張 倩，陸云陽，劉 楊，湯海峰

大葉鐵線蓮乙醇提取物正丁醇部位的化學(xué)成分研究

張 倩，陸云陽，劉 楊，湯海峰*

空軍軍醫(yī)大學(xué) 藥學(xué)系，中藥與天然藥物學(xué)教研室，陜西 西安 710032

研究大葉鐵線蓮全草的化學(xué)成分。利用硅膠、Sephadex LH-20凝膠、ODS反相柱色譜和半制備高效液相色譜等分離方法進(jìn)行分離純化，結(jié)合核磁共振、質(zhì)譜等波譜學(xué)技術(shù)鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)。從大葉鐵線蓮全草75%乙醇提取物的正丁醇萃取部位分離鑒定了10個(gè)化合物，包括三萜皂苷6個(gè)、黃酮苷1個(gè)、木栓烷型三萜2個(gè)和植物甾醇1個(gè)，分別為3,23-二羥基-齊墩果-18-烯-28-酸--α--吡喃鼠李糖基-(1→4)-β--吡喃葡萄糖基-(1→6)-β--吡喃葡萄糖苷（1）、刺楸皂苷B（2）、粗齒鐵線蓮皂苷B（3）、刺五加苷A1（4）、皂苷PJ3（5）、異株五加苷B（6）、金絲桃苷（7）、木栓酮（8）、表木栓醇（9）和β-谷甾醇（10）?；衔?是新化合物，命名為大葉鐵線蓮皂苷D；化合物2～9均為首次從大葉鐵線蓮中分離得到。

大葉鐵線蓮；3,23-二羥基-齊墩果-18-烯-28-酸--α--吡喃鼠李糖基-(1→4)-β--吡喃葡萄糖基-(1→6)-β--吡喃葡萄糖苷；大葉鐵線蓮皂苷D；刺楸皂苷B；粗齒鐵線蓮皂苷B；刺五加苷A1；木栓酮

毛茛科（Ranunculaceae）鐵線蓮屬L.植物在全球分布廣泛，有350多種，其中93種為我國特有，85種為藥用植物[1-2]。該屬植物自古因其利尿通淋、祛風(fēng)止痛的藥用價(jià)值而被廣泛使用，如《證類本草》中記載的川木通和最早收錄在《集驗(yàn)方》中的威靈仙[3-4]。《中國藥典》2020年版也收載了川木通和威靈仙[5]。大葉鐵線蓮DC. 作為鐵線蓮屬藥用植物，主要分布于我國華中和西南地區(qū)，常見于山坡溝谷、林邊及路旁的灌叢中[6]，常以全草或根莖入藥，用于治療風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛風(fēng)、皮膚炎癥、瘺管等病[7]。國內(nèi)外學(xué)者對大葉鐵線蓮的化學(xué)成分研究較少，活性研究也以粗提物為主[8]?；谡n題組前期對大葉鐵線蓮全草化學(xué)成分的初步探究[9]，為了進(jìn)一步明確其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，從而為大葉鐵線蓮的開發(fā)與利用提供理論依據(jù)，本實(shí)驗(yàn)繼續(xù)對其75%乙醇水提取物的正丁醇層萃取部位進(jìn)行化學(xué)成分研究，共分離得到10個(gè)化合物，分別鑒定為3,23-二羥基-齊墩果-18-烯-28-酸--α--吡喃鼠李糖基-(1→4)-β--吡喃葡萄糖基-(1→6)-β--吡喃葡萄糖苷[3,23-dihydroxyolean-18-en-28-oic acid--α--rhamnopyransyl-(1→4)-β--glucopyranosyl- (1→6)-β--glucopyranoside，1]、刺楸皂苷B（kalopanax saponin B，2）、粗齒鐵線蓮皂苷B（clemargenoside B，3）、刺五加苷A1（ciwujianoside A1，4）、皂苷PJ3（saponin PJ3，5）、異株五加苷B（sieboldianoside B，6）、金絲桃苷（hyperin，7）、木栓酮（friedelin，8）、表木栓醇（epifriedelinol，9）和β-谷甾醇（βsitosterol，10）?；衔?是新化合物，命名為大葉鐵線蓮皂苷D，化合物2～9均為首次從大葉鐵線蓮中分離鑒定。

