徐佳璐，顧艷麗，劉佳，呂曉潔，李瑞娟（內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，呼和浩特 010110）

PF-3758309（PF-309）是一種以吡唑?yàn)槟负诉x擇性作用于p21 活化激酶（p21-activated kinases，PAKs）的絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑，可以競(jìng)爭(zhēng)性地結(jié)合PAKs 的ATP 位點(diǎn)，阻斷信號(hào)傳導(dǎo)，抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡，從而發(fā)揮靶向作用[1]。PF-309在臨床研究中用于晚期轉(zhuǎn)移性實(shí)體瘤的治療，對(duì)不同類型的腫瘤細(xì)胞株均表現(xiàn)出廣泛的抑制作用[2]，但PF-309 口服生物利用度較低，水溶性不高以及藥物穩(wěn)定性較差等特點(diǎn)限制了其臨床藥效[3]。脂質(zhì)體是新型的納米藥物遞送系統(tǒng)，以卵磷脂為主要膜材，脂質(zhì)雙分子層與生物膜成分相似，組織相容性良好，脂質(zhì)體包載下不僅能提高難溶藥物的溶解度，增強(qiáng)藥物的治療效果，還能提高藥物的生物相容性，從而減少給藥劑量，降低藥物的毒副作用[4-5]。利用脂質(zhì)體的包埋技術(shù)使得藥物的釋放具有一定的緩釋作用，可以提高被包埋藥物的穩(wěn)定性，適合靜脈注射使用。脂質(zhì)體作為藥物載體具有淋巴趨向性，抗癌藥物包封于脂質(zhì)體中，能使藥物選擇性地殺傷癌細(xì)胞，增加藥物對(duì)淋巴的定向性，改變藥物在組織中的分布。本課題制備PF-309 脂質(zhì)體（Lip@PF-309），并以包封率為考察指標(biāo)，通過正交實(shí)驗(yàn)篩選最優(yōu)制備工藝條件并對(duì)其進(jìn)行體外質(zhì)量評(píng)價(jià)，為PF-309 新劑型研究提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

1260 vialsampler 高效液相色譜儀（安捷倫科技有限公司）；ZD-85 雙功能氣浴恒溫振蕩器（常州金壇良友儀器有限公司）；S2-100V2 型納米粒度分析儀（HORIBA日本公司）；SB25-12 DTD超聲波清洗機(jī)（寧波新芝生物科技股份有限公司）；N-1300D 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（東京理化器械株式會(huì)社）；S4800 掃描電鏡（國(guó)儀量子公司）；BFX5-320 型低速自動(dòng)平衡離心機(jī)（白洋離心機(jī)廠）；UpHW-II-90T 超純水器（四川優(yōu)普超純科技有限公司）；TU-1901 型雙光束紫外可見分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）；FDU-2110型冷凍干燥機(jī)（上海愛朗儀器有限公司）；VOS-310C 真空定溫干燥箱（東京理化器械株式會(huì)社）；Thermo Heraeus Pico 17R 冷凍離心機(jī)（賽默飛世爾科技公司）。

1.2 試藥

PF-309（質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.20%，批號(hào)：AK474043，安耐吉化學(xué)）；大豆卵磷脂、膽固醇（羅恩試劑有限公司）；水為超純水；甲醇、三乙胺為色譜純；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純；葡聚糖凝膠G-50（北京偶合科技有限公司）；D-（＋）葡萄糖（分析純，北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司）；蔗糖（分析純，天津市科盟化工工貿(mào)有限公司）；甘露醇（分析純，上海阿拉丁生化科技股份有限公司）；乳糖（分析純，上海麥克林生化科技有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 Lip@PF-309 的制備

