亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        非小細(xì)胞肺癌組織長鏈非編碼RNA LINC00265、microRNA-98-5p的表達(dá)及其臨床意義*

        2021-09-01 02:08:24張帆劉威龍永貴趙飛劉凌曦胡同晨彭華利馬智群
        關(guān)鍵詞:水平研究

        張帆,劉威,龍永貴,趙飛,劉凌曦,胡同晨,彭華利,馬智群

        (樂山市人民醫(yī)院胸心外科,四川樂山614000)

        肺癌是最常見的腫瘤,其中多數(shù)患者為非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC),NSCLC 病死率高,危及患者生命安全[1-2]。目前,學(xué)者認(rèn)為NSCLC 發(fā)病與環(huán)境惡化、不良生活習(xí)慣、microRNA(miRNA)及長鏈非編碼 RNA(long noncoding RNA, lncRNA)異常表達(dá)、免疫逃逸、炎癥反應(yīng)、自噬等關(guān)系密切[3],且lncRNA、miRNA 可相互調(diào)控,共同參與NSCLC 的發(fā)生、發(fā)展[4]。有研究發(fā)現(xiàn),lncRNA LINC00265 在急性髓細(xì)胞性白血?。╝cute myelogenous leukemia, AML)患者中表達(dá)上調(diào),其可能通過影響自噬進(jìn)而抑制癌細(xì)胞凋亡,從而在AML 中發(fā)揮調(diào)控作用[5];而microRNA-98-5p(miR-98-5p)在NSCLC 中呈低表達(dá),其可能抑制NSCLC 細(xì)胞的增殖及轉(zhuǎn)移,且可能是治療NSCLC的潛在靶標(biāo)[6]。但lncRNA LINC00265 在NSCLC 患者中的表達(dá)及與miR-98-5p、預(yù)后的關(guān)系鮮有報(bào)道。因此本研究通過測定NSCLC 患者lncRNA LINC00265、miR-98-5p 相對表達(dá)量,分析兩者的相關(guān)性及與預(yù)后的關(guān)系,以期為NSCLC 的防治提供參考。

        1 資料與方法

        1.1 臨床資料

        選取2016年1月—2017年12月在樂山市人民醫(yī)院行根治性切除術(shù)的原發(fā)性NSCLC 患者97 例作為研究對象。其中,男性56 例,女性41 例;年齡45~72 歲,平均(59.03±10.27)歲;年齡<60 歲35 例,≥60 歲62 例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移52 例,淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移45 例;腫瘤≤3 cm 43 例,腫瘤>3 cm 54 例;臨床分期Ⅰ期30 例,Ⅱ、Ⅲ期67 例;腺癌40 例,鱗癌43 例,其他病理類型14 例;低分化41 例,中、高分化56 例;肺葉切除89 例,單側(cè)全肺切除8 例。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn),所有受試對象及家屬簽署知情同意書。

        1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

        1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)①符合NSCLC 診斷標(biāo)準(zhǔn),經(jīng)病理學(xué)確診為NSCLC[7];②術(shù)前無放化療者。

        1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)①臨床資料不完整;②合并嚴(yán)重臟器疾病、其他惡性腫瘤;③存在手術(shù)禁忌證。

        1.3 主要試劑及儀器

        利用Trizol 試劑(SBJ-L0055,南京森貝伽生物科技有限公司),miRNA 提取試劑盒(R6842-02,北京智杰方遠(yuǎn)科技有限公司),F(xiàn)irst Strand cDNA Synthesis Kit(TER016-1,北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司),miScript Reverse Transcription Kit(218060,美國Thermo Fisher 公司),TaqMan?Universal Master Mix(4444558,上海恪敏生物科技有限公司),實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)儀(StepOneTM,美國ABI 公司)。

        1.4 樣本收集

        收集NSCLC 患者術(shù)中切除的癌組織標(biāo)本和癌旁正常組織標(biāo)本(距癌組織>3 cm),置于液氮罐中凍存24 h 后移至-70℃冷凍保存。