1 儀器與材料

電子分析天平（賽多利斯科學(xué)儀器公司）；XT5型顯微熔點(diǎn)測定儀（北京科儀電光儀器廠）；Quatrro 質(zhì)譜儀（Micromass公司）；PL343型旋光儀（Perkin-Elmer公司）；AVANCE 500型超導(dǎo)核磁共振儀、AVANCE 800型超導(dǎo)核磁共振儀（Bruker公司）；戴安P680高效液相色譜儀（戴安公司，P680系列單泵、UV-VS檢測器、CHROMELON工作站）；Agilent GC-6820氣相色譜儀 [Agilent公司，配HP-5彈性石英毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm），氫火焰離子化檢測器]；柱色譜硅膠（100～200、200～300目，青島海洋化工廠）；薄層色譜用硅膠H（青島海洋化工廠）；Rp-18高效薄層預(yù)制硅膠板G（Merck公司）；ODS C18填料（Pharmacia公司）；Sephadex LH-20柱（北京歐亞新技術(shù)公司）；-(三甲基硅基)咪唑（Sigma公司）；對照品-葡萄糖（-Glc）、-核糖（-Rib）、-鼠李糖（-Rha）、-阿拉伯糖（-Ara）和-木糖（-Xyl），Sigma公司；試劑均為分析純；制備液相所用試劑均為色譜純。

藥材于2014年9月采自陜西省寶雞市太白山，經(jīng)陜西中醫(yī)藥大學(xué)王繼濤教授鑒定為大葉鐵線蓮DC. 的全草，標(biāo)本（20140909）存于空軍軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)系中藥與天然藥物學(xué)教研室。

2 提取與分離

取干燥大葉鐵線蓮全草6 kg，粉碎，用10倍體積的75%乙醇加熱回流提取3次，每次2 h，合并濾液并減壓蒸餾至無醇味，將得到的浸膏加水分散，水溶液用等體積石油醚萃取4次，回收石油醚層，再加入等體積的水飽和正丁醇萃取3次，合并正丁醇層溶液，減壓蒸餾得到浸膏130 g。取100 g浸膏用硅膠拌樣后進(jìn)行硅膠柱色譜分離，用三氯甲烷-甲醇-水系統(tǒng)（50∶1∶0～65∶35∶10）梯度洗脫，得到12個(gè)組分（Fr. A～L）。Fr. A采用Sephadex LH-20柱色譜分離，流動相為三氯甲烷-甲醇（1∶1），得到化合物8（32 mg）、9（70 mg）和10（110 mg）；Fr. F進(jìn)行Sephadex LH-20柱色譜，三氯甲烷-甲醇（1∶1）洗脫除去雜質(zhì)，再進(jìn)行半制備高效液相色譜分離，流動相為85%甲醇，得到化合物7（R＝10.3 min，32 mg）；Fr. G進(jìn)行硅膠柱色譜，用三氯甲烷-甲醇-水系統(tǒng)（10∶1∶0～8∶1∶0.1）梯度洗脫，再結(jié)合Sephadex LH-20柱色譜和半制備高效液相色譜（流動相為65%甲醇）分離，得到化合物5（R＝12.9 min，18 mg）；Fr. J利用Sephadex LH-20柱色譜和ODS反相柱色譜（依次以30%、50%和70%甲醇洗脫）分離，結(jié)合半制備高效液相色譜（流動相為35%甲醇）純化，得到化合物2（R＝18.7 min，3 mg）、3（R＝16.2 min，8 mg）和4（R＝14.5 min，16 mg）；Fr. K通過硅膠柱色譜，以三氯甲烷-甲醇-水系統(tǒng)（8∶2∶0.2～7∶2.5∶0.25）梯度洗脫，再結(jié)合Sephadex LH-20柱色譜和半制備高效液相色譜（流動相為65%甲醇）分離，得到化合物6（R＝20.6 min，34 mg）；Fr. L利用Sephadex LH-20柱色譜、ODS反相柱色譜（依次以30%、50%、70%甲醇溶液洗脫）分離，結(jié)合半制備高效液相色譜（流動相為55%甲醇）純化，得到化合物1（R＝33.3 min，30 mg）。