采用薄膜分散法制備脂質(zhì)體。按處方量精密稱定PF-309 2.5 mg、膽固醇12.5 mg、大豆卵磷脂25 mg，溶于5 mL 無(wú)水乙醇-三氯甲烷（3∶7）混合有機(jī)溶劑中，超聲使藥物與膜材完全溶解，45 ℃水浴條件下常壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)20 min 后緩慢減壓至0.1 MPa，至有機(jī)溶劑完全蒸出，在蒸發(fā)得到的均勻類脂膜中加入5 mL 磷酸鹽緩沖液（PBS），60 ℃水浴條件下水合1.5 h，使膜完全脫落得到脂質(zhì)體混懸液，冰水浴中超聲均化20 min，至均一體系，再經(jīng)0.45 μm 微孔濾膜過濾10 次整粒，即得Lip@PF-309，4℃下保存。

2.2 包封率的測(cè)定

2.2.1 色譜條件 色譜柱為 Hypersll GOLD C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動(dòng)相為甲醇-0.1%三乙胺水溶液（70∶30）；流速為1.0 mL·min－1；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm；進(jìn)樣量為10 μL；柱溫為28℃。結(jié)果表明，在此色譜條件下，PF-309 游離藥物與空白脂質(zhì)體分離性良好，輔料對(duì)藥物的測(cè)定無(wú)干擾。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 將質(zhì)量濃度為100μg·mL－1的PF-309 對(duì)照品溶液稀釋為5、10、20、30、40、50 μg·mL－1的系列對(duì)照品溶液。按照“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣分析，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程Y＝13.26X＋1.187，r＝1.000，表 明PF-309在5～50 μg·mL－1與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.2.3 方法學(xué)驗(yàn)證 制備含空白脂質(zhì)體的低、中、高3 種不同質(zhì)量濃度PF-309 樣品溶液，計(jì)算平均回收率分別為99.8%、100.0%、100.1%（n＝3），RSD均小于2%，結(jié)果符合加樣回收率要求。精密吸取質(zhì)量濃度為100 μg·mL－1的PF-309 對(duì)照品溶液在同一日內(nèi)連續(xù)進(jìn)樣5 針，記錄峰面積，計(jì)算日內(nèi)RSD；用同一個(gè)對(duì)照品溶液每日進(jìn)樣1針，連續(xù)進(jìn)樣5 d，記錄峰面積，計(jì)算日間RSD，結(jié)果日間、日內(nèi)RSD分別為0.71%、0.26%（n＝5），表明精密度良好。精密取同一樣品5 份，測(cè)定，測(cè)得藥物峰面積RSD為0.45%（n＝5），表明該方法重復(fù)性良好。

2.2.4 包封率的測(cè)定 采用葡聚糖微型凝膠柱離心法來分離脂質(zhì)體與游離未包封藥物[6-7]。取Lip@PF-309 混懸液0.5 mL 于10 mL 量瓶中，甲醇破乳并稀釋定容，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件檢測(cè)總的藥物含量（W0）。另取Lip@PF-309 混懸液0.5 mL 緩慢滴加到微柱頂端，2500 r·min－1離心2.5 min 后，收集洗脫液，然后補(bǔ)充0.5 mL PBS（pH 7.2）于微柱頂端，同樣條件洗脫，連續(xù)洗脫3 次，收集所有洗脫液于10 mL 量瓶中，甲醇破乳并稀釋定容，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件檢測(cè)包封藥物含量（W1）。根據(jù)公式計(jì)算包封率，包封率（EE%）＝（W1/W0）×100%。

2.3 Lip@PF-309 處方的單因素考察

2.3.1 卵磷脂濃度對(duì)包封率的影響 固定其他條件不變，選取卵磷脂質(zhì)量濃度1、3、5、9、15 mg·mL－1，測(cè)定其包封率分別為79.8%、82.3%、85.2%、77.6%、75.9%，結(jié)果表明在一定范圍內(nèi)，藥物的包封率隨卵磷脂濃度的增加而增加，但過高的磷脂濃度會(huì)導(dǎo)致磷脂聚集，使藥物難以釋放[8]，故選擇卵磷脂濃度1、3、5 mg·mL－1進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)。

