付夢思，王金輝，吳偉慶，黎頌超，江丹莉，黃運茂，田允波，張續(xù)勐

（1.仲愷農業(yè)工程學院動物科技學院，廣東 廣州 510225；2.廣東省水禽健康養(yǎng)殖重點實驗室，廣東 廣州 510225）

【研究意義】我國是世界上鴨生產與消費第一大國，廣東省是我國水禽大省，憑借珠江三角洲的地理優(yōu)勢，近年來鴨養(yǎng)殖量呈快速增長趨勢［1］。由于飼養(yǎng)條件和成本等原因，我國鴨飼養(yǎng)過程普遍實行集約化、規(guī)?；Ｊ?。規(guī)?；B(yǎng)殖和較高的飼養(yǎng)密度會對禽舍的溫度、濕度、通風、有害氣體、塵埃、微生物含量產生較大影響，從而間接對禽類采食量、生長性能以及健康產生一系列不良影響。揭示飼養(yǎng)密度對山麻鴨胸腿肌和脛骨發(fā)育的影響，可為優(yōu)化飼養(yǎng)密度、提升山麻鴨生長性能提供借鑒。

【前人研究進展】已有研究表明，高密度飼養(yǎng)條件下，死亡率提高、生長速度降低與鴨舍內溫度升高相關［2］，并造成畜禽養(yǎng)殖場環(huán)境嚴重污染，不利畜禽生長［3］。張蒙等［4］發(fā)現(xiàn)，隨著飼養(yǎng)密度增大，大午金鳳商品代蛋雛雞體重呈現(xiàn)顯著下降的趨勢。白皓等［5］通過對白羽肉鴨進行網上平養(yǎng)和籠養(yǎng)也得到與蛋雞相似的結果。較高飼養(yǎng)密度會使禽類生活空間不足，畜舍養(yǎng)殖環(huán)境惡化，細菌病菌繁殖力增加，導致環(huán)境中脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）積累，從而引發(fā)禽類產生應激反應［6］。LPS 作為一種內毒素，是革蘭氏陰性細菌細胞壁的組成成分，通過以Toll 樣受體為媒介的信號轉導途徑產生一系列細胞因子，從而引起一系列炎性反應［7］，而TNF-α 和IL-6可以介導炎癥的發(fā)生［8］。IL-6 是由T 細胞和巨噬細胞分泌產生的一種炎性細胞因子，表達水平與肌肉收縮反應密切相關［9］；TNF-α 主要由激活的巨噬細胞產生，是參與全身炎癥的細胞信號傳導蛋白［10］。

在肌肉發(fā)育過程中，一些關鍵的基因在合適的部位和時間發(fā)揮關鍵調控作用。如Myod在骨骼肌發(fā)育前期促進肌源性祖細胞增殖、分化形成成肌細胞［11］；Myog主要在成肌細胞分化形成肌管過程中發(fā)揮重要作用［12］；Myh1基因與肌肉收縮和肌肉發(fā)育顯著相關，編碼肌纖維的主要組成成分肌球蛋白重鏈蛋白［13］；IGF-1能有效促進成肌細胞增殖及分化，從而促進骨骼肌再生，同時增強再生肌肉的收縮力［14］；MSTN又稱肌肉生長抑制素，發(fā)揮負調控肌肉生長和發(fā)育的功能［15］。

【本研究切入點】已有的研究主要關注飼養(yǎng)密度對禽類生長、繁殖性能的影響，鮮有研究不同飼養(yǎng)密度環(huán)境下對禽類脛骨和肌纖維生長的影響及其調控機制。而肌肉和脛骨生長狀態(tài)對于育成期禽類的生長性能非常重要?！緮M解決的關鍵問題】本試驗通過構建不同飼養(yǎng)密度的養(yǎng)殖條件，系統(tǒng)探索其對山麻鴨飼養(yǎng)環(huán)境、血液內毒素、胸腿肌和脛骨生長的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試的56 日齡健康山麻鴨雌鴨已進行常規(guī)免疫，由仲愷農業(yè)工程學院鐘村農場提供。EC80545S 鱟試劑盒購自廈門鱟試劑生物科技有限公司，Trizol 購自Thermo Fisher Scientific 公司，PSMARTTM RACE cDNA kit 購自TaKaRa 公司。