3 皂苷類化合物酸水解

稱取化合物1～6各1.5 mg分別加入2 mL三氟乙酸（2 mol/L）中，120 ℃加熱2 h，蒸干溶劑，分別向反應(yīng)物中加入二氯甲烷和水進(jìn)行萃取。蒸干水層，向殘留物中加入1 mL無水吡啶溶液和2 mL-半胱氨酸甲酯鹽酸鹽的無水吡啶溶液（0.1 mol/L），60 ℃加熱2 h，氮?dú)獯蹈桑患尤? mL吡啶和0.5 mL-(三甲基硅基)咪唑，60 ℃加熱1 h，蒸干溶液，以正己烷和水萃取，有機(jī)相層進(jìn)行GC分析（氣化室250 ℃；柱溫180～250 ℃，5 ℃/min；檢測器280 ℃；進(jìn)樣量1 μL；載氣為氮?dú)猓10]。通過比較標(biāo)準(zhǔn)糖衍生物和樣品單糖衍生物的保留時(shí)間確定化合物中的單糖的種類。標(biāo)準(zhǔn)糖衍生物的保留時(shí)間分別為-Glc為16.78 min、-Ara為9.65 min、-Xyl為13.43 min、-Rha為12.31 min和-Rib為9.16 min。

4 結(jié)構(gòu)鑒定

1H-NMR (500 MHz, pyridine-5) 數(shù)據(jù)（表1）高場區(qū)顯示6個(gè)角甲基的信號峰H0.83、0.95、0.99、1.05、1.05和1.17，1個(gè)烯氫的寬單峰信號H5.25 (1H, brs, H-19)。在HSQC譜中可依次找到相應(yīng)的6個(gè)角甲基碳信號C15.6、17.7、29.5、13.3、16.8和31.0。結(jié)合13C-NMR (125 MHz, pyridine-5) 譜C175.8 (C-28) 和C73.7 (C-3) 信號，提示C-28位形成酯苷鍵，C-3位未形成氧苷鍵。推測化合物1為齊墩果烷型皂苷。在HMBC譜（圖1）中，H2.30 (H-21) 和1.42 (H-16) 信號與C138.2信號存在遠(yuǎn)程偶合關(guān)系，而H5.25信號與C41.6 (C-13)、49.1 (C-17)、33.9 (C-21)、32.6 (C-20)、29.5 (C-29) 和31.0 (C-30) 均存在相關(guān)峰，因此可以推測雙鍵位置在C-18(19) 位。結(jié)合1H-1H COSY、HMBC、TOCSY、HSQC、NOESY譜，可歸屬苷元上的所有碳、氫信號（表1）。對照文獻(xiàn)報(bào)道[11]的具有C-18(19) 雙鍵的金盞花皂苷A（calendasaponin A），其碳譜數(shù)據(jù)基本一致，進(jìn)一步驗(yàn)證了化合物1的苷元結(jié)構(gòu)與該化合物相同，即黃蓮木酸。對化合物1進(jìn)行酸水解后制備衍生物[12-13]，經(jīng)GC分析，確定化合物1所含糖為-Glc、-Rha，比例為2∶1。1H-NMR譜中發(fā)現(xiàn)3個(gè)糖的端基氫信號H6.36 (1H, d,= 8.5 Hz, GlcI-H-1) 5.85 (1H, brs, Rha-H-1), 4.95 (1H, d,= 8.0 Hz, GlcII-H-1)；HSQC譜匹配到相應(yīng)糖基的端基碳信號：C96.2 (GlcI-C-1), 103.1 (Rha-C-1), 105.3 (GlcII-C-1)。由葡萄糖基端基氫偶合常數(shù)= 8.5 Hz可得糖苷鍵的相對構(gòu)型為β；鼠李糖基的端基氫信號為寬單峰，3位和5位碳的化學(xué)位移值分別為：C73.1 (Rha-C-3) 和C70.6 (Rha-C-5)，可判斷出相應(yīng)糖苷鍵為α構(gòu)型[14]。結(jié)合TOCSY譜，可通過1H-1H COSY譜歸屬所有糖基的氫信號，再通過HSQC譜歸屬了所有糖基的碳信號。HMBC譜中，可觀察到GlcI-H-1/C-28, GlcII-H-1/GlcI-C-6以及Rha-H-1/ GlcII-C-4相關(guān)，從而確定了糖基與苷元和各糖基之間的連接位點(diǎn)與順序。這些信息可以通過NOESY譜得到進(jìn)一步的驗(yàn)證，見圖1。

