馬玲,余靜
作者單位:德陽市人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科,四川德陽618000
系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種累及機(jī)體多系統(tǒng)的自身免疫性疾病,臨床常伴隨產(chǎn)生大量自身抗體。目前,SLE發(fā)病原因尚未完全闡明,臨床上多認(rèn)為與感染、內(nèi)分泌、免疫異常等因素有關(guān),雖然上述因素對評估SLE疾病活動度具有重要作用,但仍有部分SLE病人無法正確判斷其疾病活動程度。因此,應(yīng)繼續(xù)探討與SLE病人發(fā)病相關(guān)因子,以提高判斷SLE病人疾病活動度準(zhǔn)確性。人附睪蛋白4(Human epididymis protein 4,HE4)是一種蛋白酶抑制劑,其功能與自然免疫性有關(guān)。而抗雙鏈DNA抗體(anti-dsDNA,抗dsDNA抗體)是SLE臨床檢測常用的血清標(biāo)志物,與SLE疾病活動性密切相關(guān)。鑒于此,本研究通過檢測SLE病人血清HE4、抗dsDNA抗體水平等臨床指標(biāo),分析SLE病人血清HE4和抗dsDNA抗體水平與疾病活動性關(guān)系,并探討血清HE4、抗dsDNA抗體水平區(qū)分SLE病人非活動期及活動期的價值。
1.1 一般資料
選取2017年1月至2018年12月在德陽市人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科進(jìn)行診治的74例SLE病人作為受試對象,其中女性68例,男性6例;年齡(32.98±10.75)歲,范圍為20~45歲。本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會赫爾辛基宣言》相關(guān)要求。入選標(biāo)準(zhǔn):①均符合1997年美國風(fēng)濕病學(xué)會對SLE修訂的分類標(biāo)準(zhǔn);②臨床資料完整;③均為初次發(fā)??;④均自愿簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):①伴有其他自身免疫性疾病者;②女性妊娠或哺乳期;③近3個月內(nèi)未服用過糖皮質(zhì)激素類藥物;④嚴(yán)重感染者。按照SLE病情活動指數(shù)(SLE disease activity index,SLEDAI)評分將74例SLE病人分為非活動期組35例(SLEDAI<10分)和活動期組39例(SLEDAI≥10分)。非活動期組有女性32例、男性3例,年齡(32.01±10.46)歲,范圍為20~44歲;活動期組有女性36例、男性3例,年齡(33.12±10.67)歲,范圍為20~45歲。另選取同期在該院進(jìn)行體檢的57例健康者作為對照組,其中女性52例,男性5例;年齡(33.57±11.24
)歲,范圍為20~46歲。上述三組受試者性別、年齡比較,均差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P
>0.05)。1.2 方法
1.2.1
血清標(biāo)本采集所有受試者均于入院第2天清晨空腹抽血(靜脈血),每人3 mL,3 000 r/min離心10 min,分離血清后保存于-80℃超低溫冰箱備用。1.2.2
血清HE4、抗dsDNA抗體水平檢測采用酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)雙抗體夾心法檢測血清HE4、抗dsDNA抗體水平,HE4試劑盒購自上海心語生物科技有限公司,抗dsDNA抗體試劑盒購自北京華夏遠(yuǎn)洋科技有限公司,具體步驟按試劑盒說明書進(jìn)行。血清抗dsDNA抗體起始稀釋倍數(shù)為1∶10,本研究以<1∶10作為陰性(n
=32),≥1∶10作為陽性(n
=42)。1.2.3
其他臨床指標(biāo)檢測采用免疫散射比濁法檢測補(bǔ)體(C、C)、免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)水平,試劑盒均購自德國西門子公司;采用間接免疫熒光法檢測抗核抗體(antinuclear antibody,ANA),試劑盒由歐蒙醫(yī)學(xué)診斷(中國)有限公司提供,其起始稀釋倍數(shù)為1∶100,本研究中低滴度為1∶10≤血清ANA≤1∶1 000,高滴度為血清ANA>1∶1 000;采用比色法檢測24 h尿蛋白定量。2.1 對照組與SLE病人血清HE4、抗dsDNA抗體水平比較
SLE病人血清HE4、抗dsDNA抗體水平分別為(83.44±26.53)pmol/L、(1.53±0.49)μg/L,均顯著高于對照組的(39.16±8.25)pmol/L、(0.42±0.13)μg/L(t
=12.147、16.644,均P
<0.001)。2.2 SLE病人血清HE4水平與抗dsDNA抗體關(guān)系
SLE病人抗dsDNA抗體陽性血清HE4水平為(99.34±30.69)pmol/L,明顯高于抗dsDNA抗體陰性者的(58.16±17.52)pmol/L(t
=6.788,P
<0.001),且SLE病人血清HE4與抗dsDNA抗體水平呈正相關(guān)(r
=0.698,P
<0.001)。2.3 SLE病人血清HE4水平與病情活動性關(guān)系
SLE活動期病人SLEDAI評分、血清HE4水平分別為(14.95±4.07)分、(95.76±29.55)pmol/L,均明顯高于非活動期的(6.52±2.13)分、(60.34±18.12)pmol/L(t
=10.974、6.130,均P
<0.001),且SLE病人血清HE4水平與SLEDAI評分呈正相關(guān)(r
=0.587,P
<0.001)。2.4 SLE病人血清HE4水平與其他臨床指標(biāo)相關(guān)性