1.2 試驗設計

本試驗于2020 年8 月在仲愷農業(yè)工程學院鐘村農場進行。選取180 只56 日齡健康且體重相近的山麻鴨雌鴨隨機分為低密度組（n=30）、中密度組（n=60）和高密度組（n=90），在飼養(yǎng)環(huán)境相同的情況下，分別于3 個半開放式鴨舍中進行水陸-平養(yǎng)。鴨舍有遮陽棚3 m2、運動場6 m2、水池3 m2（低密度組2.5 只/m2，中密度組5 只/m2，高密度組7.5 只/m2）；舍內裝通風扇和0.5 W 節(jié)能燈（以避免夜間應激）；每30 只鴨配備1 個飲水器；初始光照時長為10 h，正式試驗開始后每周延長1 h，直至光照穩(wěn)定在17 h。預飼期為8 d，正式試驗期為40 d。試驗期內每天按每只60 g 蛋鴨料（摻適量玉米）的標準飼喂山麻鴨，每天記錄采食情況；于正式試驗第0、20、40 d 每組分別隨機選取10 只鴨進行稱重，同時進行翅下采血（2 mL/只），每組剖殺6 只鴨進行胸腿肌及脛骨采樣。

1.3 指標測定

1.3.1 水體菌群數(shù)及內毒素測定 根據(jù)《食品微生物學檢驗 菌落總數(shù)測定》（GB 4789.2-2010）配制PAC 瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基和SS瓊脂培養(yǎng)基。在無菌條件下，將取得的水體樣本經過104倍或103倍稀釋后取100 μL 涂在上述3種培養(yǎng)基中，用涂布棒涂勻并做標記，平放于培養(yǎng)箱中10～20 min，將平板倒扣于培養(yǎng)箱中37 ℃培養(yǎng)18～24 h，即可計數(shù)平板上的菌落數(shù)。

采用鱟試劑法測量水體和血清中的內毒素含量，檢測步驟均按EC80545S 鱟試劑盒說明書規(guī)范操作。

1.3.2 胸腿肌和脛骨生長指標測定 參照前人研究的方法［16］對胸腿肌和脛骨進行HE 染色，隨后用正置熒光顯微鏡（ZEISS,ImagerZ1）進行觀察拍攝并采集圖片。采用Image-pro plus 6.0 軟件（Media Cybernetics,Inc.,Rockville,MD,USA）統(tǒng)計HE 染色胸腿肌和脛骨橫切結果。所使用的每張切片均隨機挑選3 個及以上的400 倍視野進行拍攝分析。拍攝時盡量讓組織充滿整個視野，并調整每張照片的背景光盡量達到一致。每張切片隨機挑選5 個肌纖維和脛骨切面位置，測量肌纖維的直徑和脛骨骨質厚度、髓質厚度。統(tǒng)計每個視野中的纖維數(shù)和測量肌纖維的總橫截面積，求出單位面積內肌纖維數(shù)量。

1.3.3 炎癥相關基因和肌肉特異表達基因的檢測 對炎癥相關基因IL-6/TNF-α、肌肉特異表達基因Myod、MSTN、IGF-1、Myog 和Myh1進行檢測分析，引物序列見表1。采用Trizol 法提取肌肉組織總RNA，并用cDNA 反轉錄試劑盒將RNA反轉錄成cDNA，在LightCycler480 Ⅱ（QuantStudio 7 Flex）上進行熒光定量PCR，反應程序為：預變性95 ℃ 10 min；變性95 ℃ 5 s、退火60 ℃1 min、延伸72 ℃ 30 s，40 個循環(huán)。

表1 引物序列信息Table 1 Primer sequence information

1.4 數(shù)據(jù)處理

以每只雛鴨個體作為重復進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，數(shù)據(jù)分析使用SPSS（Version 20）。采用兩因素方差分析計算組間差異，統(tǒng)計分析采用雙側檢驗，相對定量分析采用2-△△Ct法。