表1 化合物1的13C-NMR (125 MHz) 和1H-NMR (500 MHz) 數(shù)據(jù)

圖1 化合物1的結(jié)構(gòu)式及主要HMBC和NOESY相關(guān)

綜上，化合物1結(jié)構(gòu)鑒定為3,23-二羥基-齊墩果-18-烯-28-酸--α--吡喃鼠李糖基-(1→4)-β--吡喃葡萄糖基-(1→6)-β--吡喃葡萄糖苷，經(jīng)SciFinder數(shù)據(jù)庫查詢，確定其為新化合物，命名為大葉鐵線蓮D（clemahergenoside D）。

化合物5：白色無定形粉末，易溶于吡啶和甲醇；Lieberman-Buchard反應(yīng)與Molish反應(yīng)均呈陽性，與10%硫酸顯色劑呈紫紅色；ESI-MS/: 1203 [M－H]?。采用與化合物1相同方法進(jìn)行酸水解，檢出Glc、Rha和Ara，經(jīng)過GC分析確定它們的比例為2∶2∶1。1H-NMR (800 MHz, pyridine-5): 0.91 (3H, s, H-25), 0.92 (3H, s, H-29), 0.93 (3H, s, H-30), 0.98 (3H, s, H-26), 1.11 (3H, s, H-24), 1.26 (3H, s, H-27), 1.29 (3H, s, H-23), 5.40 (1H, brs, H-12), 5.80 (1H, brs, 3--Ara-H-1), 6.27 (1H, brs, 3--Rha-H-1), 6.18 (1H, d,= 8.0 Hz, 28-- GlcI-H-1), 5.02 (1H, d,=7.4 Hz, 28--GlcII-H-1), 4.80 (1H, d,= 6.0 Hz, 28--Rha-H-1)；13C-NMR (200 MHz, pyridine-5): 38.8 (C-1), 26.5 (C-2), 88.5 (C-3), 39.3 (C-4), 55.6 (C-5), 18.3 (C-6), 33.0 (C-7), 39.8 (C-8), 48.0 (C-9), 36.8 (C-10), 23.6 (C-11), 123.0 (C-12), 144.0 (C-13), 41.9 (C-14), 28.1 (C-15), 23.2 (C-16), 46.8 (C-17), 41.5 (C-18), 46.0 (C-19), 30.5 (C-20), 33.8 (C-21), 32.3 (C-22), 28.0 (C-23), 16.8 (C-24), 15.3 (C-25), 17.3 (C-26), 25.8 (C-27), 176.3 (C-28), 33.0 (C-29), 23.5 (C-30)。由HMBC譜發(fā)現(xiàn)糖鏈連接順序?yàn)镃-3位Rha(1→2)Ara-和C-28位Rha(1→4)GlcII(1→6)GlcI-, 104.3 (3--Ara-C-1), 75.3 (3--Ara-C-2), 73.9 (3--Ara-C-3), 68.6 (3--Ara-C-4), 64.5 (3--Ara-C-5), 101.3 (3--Rha-C-1), 72.6 (3--Rha-C-2), 72.4 (3--Rha-C-3), 73.8 (3-Rha-C-4), 70.0 (3--Rha-C-5), 18.3 (3--Rha-C-6), 95.8 (28--GlcI-C-1), 73.5 (28--GlcI-C-2), 78.3 (28--GlcI-C-3), 70.7 (28--GlcI-C-4), 78.0 (28--GlcI-C-5), 69.0 (28--GlcI-C-6), 104.7 (28--GlcII-C-1), 75.3 (28--GlcII-C-2), 76.4 (28--GlcII-C-3), 78.0 (28--GlcII-C-4), 76.9 (28--GlcII-C-5), 61.0 (28--GlcII-C-6), 102.6 (28--Rha-C-1), 72.4 (28--Rha-C-2), 72.3 (28--Rha-C-3), 73.8 (28--Rha-C-4), 69.7 (28--Rha-C-5), 18.3 (28--Rha-C-6)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)基本一致[18]，故鑒定化合物5為皂苷PJ3。