SLE病人血清HE4水平與補(bǔ)體(C、C)水平呈負(fù)相關(guān)(P
<0.05),與IgA、IgG、IgM、ANA滴度及24 h尿蛋白定量均呈正相關(guān)(P
<0.05)。見表1。表1 SLE病人血清HE4水平與其他臨床指標(biāo)相關(guān)性
2.5 ROC曲線分析血清HE4、抗dsDNA抗體水平區(qū)分非活動期及活動期SLE病人價值
血清HE4水平區(qū)分非活動期及活動期SLE病人的曲線下面積為0.912(95%CI
:0.848~0.977,P
<0.001),最佳截斷值為80.15 pmol/L,靈敏度為85.00%,特異度為90.00%;血清抗dsDNA抗體水平區(qū)分非活動期及活動期SLE病人的曲線下面積為0.904(95%CI
:0.836~0.973,P
<0.001),最佳截斷值為1.39 μg/L,靈敏度為75.00%,特異度高達(dá)97.50%。見圖1。圖1 血清人附睪蛋白4(HE4)、抗雙鏈DNA抗體(抗dsDNA抗體)水平區(qū)分非活動期及活動期系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人的ROC曲線
SLE是一種免疫介導(dǎo)引起機(jī)體多組織器官損傷的慢性炎癥性疾病,多發(fā)于青年女性。SLE發(fā)病原因涉及環(huán)境、遺傳和免疫紊亂等多個環(huán)節(jié),在多種因素相互作用下可使機(jī)體產(chǎn)生許多自身抗體,同時在補(bǔ)體參與下可破壞細(xì)胞、組織,從而導(dǎo)致機(jī)體多臟器損傷。目前,SLE常用臨床檢測指標(biāo)包括ANA滴度、補(bǔ)體C、C等,監(jiān)測其水平變化對評估SLE疾病活動性具有一定幫助,但在區(qū)分SLE活動期與非活動期上效果不顯著。因此,本研究通過分析SLE病人血清HE4和抗dsDNA抗體水平與疾病活動性關(guān)系,并采用ROC曲線評估其在區(qū)分SLE是否在活動期的價值,以期為SLE臨床治療提供幫助。
HE4首次發(fā)現(xiàn)于人附睪上皮細(xì)胞中,位于人染色體20q12~13.1,其編碼產(chǎn)物蛋白質(zhì)與精子成熟有關(guān)。HE4為乳清酸蛋白(WAP)基因編碼產(chǎn)物,可通過4-二硫化物核心結(jié)構(gòu)域發(fā)揮作用,因此又稱WAP-4-二硫化物核心結(jié)構(gòu)域2(WFDC2)。研究發(fā)現(xiàn)HE4可編碼胰蛋白酶抑制物,在抵抗微生物毒力因子上發(fā)揮重要作用,還參與多種疾病的免疫防御功能,可能發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。因此探討血清HE4水平對SLE病人具有重要意義。楊曉霞等研究報道,慢性腎臟病病人血清HE4水平遠(yuǎn)高于正常對照組,血清HE4水平與病人臨床分期、腎間質(zhì)纖維化比例等有關(guān),且可作為評估慢性腎臟病病人預(yù)后的血清標(biāo)志物。孟騫等研究發(fā)現(xiàn),與對照組比較,子宮內(nèi)膜異位癥病人血清HE4水平顯著升高,血清HE4可作為子宮內(nèi)膜異位癥的診斷依據(jù)。安黎云等研究報道,慢性腎臟病各期病人血清HE4水平與對照組比較均明顯升高,且ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)血清HE4水平對慢性腎臟病診斷價值較高。而抗dsDNA抗體是SLE病人體內(nèi)重要的特異性抗體,其在SLE發(fā)生、發(fā)展中扮演著重要角色;且有研究發(fā)現(xiàn),抗dsDNA抗體陽性可在一定程度上提示SLE處于活動期,因此研究血清HE4水平與抗dsDNA抗體關(guān)系具有一定臨床意義。已有研究報道,抗dsDNA抗體參與狼瘡腎炎發(fā)生、發(fā)展,并與SLE病人疾病活動性有關(guān)。
本研究檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對照組相比,SLE病人血清HE4、抗dsDNA抗體水平均顯著升高,與楊曉霞等、孟騫等研究報道類似,提示血清HE4、抗dsDNA抗體水平可能參與SLE發(fā)病過程。為探討血清HE4水平與抗dsDNA抗體及病情活動性關(guān)系,本研究發(fā)現(xiàn)SLE病人抗dsDNA抗體陽性血清HE4水平遠(yuǎn)高于抗dsDNA抗體陰性者,SLE活動期病人SLEDAI評分、血清HE4水平均遠(yuǎn)高于非活動期病人,且相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)SLE病人血清HE4水平與抗dsDNA抗體水平及SLEDAI評分均呈正相關(guān),提示血清HE4水平與抗dsDNA抗體密切相關(guān),并可在一定程度上反映SLE病人的疾病活動性。本研究還發(fā)現(xiàn),SLE病人血清HE4水平與補(bǔ)體(C、C)水平呈負(fù)相關(guān),與IgA、IgG、IgM、ANA滴度及24 h尿蛋白定量均呈正相關(guān),進(jìn)一步提示血清HE4水平與SLE活動程度有關(guān)。此外,本研究通過ROC曲線發(fā)現(xiàn),血清HE4水平、抗dsDNA抗體水平均可有效區(qū)分非活動期及活動期SLE病人,且血清HE4水平效能優(yōu)于血清抗dsDNA抗體水平,與安黎云等研究結(jié)果相似,提示血清HE4水平更有利于檢測SLE病人疾病活動程度,從而為臨床治療提供一定幫助。
綜上所述,血清HE4、抗dsDNA抗體水平在SLE病人中明顯升高,二者水平變化與SLE病人疾病活動性有關(guān),可作為區(qū)分活動期及非活動期SLE病人的有效指標(biāo),尤其是血清HE4水平。本研究僅初步探討血清HE4水平與SLE病人疾病活動性關(guān)系,接下來應(yīng)進(jìn)一步研究證實。