        1.5 qRT-PCR 檢測組織lncRNA LINC00265、miR-98-5p相對表達(dá)量

        解凍凍存組織標(biāo)本,利用Trizol 試劑/miRNA 提取試劑盒抽提總RNA,F(xiàn)irst Strand cDNA Synthesis Kit/miScript Reverse Transcription Kit 合成cDNA。采用TaqMan?Universal Master Mix 及qRT-PCR 儀對cDNA 進(jìn)行擴(kuò)增、檢測。反應(yīng)條件:94℃預(yù)變性4 min;93℃變性15 s,64℃退火30 s,共計(jì)40 個(gè)循環(huán)。 lncRNA LINC00265、miR-98-5p 分別以GAPDH、U6 為內(nèi)參,引物序列見表1。采用2-ΔΔCt法計(jì)算lncRNA LINC00265、miR-98-5p 相對表達(dá)量。

        表1 qRT-PCR引物序列

        1.6 生物信息學(xué)軟件預(yù)測lncRNA LINC00265 與miR-98-5p的關(guān)系

        利用生物信息學(xué)網(wǎng)站(http://starbase.sysu.edu.cn/agoClipRNA.php?source=lncRNA&flag=target&clade=mammal&genome=human&assembly=hg19&miRNA=all&clipNum=1&deNum=0&panNum=0&target=LINC00265)對lncRNA LINC00265 與miR-98-5p 的關(guān)系進(jìn)行預(yù)測分析。

        1.7 隨訪

        對97 例NSCLC 患者進(jìn)行隨訪,以手術(shù)當(dāng)日為隨訪起點(diǎn),電話/門診為主要隨訪方式,2020年12月31日或患者死亡為隨訪終點(diǎn),記錄患者術(shù)后情況,計(jì)算術(shù)后總生存時(shí)間(overall survival, OS)、無病生存期(disease-free survival,DFS)。

        1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        數(shù)據(jù)分析采用SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,比較用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,比較用χ2檢驗(yàn);相關(guān)性分析用Pearson 法;Kaplan-Meier 法繪制生存曲線,影響因素的分析用Cox 回歸模型。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 癌旁正常組織與癌組織lncRNA LINC00265、miR-98-5p相對表達(dá)量比較

        NSCLC 患者癌旁正常組織與癌組織lncRNA LINC00265、miR-98-5p 相對表達(dá)量比較,經(jīng)t檢驗(yàn),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),癌組織lncRNA LINC00265 相對表達(dá)量高于癌旁正常組織,miR-98-5p 相對表達(dá)量低于癌旁正常組織。見表2。

        表2 癌旁正常組織與癌組織lncRNA LINC00265、miR-98-5p相對表達(dá)量比較 (n=97,±s)

        表2 癌旁正常組織與癌組織lncRNA LINC00265、miR-98-5p相對表達(dá)量比較 (n=97,±s)

        組別lncRNA LINC00265 miR-98-5p癌旁正常組織癌組織t 值P 值1.05±0.35 1.86±0.62 11.205 0.000 1.03±0.34 0.50±0.17 13.732 0.000

        2.2 癌組織lncRNA LINC00265、miR-98-5p 表達(dá)水平與NSCLC患者臨床病理特征關(guān)系

        以lncRNA LINC00265 相對表達(dá)量平均值1.86為界限,分為低表達(dá)(47 例)和高表達(dá)患者(50 例)。以miR-98-5p 相對表達(dá)量平均值0.50 為界限,分為低表達(dá)(49 例)和高表達(dá)患者(48 例)。不同性別、年齡、腫瘤大小、病理類型、手術(shù)方式患者癌組織的lncRNA LINC00265 和miR-98-5p 表達(dá)水平比較,經(jīng)χ2檢驗(yàn),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);而有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、不同臨床分期和低分化患者癌組織的lncRNA LINC00265 和miR-98-5p 表達(dá)水平比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