2.3.2 膽固醇與卵磷脂質(zhì)量比（膜材比）對(duì)包封率的影響 膽固醇對(duì)脂質(zhì)體膜流動(dòng)性起調(diào)節(jié)作用，改善了藥物的包封率與穩(wěn)定性，但過量的膽固醇會(huì)與脂溶性藥物（PF-309）在磷脂雙層膜中發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)置換現(xiàn)象，導(dǎo)致包封率降低。固定其他條件不變，膜材比取1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5，測(cè)定其包封率分別為81.2%、85.3%、83.6%、79.5%、76.8%，故選擇膜材比為1∶1、1∶2、1∶3進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)。

2.3.3 藥脂比對(duì)包封率的影響 固定其他條件不變，藥脂比分別為1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶30，測(cè)定其包封率分別為84.2%、88.7%、86.3%、75.5%、73.2%。結(jié)果表明，藥物的包封率隨膽固醇質(zhì)量增加而增加，當(dāng)兩者比例逐漸增大時(shí)，包封率有所下降，當(dāng)藥脂比達(dá)到1∶20 時(shí)，包封率較低，故選擇藥脂比為1∶5、1∶10、1∶15進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)。

2.4 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化Lip@PF-309 處方

在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選擇膜材比（A）、藥脂比（B）、卵磷脂濃度（C）為考察因素，D列為誤差列，采用L9（34）因素水平表進(jìn)行正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，以包封率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，篩選制備PF-309 脂質(zhì)體的最佳工藝。正交因素與水平設(shè)計(jì)見表1，以包封率為考察指標(biāo)的正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果見表2，方差分析見表3。根據(jù)表中極值（R）直觀分析可知，影響Lip@PF-309 脂質(zhì)體包封率的因素由大到小依次為B＞A＞C，最佳處方為B2A2C1，即卵磷脂濃度5 mg·mL－1，膜材比1∶2，藥脂比1∶10。

表1 正交因素設(shè)計(jì)水平Tab 1 Factor and level of orthogonal design

表2 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)果Tab 2 Orthogonal design

表3 方差分析Tab 3 Analysis of variance

2.5 Lip@PF-309 的驗(yàn)證及質(zhì)量評(píng)價(jià)

按“2.4”項(xiàng)下的最優(yōu)處方，制備3 批Lip@PF-309，測(cè)得包封率分別為（92.15±0.21）%、（91.89±0.18）%、（92.22±0.06）%，表示最優(yōu)工藝有良好的重現(xiàn)性。制得的脂質(zhì)體外觀呈乳白色混懸液，平均粒徑為（112.25±0.08）nm，粒徑的多分散指數(shù)（PDI）為（0.158±0.03）（見圖1），Zeta 電位為（－7.75±0.13）mV。制得的Lip@PF-309 呈球形或類球形，粒徑集中在110～130 nm，分布較為均勻（見圖2）。4℃條件下放置30 d，Lip@PF-309沒有出現(xiàn)沉降現(xiàn)象，包封率無(wú)明顯降低，表明穩(wěn)定性良好。

圖1 Lip@PF-309 的粒徑分布圖Fig 1 Particle size of PF-309 liposome

圖2 Lip@PF-309 脂質(zhì)體掃描電鏡圖Fig 2 Scanning electronic microphotograph of PF-309 liposome

2.6 體外釋放度實(shí)驗(yàn)

取Lip@PF-309 混懸液，以等濃度的PF-309原溶液作對(duì)照，分別吸取1 mL 移入已處理好的透析袋（8000～14 000 D）中，置于50 mL（pH 7.2）PBS 緩沖液中，于恒溫（37±1）℃、恒速（85 r·min－1）的搖床中混勻，在0.5、1、1.5、2、4、6、8、10、12、24、48、72 h 不同時(shí)段取釋放液1 mL，HPLC 測(cè)定含量，計(jì)算平均累積釋放百分率，釋放曲線結(jié)果見圖3。PF-309 原料藥組6 h 時(shí)PF-309 累積釋放率達(dá)85.65%，釋放迅速。Lip@PF-309 組24 h 時(shí)PF-309 累計(jì)釋放率僅為 85.03%，釋放相對(duì)于原料藥組較為緩慢，參比制劑（Rt）PF-309 溶液與受試制劑（Tt）Lip@PF-309 兩者溶出曲線的相似因子（f2）值為41，小于50，說明兩者溶出曲線不相似，即緩釋效果較為明顯。