化合物6：白色無定形粉末，易溶于吡啶和甲醇，Lieberman-Buchard反應(yīng)與Molish反應(yīng)均呈陽性，與10%硫酸顯色劑呈紫紅色，ESI-MS/: 1335 [M－H]?。采用與化合物1相同方法進(jìn)行酸水解，檢出Glc、Rha、Xyl和Ara，經(jīng)過GC分析確定它們的比例為2∶2∶1∶1。1H-NMR (800 MHz, pyridine-5): 0.90 (3H, s, H-25), 0.91 (3H, s, H-29), 0.93 (3H, s, H-30), 0.97 (3H, s, H-26), 1.12 (3H, s, H-24), 1.27 (3H, s, H-27), 1.28 (3H, s, H-23), 5.42 (1H, brs, H-12), 5.87 (1H, brs, 3--Ara-H-1), 6.32 (1H, brs, 3--Rha-H-1), 6.25 (1H, brs, 3--Xyl-H-1), 5.01 (1H, d,= 8.0 Hz, 28--GlcI-H-1), 4.85 (1H, d,= 6.4 Hz, 28--GlcII-H-1), 5.37 (1H, d,= 7.6 Hz, 28--Rha-H-1)；13C-NMR (200 MHz, pyridine-5): 39.2 (C-1), 27.0 (C-2), 89.1 (C-3), 39.9 (C-4), 56.3 (C-5), 18.8 (C-6), 33.4 (C-7), 40.2 (C-8), 48.3 (C-9), 37.3 (C-10), 24.1 (C-11), 123.2 (C-12), 144.4 (C-13), 42.4 (C-14), 28.6 (C-15), 23.6 (C-16), 47.3 (C-17), 41.9 (C-18), 46.5 (C-19), 31.0 (C-20), 34.3 (C-21), 32.8 (C-22), 28.5 (C-23), 17.5 (C-24), 16.0 (C-25), 17.8 (C-26), 26.4 (C-27), 176.9 (C-28), 33.4 (C-29), 24.0 (C-30)。經(jīng)過HMBC譜發(fā)現(xiàn)糖鏈連接順序?yàn)椋篊-3位Xyl(1→3)Rha(1→2)Ara-和C-28 Rha(1→4)GlcII(1→6)GlcI-, 105.6 (3--Ara-C-1), 75.6 (3--Ara-C-2), 75.2 (3--Ara-C-3), 69.8 (3--Ara-C-4), 65.5 (3--Ara-C-5), 101.7 (3--Rha-C-1),72.4 (3--Rha-C-2), 81.5 (3-Rha-C-3), 73.1 (3--Rha-C-4), 70.2 (3--Rha-C-5), 18.8 (3--Rha-C-6), 106.7 (3--Xyl-C-1), 75.3 (3--Xyl-C-2), 78.4 (3--Xyl-C-3), 70.9 (3--Xyl-C-4), 66.1 (3--Xyl-C-5), 95.9 (28--GlcI-C-1), 74.2 (28--GlcI-C-2), 79.0 (28--GlcI-C-3), 71.1 (28--GlcI-C-4), 78.3 (28--GlcI-C-5), 69.4 (28--GlcI-C-6), 105.1 (28--GlcII-C-1), 75.6 (28--GlcII-C-2), 76.8 (28--GlcII-C-3), 78.5 (28--GlcII-C-4), 77.4 (28--GlcII-C-5), 61.5 (28--GlcII-C-6), 103.0 (28--Rha-C-1), 72.9 (28--Rha-C-2), 73.0 (28--Rha-C-3), 74.3 (28--Rha-C-4), 70.6 (28--Rha- C-5), 18.8 (28--Rha-C-6)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)基本一致[19]，故鑒定化合物6為異株五加苷B。