        表3 不同臨床病理特征患者lncRNA LINC00265、miR-98-5p表達(dá)水平比較 例

        2.3 癌組織lncRNA LINC00265 與miR-98-5p 的相關(guān)性

        Pearson 法結(jié)果顯示,NSCLC 患者癌組織lncRNA LINC00265與miR-98-5p呈負(fù)相關(guān)(r=-0.580,P=0.000)(見圖1)。生物信息學(xué)分析顯示,lncRNA LINC00265 與miR-98-5p 存在靶向結(jié)合位點(diǎn),兩者可能存在靶向調(diào)控關(guān)系(見圖2)。

        圖1 NSCLC患者癌組織lncRNA LINC00265與miR-98-5p的相關(guān)性

        圖2 lncRNA LINC00265與miR-98-5p存在靶向結(jié)合位點(diǎn)

        2.4 癌組織lncRNA LINC00265、miR-98-5p 表達(dá)水平與NSCLC患者預(yù)后的關(guān)系

        97 例NSCLC 患者隨訪36 個(gè)月,其中生存52 例,無病生存49 例。Kaplan-Meier 法繪制生存曲線,結(jié)果顯示,NSCLC 患者lncRNA LINC00265 高表達(dá)患者OS為25.44個(gè)月(95%CI:22.45,28.43),DFS為22.88個(gè)月(95%CI:19.81,25.95);lncRNA LINC00265 低表達(dá)患者OS 為31.62 個(gè)月(95% CI:29.22,34.01),DFS 為31.17 個(gè)月(95%CI:28.66,33.68)。lncRNA LINC00265高表達(dá)與低表達(dá)患者的總生存率、無病生存率比較,經(jīng)χ2檢驗(yàn),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=14.750 和17.552,P=0.000),lncRNA LINC00265高表達(dá)患者總生存率、無病生存率較低。見圖3、4。

        圖3 NSCLC患者癌組織lncRNA LINC00265表達(dá)水平與OS的關(guān)系

        圖4 NSCLC患者癌組織lncRNA LINC00265表達(dá)水平與DFS的關(guān)系

        miR-98-5p高表達(dá)患者OS為31.27個(gè)月(95%CI:28.91,33.64),DFS 為30.56 個(gè)月(95% CI:28.07,33.06);miR-98-5p 低表達(dá)患者OS 為25.65 個(gè)月(95% CI:22.57,28.73),DFS 為23.01 個(gè)月(95% CI:20.11,26.51)。miR-98-5p 高表達(dá)與低表達(dá)患者的總生存率、無病生存率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=11.017 和11.205,均P=0.001),miR-98-5p 高表達(dá)患者總生存率、無病生存率較高。見圖5、6。

        圖5 NSCLC患者癌組織miR-98-5p表達(dá)水平與OS的關(guān)系

        圖6 NSCLC患者癌組織miR-98-5p表達(dá)水平與DFS的關(guān)系

        2.5 NSCLC患者預(yù)后因素的分析

        表4 影響NSCLC患者預(yù)后的單因素Cox回歸分析參數(shù)

        表5 影響NSCLC患者預(yù)后的多因素Cox回歸分析參數(shù)

        3 討論

        NSCLC 是發(fā)并率和死亡率較高的呼吸系統(tǒng)腫瘤,目前,手術(shù)仍是治療NSCLC 的重要手段,但因手術(shù)的創(chuàng)傷性及術(shù)后的高復(fù)發(fā)率,患者預(yù)后較差[8-9]。因此,尋找與NSCLC 發(fā)病相關(guān),且可評估患者預(yù)后的指標(biāo),對及早干預(yù),改善NSCLC 患者生存狀況有積極意義。