圖3 體外釋放曲線Fig 3 Drug release in vitro

2.7 凍干脂質(zhì)體的制備

分散在水溶液中的脂質(zhì)體在長(zhǎng)期貯存后一般會(huì)出現(xiàn)物理化學(xué)不穩(wěn)定性，磷脂的水解氧化和脂質(zhì)體的聚集是脂質(zhì)體不穩(wěn)定的主要原因[9]。為了提高Lip@PF-309 的儲(chǔ)備穩(wěn)定性，解決液態(tài)脂質(zhì)體無(wú)法長(zhǎng)期貯存的問題，本研究采用真空冷凍干燥技術(shù)來制備Lip@PF-309 凍干脂質(zhì)體，但是脂質(zhì)體在凍干的過程中，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)脂質(zhì)體破裂導(dǎo)致包封藥物滲漏以及粒子融合造成粒徑增大的問題，因此在冷凍干燥過程中需加入凍干保護(hù)劑。多元醇類和糖類由于結(jié)構(gòu)中均有羥基基團(tuán)，均能產(chǎn)生“優(yōu)先水化作用”，可在脂質(zhì)體樣品凍干過程中起保護(hù)作用。但由于采用單個(gè)凍干保護(hù)劑凍干時(shí)，凍干脂質(zhì)體的外觀欠佳，再分散性較差，包封率與凍干前脂質(zhì)體樣品差距較大等問題[10-11]，故本研究將采用雙凍干保護(hù)劑聯(lián)用，來考察凍干脂質(zhì)體的最佳工藝。

2.7.1 聯(lián)用凍干保護(hù)劑種類的篩選 固定凍干保護(hù)劑加入總量為10%（w/v），兩種保護(hù)劑質(zhì)量比相等，以凍干制品的外觀、再分散性、包封率等為評(píng)價(jià)指標(biāo)，考察保護(hù)效果較好的甘露醇與乳糖、蔗糖和葡萄糖分別聯(lián)用對(duì)凍干樣品的保護(hù)效果。參考文獻(xiàn)[12]，本研究固定預(yù)凍時(shí)間為－80℃，在前期預(yù)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，冷凍干燥的溫度設(shè)置為－80℃，時(shí)間24 h。結(jié)果顯示甘露醇與蔗糖和葡萄糖分別聯(lián)用時(shí)，得到的凍干品外觀均有萎縮且再分散性較差，而甘露醇與乳糖聯(lián)用時(shí)得到的凍干脂質(zhì)體外觀疏松飽滿，再分散性良好，復(fù)溶后的包封率接近凍干前樣品，且粒徑無(wú)明顯變化。

2.7.2 聯(lián)用凍干保護(hù)劑用量的考察 使用甘露醇-乳糖（1∶1）作為聯(lián)用保護(hù)劑，考察保護(hù)劑的總量分別為1%、5%、10%、15%、20%時(shí)對(duì)凍干脂質(zhì)體的保護(hù)作用，結(jié)果顯示，當(dāng)保護(hù)劑總量為10%時(shí)，凍干品的包封率最高。

綜上所述，取2 mL Lip@PF-309 混懸液，外加10%（w/v）甘露醇-乳糖（1∶1），－80℃條件下預(yù)凍24 h，冷凍干燥過程－80℃條件下進(jìn)行24 h，制得Lip@PF-309 凍干脂質(zhì)體。外觀如圖4所示，凍干品外觀疏松平整，為白色粉末狀，高度無(wú)明顯塌陷。凍干脂質(zhì)體的再分散性良好，加入與凍干前脂質(zhì)體樣品相同體積的PBS 溶液，振搖后，凍干品即可復(fù)溶。凍干前樣品粒徑和包封率分別為112.25 nm 和92.11%，凍干后樣品的粒徑和包封率分別為115.77 nm 和90.35%，可見凍干后脂質(zhì)體的粒徑略有增大，包封率略有減小，但均無(wú)明顯的變化趨勢(shì)。