化合物7：淡黃色晶體（氯仿-甲醇），易溶于二甲基亞砜，mp 225～226 ℃；Molish反應(yīng)呈陽性；ESI-MS/487 [M＋Na]+, 463 [M－H]?，推測分子式為C21H20O12。1H-NMR (500 MHz, DMSO-6): 12.63 (1H, s, 5-OH), 10.88 (1H, s, 7-OH), 9.76 (1H, s, 4′-OH), 9.10 (1H, s, 3′-OH), 7.64 (1H, dd,= 8.2, 1.6 Hz, H-6′), 7.51 (1H, d,= 1.6 Hz, H-2′), 6.80 (1H, d,= 8.3 Hz, H-5′), 6.44 (1H, d,= 2.0 Hz, H-6), 6.24 (1H, d,= 2.0 Hz, H-8), 5.43 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1′′), 5.20 (1H, d,= 4.5 Hz, 4′′-OH), 4.88 (1H, d,= 5.5 Hz, 2′′-OH), 4.43 (2H, m, 3′′, 6′′-OH), 3.64 (1H, m, H-6′′b), 3.62 (1H, m, H-6′′a), 3.50 (1H, m, H-5′′), 3.39 (1H, m, H-4′′), 3.37 (1H, m, H-2′′), 3.30 (1H, m, H-3′′)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 156.4 (C-2), 133.7 (C-3), 177.9 (C-4), 161.4 (C-5), 98.9 (C-6), 164.2 (C-7), 93.7 (C-8), 156.4 (C-9), 103.9 (C-10), 122.0 (C-1′), 115.2 (C-2′), 144.9 (C-3′), 148.5 (C-4′), 115.9 (C-5′), 120.9 (C-6′), 101.7 (C-1′′), 71.1 (C-2′′), 73.1 (C-3′′) , 67.9 (C-4′′), 75.8 (C-5′′), 60.1 (C-6′′)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)基本一致[20]，故鑒定化合物7為金絲桃苷。

化合物8：白色針狀結(jié)晶（石油醚-丙酮），易溶于石油醚和氯仿，mp 257～258 ℃；與10%硫酸甲醇顯色劑反應(yīng)呈紫紅色。ESI-MS/449 [M＋Na]+，推測分子式為C30H50O。1H-NMR (500 MHz, CDCl3): 0.70 (3H, s, H-24), 0.83 (3H, s, H-25), 0.84 (3H, d,= 6.2 Hz, H-23), 0.94 (3H, s, H-26), 0.97 (3H, s, H-27), 0.98 (3H, s, H-28)；13C-NMR (125 MHz, CDCl3): 22.2 (C-1), 41.6 (C-2), 213.1 (C-3), 58.1 (C-4), 42.2 (C-5), 41.2 (C-6), 18.3 (C-7), 53.0 (C-8), 37.4 (C-9), 59.4 (C-10), 35.7 (C-11), 30.4 (C-12), 39.6 (C-13), 38.2 (C-14), 32.4 (C-15), 35.9 (C-16), 29.8 (C-17), 42.7 (C-18), 35.2 (C-19), 28.3 (C-20), 32.7 (C-21), 39.3 (C-22), 6.8 (C-23), 14.5 (C-24), 17.8 (C-25), 20.3 (C-26), 18.7 (C-27), 32.0 (C-28), 35.1 (C-29), 31.8 (C-30)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)基本一致[21]，故鑒定化合物8為木栓酮。