        lncRNA 是一類長鏈非編碼RNA,其可調(diào)控炎癥反應(yīng)、染色體重構(gòu)、免疫應(yīng)答、自噬、個(gè)體發(fā)育、細(xì)胞增殖/凋亡、氧化應(yīng)激等過程,與慢性阻塞性肺疾病、肺癌等密切相關(guān)[10-11]。有研究顯示,lncRNA GABPB1-IT1 在NSCLC 中表達(dá)下調(diào),其可能是治療NSCLC 的靶點(diǎn)及評估預(yù)后的標(biāo)志物[12];另外,lncRNA GAS5 在NSCLC 中過表達(dá),其有望成為診治、評估NSCLC 預(yù)后的有效指標(biāo)[13]。以上研究表明,NSCLC 病理變化可能與lncRNA 表達(dá)失調(diào)有關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn),lncRNA LINC00265 作為lncRNA 成員之一,在結(jié)直腸癌中表達(dá)升高,其可能通過調(diào)控有關(guān)靶基因的表達(dá),促進(jìn)結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展[14];另外,lncRNA LINC00265 在AML 患者骨髓及血清中過表達(dá),其可能通過調(diào)節(jié)相關(guān)信號通路進(jìn)而調(diào)節(jié)AML 細(xì)胞增殖、侵襲,具有診斷和評估AML 患者預(yù)后的潛在價(jià)值[15]。以上研究表明,lncRNA LINC00265 可能在多種腫瘤中發(fā)揮促癌作用。 本研究中NSCLC 患者癌組織lncRNA LINC00265 相對表達(dá)量高于癌旁正常組織,與其在AML 的趨勢一致[15],且NSCLC 患者癌組織lncRNA LINC00265 表達(dá)水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、分化程度有關(guān),提示lncRNA LINC00265 與NSCLC 患者的臨床病理特征相關(guān),其可能對NSCLC 的發(fā)生、發(fā)展起促進(jìn)作用,推測lncRNA LINC00265 可能通過靶向結(jié)合相關(guān)基因,調(diào)節(jié)相關(guān)信號通路,促進(jìn)NSCLC 細(xì)胞增殖、遷移,抑制癌細(xì)胞凋亡,從而影響NSCLC 的發(fā)生、發(fā)展,但具體機(jī)制有待深入研究。

        miRNA 是機(jī)體一類非編碼小RNA 分子,其可調(diào)節(jié)生長發(fā)育、血管生成,影響自噬,調(diào)控細(xì)胞凋亡、分化、遷移、增殖,參與免疫炎癥,介導(dǎo)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程[16-17]。有研究發(fā)現(xiàn),miR-98-5p 作為miRNA 家族的一員,其可靶向結(jié)合α-1,3-甘露糖轉(zhuǎn)移酶進(jìn)而抑制NSCLC 進(jìn)展[18];另外,miR-98-5p在NSCLC 中表達(dá)降低,其可能通過影響信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程進(jìn)而在NSCLC 的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮作用[19]。以上研究證實(shí),miR-98-5p 可能作為抑癌因子,在NSCLC 病變過程中發(fā)揮抑癌作用。本研究顯示,NSCLC 患者癌組織miR-98-5p 相對表達(dá)量低于癌旁正常組織,與JIANG 等[6]研究結(jié)果一致,且癌組織miR-98-5p 表達(dá)水平與NSCLC 患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、分化程度有關(guān),提示miR-98-5p 可能參與并影響NSCLC 病理變化,推測miR-98-5P 可能通過靶向結(jié)合有關(guān)基因,調(diào)節(jié)相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo),從而參與調(diào)控NSCLC 進(jìn)展,其具體作用機(jī)制仍需進(jìn)一步探討。

