuroblastoma treated with the NB 97 French Society of Pediatric Oncology(SFOP)protocol[J].JClin Oncol,2005,23(3):532-540.

[4] Liu KX,Naranjo A,Zhang FF,et al.Prospective evaluation of radiation dose escalation in patients with high-risk neuroblastoma and gross residual disease after surgery:a report from the children′s oncology group ANBL0532 study[J].JClin Oncol,2020,38(24):2741-2752.

[5] Arumugam S,Manning-Cork NJ,Gains JE,et al.The evidence for external beam radiotherapy in high-risk neuroblastoma of childhood:a systematic review[J].Clin Oncol(RColl Radiol),2019,31(3):182-190.

[6] Matthay KK,Haas-Kogan D,Constine LS.Neuroblastoma[M]//Halperin EC,Constien LS,Tarbell NJ,et al.Pediatric radiation oncology.5th ed.Philadelphia:Lippincott Williams&Wilkins,2011:108-136.

[7] Oberthuer A,Berthold F,Warnat P,et al.Customized oligonucleotidemicroarray gene expression-based classification of neuroblastoma patients outperforms current clinical risk stratification[J].JClin Oncol,2006,24(31):5070-5078.

[8] Canete A,Gerrard M,Rubie H,et al.Poor survival for infants with MYCNamplified metastatic neuroblastoma despite intensified treatment:the International Society of Paediatric Oncology European Neuroblastoma Experience[J].JClin Oncol,2009,27(7):1014-1019.

[9] de Ioris MA,Crocoli A,Contoli B,et al.Local control in metastatic neuroblastoma in children over 1 year of age[J].BMC Cancer,2015,15:79.

[10] 范洪君,黃程,蘇雁,等.伴骨髓轉(zhuǎn)移的高危神經(jīng)母細胞瘤患兒臨床特征及預(yù)后分析[J].中華兒科雜志,2019,57(11):863-869.