圖4 Lip@PF-309 混懸液（A）及其凍干品（B）Fig 4 Lip@PF-309 suspension（A）and freeze-dried product（B）

2.8 溶血實(shí)驗(yàn)及血漿穩(wěn)定性考察

2.8.1 體外溶血實(shí)驗(yàn) 取新鮮鼠血，收集于肝素鈉采血管中。3000 r·min－1離心5 min，棄去上層血漿，加入約10 倍量生理鹽水搖勻后，4℃、2500 r·min－1離心10 min，棄去上層清液洗滌2～3 次，直至上清液不再呈紅色為止。吸取底層紅細(xì)胞0.8 mL，用生理鹽水稀釋至40 mL，搖勻，即得2%紅細(xì)胞混懸液[13]。取8 只潔凈離心管，編號(hào)依次為A1、A2、A3、B1、B2、B3、陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照。A1、A2、A3分別為10、20、40 μg·mL－1的PF-309 對(duì)照品溶液；B1、B2、B3分別為PF-309 質(zhì)量濃度為10、20、40 μg·mL－1的脂質(zhì)體混懸液；陰性對(duì)照為生理鹽水；陽(yáng)性對(duì)照為蒸餾水。每管加入適量的2%紅細(xì)胞混懸液，立即置于（37±0.5）℃的恒溫水浴中孵育30 min，離心取上清液，在535 nm 處測(cè)定吸光度（A值），計(jì)算溶血率。溶血率（%）＝（Ai－A0）/（A1－A0）×100%，Ai為各供試品的吸光度，A0為陰性對(duì)照吸光度，A1為陽(yáng)性對(duì)照吸光度，溶血率＞5%則表明發(fā)生溶血。結(jié)果見表4，當(dāng)PF-309 對(duì)照品達(dá)到20 μg·mL－1時(shí)的溶血率＞90%，而將PF-309 包裹在脂質(zhì)體中，當(dāng)PF-309高達(dá)400 μg·mL－1時(shí)，也未出現(xiàn)溶血（溶血率僅為1.88%），表明脂質(zhì)體的包裹可有效解決PF-309 溶血的不良反應(yīng)。

表4 PF-309 溶液及PF-309 脂質(zhì)體的體外溶血活性Tab 4 In vitro hemdytic activity of PF-309 solution and PF-309 liposome

2.8.2 血漿穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 脂質(zhì)體在血液中穩(wěn)定是發(fā)揮藥物遞送作用的關(guān)鍵，從體循環(huán)向各組織器官或者體液轉(zhuǎn)運(yùn)的過程中，穩(wěn)定的脂質(zhì)體形態(tài)有助于藥物更好地發(fā)揮藥效[14-15]。取新鮮鼠血置于肝素鈉采血管中，迅速于4000 r·min－1低溫離心10 min，取上層血漿待用[16]。精密吸取空白血漿450 μL 于離心管中，加入藥物質(zhì)量濃度為200 μg·mL－1的Lip@PF-309 混懸液50 μL（重復(fù)5 份），渦旋混勻1 min，得20 μg·mL－1的樣品液，37 ℃水浴條件下分別放置0 min、10 min、30 min、1 h、2 h、4 h、6 h、8 h、12 h 后取樣。取血漿樣品200 μL 加入離心管，渦旋30 s，加乙酸乙酯3 mL，渦旋，于3000 r·min－1離心10 min，吸取上清液于另一試管中，37℃真空干燥后，加流動(dòng)相100 μL 復(fù)溶，渦旋，離心，用0.22 μm 的有機(jī)濾膜過濾后，采用HPLC 方法檢測(cè)，記錄色譜圖，計(jì)算包封率。結(jié)果見表5。

表5 不同時(shí)間點(diǎn)Lip@PF-309 在血漿中的包封率及粒徑變化Tab 5 Encapsulation efficiency and particle size change of Lip@PF-309 in the plasma at different time points