        此外,生物信息學(xué)分析顯示,miR-98-5p可能是lncRNA LINC00265 的靶基因,且本研究中NSCLC 患者癌組織lncRNA LINC00265 表達(dá)水平與miR-98-5p 呈負(fù)相關(guān),提示lncRNA LINC00265 可能與miR-98-5p 靶向結(jié)合,共同調(diào)控NSCLC 的發(fā)生、發(fā)展,但其機(jī)制有待深入研究證實(shí)。本研究結(jié)果顯示,lncRNA LINC00265 高表達(dá)、miR-98-5p 低表達(dá)患者36 個(gè)月OS 較低,提示lncRNA LINC00265、miR-98-5p 與NSCLC 患者預(yù)后相關(guān),兩者有望成為評估NSCLC 患者預(yù)后的輔助指標(biāo)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、lncRNA LINC00265是影響NSCLC 患者預(yù)后死亡的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,miR-98-5p 是影響NSCLC 患者預(yù)后死亡的獨(dú)立保護(hù)因素,提示臨床分期越高、淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移、lncRNA LINC00265 表達(dá)水平升高、miR-98-5p 表達(dá)水平降低均會增加NSCLC 患者發(fā)生不良預(yù)后的風(fēng)險(xiǎn),及時(shí)測定肺組織lncRNA LINC00265、miR-98-5p相對表達(dá)量有助于及早診治、評估NSCLC 患者預(yù)后。

        綜上所述,NSCLC 患者癌組織lncRNA LINC00265 表達(dá)上調(diào),miR-98-5p 表達(dá)下調(diào),兩者呈負(fù)相關(guān),均可能在NSCLC 發(fā)生、發(fā)展中起一定作用,且兩者可作為評估NSCLC 患者預(yù)后的標(biāo)志物。本研究存在隨訪時(shí)間較短,樣本較少,且未深入探究lncRNA LINC00265、miR-98-5p 在NSCLC的作用機(jī)制,后期仍需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量、延長隨訪時(shí)間,結(jié)合基礎(chǔ)研究,為臨床診治NSCLC 提供新靶點(diǎn)增加說服力。

        猜你喜歡
        水平研究
        FMS與YBT相關(guān)性的實(shí)證研究
        張水平作品
        2020年國內(nèi)翻譯研究述評
        遼代千人邑研究述論
        視錯覺在平面設(shè)計(jì)中的應(yīng)用與研究
        科技傳播(2019年22期)2020-01-14 03:06:54
        作家葛水平
        火花(2019年12期)2019-12-26 01:00:28
        EMA伺服控制系統(tǒng)研究
        加強(qiáng)上下聯(lián)動 提升人大履職水平
        新版C-NCAP側(cè)面碰撞假人損傷研究
        老虎獻(xiàn)臀
        素人系列免费在线观看| 日韩极品在线观看视频| 麻豆激情视频在线观看| 日本一区二区三区视频免费在线| 国产av一级黄一区二区三区| 四虎永久在线精品免费一区二区| 特黄 做受又硬又粗又大视频| 美女mm131爽爽爽| 67194熟妇人妻欧美日韩| 国产特级毛片aaaaaa| a级毛片100部免费看| 久久久久中文字幕无码少妇| 国内精品久久久久久久亚洲| 亚洲精品2区在线观看| 亚洲中文字幕乱码免费看| 国产亚洲中文字幕久久网| 亚洲中文av中文字幕艳妇| 国产一精品一av一免费| 99久久er这里只有精品18| 66lu国产在线观看| 久久国产精品老人性| 手机av在线观看视频| 成人偷拍自拍视频在线观看| 国产欧美性成人精品午夜| 三上悠亚av影院在线看| 国产高清无码91| 色婷婷精品综合久久狠狠| 日本一区二区三区精品免费| 久久人妻无码一区二区| 日本少妇被黑人xxxxx| 日韩成人无码v清免费| 亚洲精品高清av在线播放| 偷拍视频网址一区二区| 精品人妻无码视频中文字幕一区二区三区 | Jizz国产一区二区| 水蜜桃在线精品视频网| 狠狠色狠狠色综合网| 久久国产精品久久久久久| 护士奶头又白又大又好摸视频| 亚洲免费无毛av一区二区三区| 久久国产在线精品观看|