2 結果與分析

2.1 飼養(yǎng)密度對水體細菌數(shù)和內毒素含量的影響

為了探索飼養(yǎng)密度對山麻鴨養(yǎng)殖水體環(huán)境的影響，本研究對不同時間點的水體細菌和內毒素進行檢測。結果（圖1）發(fā)現(xiàn)，76 日齡時，中、高密度組大腸桿菌數(shù)、沙門氏菌數(shù)和總細菌數(shù)均為低密度組的5 倍以上（P<0.05），并且高密度組沙門氏菌數(shù)也為中密度組的2 倍以上（P<0.001）；同時高密度組水體內毒素水平顯著高于中、低密度組（P<0.001），但中、低密度組水體內毒素水平差異不顯著。96 日齡時，中、高密度組大腸桿菌、沙門氏菌數(shù)、總細菌數(shù)和水體內毒素均顯著高于低密度組（P<0.01），其中高密度組沙門氏菌和總細菌數(shù)顯著高于中密度組（P<0.05）；與低密度組相比，中、高密度組大腸桿菌、沙門氏菌數(shù)和內毒素變化趨勢和76 日齡大體上一致，但總菌數(shù)提升幅度較大，增加至低密度組的5 倍以上。研究結果表明，較高的飼養(yǎng)密度顯著增加了養(yǎng)殖水體中的細菌數(shù)和內毒素含量。

圖1 飼養(yǎng)密度對水體大腸桿菌、沙門氏菌、總細菌數(shù)和內毒素含量的影響Fig.1 Effects of stocking densities on Escherichia coli,Salmonella,total bacteria number and endotoxin content in rearing water

2.2 飼養(yǎng)密度對山麻鴨血液內毒素和體重的影響

由圖2A 可見，76 日齡時，不同飼養(yǎng)密度組間山麻鴨血液內毒素含量均存在顯著差異（P<0.05），與低密度組相比，中、高密度組山麻鴨血液內毒素含量提高2 倍以上，且飼養(yǎng)密度越大，血液內毒素含量越高；96 日齡時，高飼養(yǎng)密度組血液內毒素含量顯著高于中、低密度組（P<0.001），與低密度組相比，中密度組山麻鴨血液內毒素含量與76 日齡時差異不大，高密度組內毒素含量隨飼養(yǎng)時間的增加大幅上升。結果表明，較高的飼養(yǎng)密度顯著提高了山麻鴨血液中內毒素的含量。

由于供試山麻鴨已處于育成期，因此試驗期內不同時間的山麻鴨體重變化較小（圖2B），但中、高密度組山麻鴨體重均顯著低于低密度組（P<0.01），76 日齡時中、高密度組山麻鴨體重降低了0.1 kg 左右，96 日齡時體重略有升高，但中、高密度組的體重仍比低密度組低15%左右（圖2B）。結果表明，較高的飼養(yǎng)密度顯著降低了山麻鴨的體重。

圖2 飼養(yǎng)密度對山麻鴨血液內毒素和體重的影響Fig.2 Effects of stocking densities on blood endotoxin and body weight of Shan Partridge ducks

2.3 飼養(yǎng)密度對山麻鴨生長性能的影響

2.3.1 飼養(yǎng)密度對山麻鴨脛骨生長的影響 由圖3 可見，隨著飼養(yǎng)時間的增加，3 組山麻鴨的骨質厚度變化不大，髓質厚度呈現(xiàn)上升趨勢。56、76 日齡3 組間的的骨質和髓質厚度差異均不明顯，但到了96 日齡，低密度組骨質厚度顯著高于高密度組100 μm 左右（P<0.05），并且低密度組髓質厚度顯著高于中、高密度組200 μm 左右（P<0.05）。結果表明，較高的飼養(yǎng)密度顯著抑制了山麻鴨脛骨的生長。

圖3 飼養(yǎng)密度對山麻鴨脛骨生長的影響Fig.3 Effects of stocking densities on tibia growth of Shan Partridge ducks

