張輕棉閆磊磊

（1.寶豐縣疾病預(yù)防控制中心檢驗科，河南寶豐467400；2.寶豐縣人民醫(yī)院檢驗科，河南寶豐467400）

布魯氏桿菌病是由布魯氏桿菌引起的人畜共患傳染病，該病細(xì)菌傳播途徑包括皮膚接觸、呼吸道和消化道等，傳播速度快，任何年齡的人都可能感染該類疾病，急性發(fā)作期患者會出現(xiàn)發(fā)熱、多汗、肝脾和淋巴結(jié)腫大、關(guān)節(jié)痛等臨床表現(xiàn)[1-2]。若患者得不到及時有效的治療，病情就會逐漸向慢性疾病轉(zhuǎn)變，這將大大增加治療難度。因此，早期診斷對布魯氏桿菌病患者具有重要意義。目前實驗室篩查和診斷布氏桿菌病常用虎紅平板凝集實驗（RBPT）和試管凝集實驗（SAT）[3-4]，但對兩種診斷效能仍存在爭議。鑒于此，本研究分析RBPT檢測對布魯氏桿菌病病情診斷準(zhǔn)確率的影響，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇2018年10月至2019年10月我中心收集的220例疑似布魯氏桿菌病的受檢者血清標(biāo)本，其中男150例，女70例；年齡25～70歲，平均年齡（46.98±6.32）歲。所有受檢者均需進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，主要詢問是否與牛、豬、羊等動物接觸過，患者應(yīng)符合發(fā)熱、出汗、肌肉和關(guān)節(jié)疼痛、反復(fù)發(fā)作等臨床表現(xiàn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：自愿簽署同意書；無精神異常者。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重臟器功能障礙者；合并血液系統(tǒng)或免疫系統(tǒng)疾病者。本研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 RBPT：實驗前，確認(rèn)RBPT中使用的凝集抗原在標(biāo)記的有效期內(nèi)，保存溫度在4～6℃之間，微量移液槍測定合格。用微量移液槍取虎紅平板凝集抗原30μL，滴于干凈的玻片上，取待測血清樣品30μL，使二者在玻片上充分混合，靜置5min后觀察結(jié)果。目測是否凝集，若可見凝集顆粒則為陽性（+），若未見凝集顆粒則為陰性（-）。

1.2.2 SAT：實驗前，確認(rèn)SAT中使用的布魯氏菌溶液在標(biāo)記的有效期內(nèi)，恒溫培養(yǎng)箱經(jīng)測量檢驗合格，按照說明書進(jìn)行檢測。

1.3 評價指標(biāo)：所有受試者的血清樣本進(jìn)行抗人球蛋白試驗、病原體分離試驗，以實驗室綜合檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，比較RBPT與SAT兩種血清學(xué)檢測方法的檢出率、靈敏度、特異性與準(zhǔn)確率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法：運用SPSS18.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計數(shù)資料用%表示，采用χ2檢驗，一致性采用Kappa檢驗（Kappa＞0.75表明一致性極好，0.4-0.75表明一致性較為理想，＜0.4表明一致性差），P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

表2 SAT與實驗室綜合檢查結(jié)果對比

2 結(jié)果

2.1 檢查結(jié)果：以實驗室綜合檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，220例布魯氏桿菌病的受檢者中，共有80例血清標(biāo)本檢查結(jié)果呈陽性。

2.2 RBPT與SAT檢測結(jié)果比較：RBPT對血清標(biāo)本的陽性檢出率為87.50%，RBPT對血清標(biāo)本的檢測結(jié)果具有極好的的一致性（Kappa=0.822）；SAT對血清標(biāo)本的陽性檢出率為87.50%，RBPT對血清標(biāo)本的檢測結(jié)果具有較為理想的一致性（Kappa=0.607），詳見表1，2。2.3 RBPT與SAT診斷布魯氏桿菌病的指標(biāo)評價：與SAT比較，RBPT檢測布魯氏桿菌病的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度均較高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），詳見表3。

表1 RBPT與實驗室綜合檢查結(jié)果對比

表3 RBPT與SAT檢測布魯氏桿菌病的指標(biāo)評價比較（%）

3 討論

布魯氏桿菌病是由革蘭陰性桿菌引起的動物源性傳染性疾病，布魯氏菌病的發(fā)病率在接觸受感染的動物和屠宰者以及經(jīng)常飲用未經(jīng)消毒的乳制品的人群中最高，該病菌普遍通過直接接觸感染者潰爛的皮膚，攜帶傳染病菌的病人粘液，或者吃帶有傳染病菌的食物等途徑來傳播。因此，需要一種檢出率及靈敏度較高的檢測方法，通過早期檢測、早期診斷、早期治療等，確保人民的生命安全[5-6]。

本研究表明，RBPT對血清標(biāo)本的陽性檢出率為87.50，RBPT對血清標(biāo)本的檢測結(jié)果具有極好的的一致性（Kappa=0.822）；SAT對血清標(biāo)本的陽性檢出率87.50%，RBPT對血清標(biāo)本的檢測結(jié)果具有較為理想的一致性（Kappa=0.607），與SAT比較，RBPT檢測布魯氏桿菌病的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度均較高，分析其原因在于，SAT是臨床上最早用來診斷布魯氏菌病的免疫分析方法，具有較高的特異性和敏感性，但該檢測方法存在主觀性較強、費時、不能準(zhǔn)確區(qū)分魯氏桿菌病是經(jīng)過人工免疫還是自然感染的缺點，且SAT需要大量的血清樣本和抗原，檢測時間長（實驗結(jié)果需在24h后獲得），容易耽誤患者的治療時間，檢測成本較高，而且通過人眼觀測到的測試結(jié)果（渾濁度）存在一定誤差，不易達(dá)到預(yù)期值[7-8]。布魯氏桿菌病經(jīng)RBPT診斷速度較快，該方法通過激活I(lǐng)gG的活性，去除血清中的非特異性凝集素，操作簡便，是將待測血清樣品直接與相應(yīng)抗原混合，檢測時間短（5min即可獲取檢測結(jié)果）。同時，檢測中所使用的相應(yīng)檢測抗原是酸性的，因此具有良好的特異性，且大多用于急慢性患者的檢測，具有較高的準(zhǔn)確性[9-10]。

綜上所述，布魯氏桿菌病病情通過RBPT檢測具有較高的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度，具有重要的臨床應(yīng)用價值。