化合物9：白色針狀晶體（甲醇），易溶于三氯甲烷，mp 284～286 ℃；與10%硫酸甲醇顯色劑反應(yīng)呈紫紅色。ESI-MS正離子模式下/451 [M＋Na]+，推測分子式為C30H52O。1H-NMR (500 MHz, CDCl3) 譜可觀察到8個(gè)甲基峰1.19 (3H, s, H-28), 1.02 (3H, s, H-27), 1.01 (3H, s, H-26), 0.99 (3H, s, H-29), 0.98 (3H, s, H-30), 0.93 (3H, s, H-23), 0.92 (3H, s, H-25)和0.87 (3H, s, H-24),3.73是C-3位的氫；13C-NMR (125 MHz, CDCl3): 22.2 (C-1), 35.3 (C-2), 72.6 (C-3), 49.3 (C-4), 37.3 (C-5), 41.7 (C-6), 17.6 (C-7), 53.4 (C-8), 37.9 (C-9), 61.0 (C-10), 35.5 (C-11), 30.4 (C-12), 38.3 (C-13), 39.6 (C-14), 32.2 (C-15), 36.0 (C-16), 30.0 (C-17), 42.7 (C-18), 35.2 (C-19), 28.0 (C-20), 32.7 (C-21), 39.3 (C-22), 11.5 (C-23), 16.3 (C-24), 18.0 (C-25), 18.5 (C-26), 20.0 (C-27), 31.9 (C-28), 35.2 (C-29), 32.3 (C-30)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)基本一致[22]，故鑒定化合物9為表木栓醇。

化合物10：無色針狀結(jié)晶（氯仿），易溶于甲醇；mp 136～139 ℃，Lieberman-Buchard反應(yīng)呈陽性，與10%硫酸顯色劑呈紫紅色反應(yīng)；經(jīng)與對照品β-谷甾醇共薄層，在3種溶劑系統(tǒng)中與對照品Rf值相同，且混合熔點(diǎn)不下降，故鑒定化合物10為β-谷甾醇。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Chemical constituents of-BuOH fraction from ethanolic extract of

ZHANG Qian, LU Yun-yang, LIU Yang, TANG Hai-feng

Department of Chinese Materia Medica and Natural Medicines, Pharmacy School, Air Force Medical University, Xi’an 710032, China

To investigate the chemical constituents from the whole plants of.The-BuOH part of 75% ethanol extraction of the whole plants was isolated by slilica gel, Sephadex LH-20, ODS column chromatographies and semi-preparative HPLC. The structures of compounds were identified by NMR, MS, and other spectroscopic techniques.Ten compounds, including 3,23-dihydroxyolean-18-en-28-oic acid--α--rhamnopyransyl-(1→4)-β-- glucopyranosyl-(1→6)-β--glucopyranoside (1), kalopanax saponin B (2), clemargenoside B (3), ciwujianoside A1(4), saponin PJ3(5), sieboldianoside B (6), hyperin (7), friedelin (8), epifriedelinol (9), and βsitosterol (10) were isolated and identified.Compound 1 is a new compound named clemahergenoside D, and compounds 2—9 are isolated from the whole plants offor the first time.

DC.; 3,23-dihydroxyolean-18-en-28-oic acid--α--rhamnopyranosyl-(1→4)-β--glucopyranosyl-(1→6)-β--glucopyranoside; clemahergenoside D; kalopanax saponin B; clemargenoside B; ciwujianoside A1; friedelin

R284.1

A

0253 - 2670(2021)17 - 5185 - 07

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.17.008

2021-07-16

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81274029）

張 倩（1990—），女，博士，主要從事天然藥化研究。Tel: 17791539129 E-mail: qianqiangoodok@163.com

湯海峰（1971—），男，沈陽藥科大學(xué)1998級博士研究生藥物化學(xué)專業(yè)校友。主任藥師、教授，博士生導(dǎo)師，空軍軍醫(yī)大學(xué)藥物研究所所長、藥學(xué)系中藥與天然藥物學(xué)教研室主任，空軍軍醫(yī)大學(xué)中藥學(xué)一級學(xué)科學(xué)科帶頭人，空軍高層次科技人才；主要從事天然藥化研究和中藥、海洋藥物開發(fā)，曾獲得軍隊(duì)和省級科技獎勵(lì)6項(xiàng)、社會力量辦獎6項(xiàng)。Tel: (029)84711551 E-mail: tanghaifeng71@163.com

[責(zé)任編輯 王文倩]