由表5結(jié)果可知，Lip@PF-309 在血漿中包封率下降的速度較慢，至6 h 時(shí)Lip@PF-309 的包封率仍大于60%，這表明Lip@PF-309 注射入血后能夠較長(zhǎng)時(shí)間地保持脂質(zhì)體形態(tài)完整，穩(wěn)定的劑型結(jié)構(gòu)可以使藥物在遞送系統(tǒng)的包載下，更好地到達(dá)靶部位發(fā)揮作用。

3 討論

本研究旨在構(gòu)建Lip@PF-309 遞藥系統(tǒng)，利用脂質(zhì)體的包埋技術(shù)，來提高藥物的溶解性、穩(wěn)定性及生物相容性，改善藥物的溶血作用，并對(duì)其進(jìn)行體外質(zhì)量評(píng)價(jià)。在實(shí)體瘤生長(zhǎng)部位，病變導(dǎo)致毛細(xì)血管的通透性增加，適當(dāng)粒徑范圍的脂質(zhì)體，在病變部位的滲透性和滯留量增加。粒徑作為影響納米載藥系統(tǒng)藥動(dòng)學(xué)與藥物靶向性的主要因素，決定著脂質(zhì)體在體內(nèi)的分布與被動(dòng)靶向性作用[17]。掃描電鏡下觀察Lip@PF-309 外觀圓整、粒徑均一，粒徑＜200 nm，與納米粒度儀測(cè)試結(jié)果一致，符合靜脈給藥的要求。體外釋放實(shí)驗(yàn)可知，Lip@PF-309 脂質(zhì)體混懸液相比PF-309溶液，表現(xiàn)出了較好的緩釋效果。首先可能是脂質(zhì)體作為藥物的儲(chǔ)存形式，能使包埋的內(nèi)含物緩慢釋放；其次陰離子脂質(zhì)體表面的負(fù)電荷與帶正電荷的藥物分子產(chǎn)生靜電吸附作用，提高了藥物的包封效率，達(dá)到緩釋的作用效果[18]；除此之外脂質(zhì)體表面電荷的性質(zhì)會(huì)影響納米粒子的穩(wěn)定性、生物分布以及細(xì)胞親和力，Lip@PF-309 表面帶有少量的負(fù)電荷，較中性粒子可以更快更大程度地通過內(nèi)吞促進(jìn)細(xì)胞攝取，同時(shí)少量的負(fù)電荷可以降低粒子的聚集性，避免吞噬機(jī)制，從而延長(zhǎng)脂質(zhì)體在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間[19]。具有苯環(huán)或共軛結(jié)構(gòu)的化合物對(duì)乙酰膽堿酯酶有抑制作用，藥物作用于紅細(xì)胞膜的乙酰膽堿酯酶，使其受到高度抑制，使紅細(xì)胞破壞加速造成溶血[20]。經(jīng)體外溶血實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，PF-309 溶液具有顯著的溶血現(xiàn)象，這也是PF-309 在臨床中引起毒副反應(yīng)的主要原因之一，本文制備的Lip@PF-309，當(dāng)脂質(zhì)體中藥物質(zhì)量濃度高達(dá)400 μg·mL－1時(shí)，溶血率僅為1.88%，表明脂質(zhì)體的包裹可有效解決PF-309 引發(fā)的溶血不良反應(yīng)，這為新劑型的安全性提供了參考。

本研究采用薄膜分散法制備Lip@PF-309，制備工藝簡(jiǎn)單，且制得的脂質(zhì)體納米粒有較高的包封率和良好的體外緩釋效果，顯著降低了PF-309 的溶血作用，脂質(zhì)體在血液中表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性，在進(jìn)入血循環(huán)到達(dá)靶部位之前，完整的形態(tài)有助于藥物更好地發(fā)揮藥效，這為L(zhǎng)ip@PF-309 的后續(xù)體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)及藥效研究奠定了重要基礎(chǔ)，對(duì)PF-309 藥物新劑型的研發(fā)具有一定的參考價(jià)值。