2.3.2 飼養(yǎng)密度對山麻鴨胸腿肌生長的影響 隨著飼養(yǎng)時間的增加，3 組山麻鴨的胸肌的肌纖維密度均出現(xiàn)下降，肌纖維直徑則上升；而腿肌肌纖維密度也出現(xiàn)下降，肌纖維直徑變化不明顯。在胸肌方面（圖4），76 日齡時3 組山麻鴨的肌纖維密度之間均存在顯著差異（P<0.05），且飼養(yǎng)密度越高，肌纖維密度越大，中、高密度組肌纖維密度比低密度組分別增加25%和50%左右，而肌纖維直徑則是高密度組顯著低于低密度組（P<0.05），中、高密度組肌纖維直徑比低密度組分別減少10%和25%左右；96 日齡時，高密度組肌纖維密度顯著高于低密度組（P<0.001），而肌纖維直徑在3 組間差異較小。

圖4 飼養(yǎng)密度對山麻鴨胸肌肌纖維直徑和密度的影響Fig.4 Effects of stocking densities on the diameter and density of pectoral muscle fiber of Shan Partridge ducks

在腿肌方面（圖5），76 日齡時3 組山麻鴨的肌纖維密度與肌纖維直徑均存在顯著差異（P<0.05），且飼養(yǎng)密度越高，肌纖維密度越低，肌纖維直徑越大，中、高密度組肌纖維密度比低密度組分別降低10%和50%左右，肌纖維直徑比低密度組分別增加1%和10%左右；96 日齡時，3 組肌纖維直徑差異顯著（P<0.05），且飼養(yǎng)密度越高，肌纖維直徑越大，中、高密度組肌纖維直徑比低密度組分別增加2%和10%左右，而肌纖維密度在組間差異較小。結果表明，飼養(yǎng)密度對山麻鴨胸腿肌生長產生了較為顯著的影響。

圖5 飼養(yǎng)密度對山麻鴨腿肌肌纖維直徑和密度的影響Fig.5 Effects of stocking densities on diameter and density of myofiber in leg muscle of Shan Partridge ducks

2.4 飼養(yǎng)密度對山麻鴨炎癥因子和肌肉生長關鍵基因表達的影響

為了進一步分析飼養(yǎng)密度導致山麻鴨胸腿肌生長變化的原因，本研究檢測了胸腿肌中幾個重要的炎癥因子和肌肉生長關鍵基因的表達量。

胸肌方面，研究發(fā)現(xiàn)山麻鴨各密度組炎癥因子TNF-α基因的mRNA 表達量在不同采樣時間點差異均不顯著；IL-6基因的表達量在76 日齡時中密度組比低密度和高密度組高50%以上（P<0.05），96 日齡時表達量整體呈現(xiàn)下降趨勢，但差異不顯著（圖6）。Myod基因的表達量隨飼養(yǎng)時間的增加山麻鴨各密度組間無明顯差異；Myog基因在76 日齡時高密度組的表達量與其他兩組相比增加2 倍以上（P<0.01），在96 日齡時除高密度組外各組表達量均升高，但各組間差異不顯著；Myh1基因在76 日齡時低密度組表達量顯著低于中密度組（P<0.05），96 日齡時高密度組表達量顯著升高（P<0.01），且高密度組比中密度組和低密度組升高2 倍左右；IGF-1基因的表達量在76 日齡時，與低密度組和高密度組相比，高密度組的表達量升高2倍以上（P<0.01），在96 日齡時各組間差異不顯著；在96 日齡時MSTN基因在中、高密度組的表達量較76 日齡時升高，但差異不顯著（圖7）。

圖6 飼養(yǎng)密度對山麻鴨胸肌炎癥因子表達的影響Fig.6 Effects of stocking densities on expression of inflammatory factors in pectoral muscle of Shan Partridge ducks

圖7 飼養(yǎng)密度對山麻鴨胸肌生長關鍵基因表達的影響Fig.7 Effects of stocking densities on expression of key genes in pectoral muscle growth of Shan Partridge ducks

腿肌方面，炎癥因子TNF-α的表達量在不同采樣時間點表現(xiàn)為飼養(yǎng)密度越高，表達量也越高，但各組間均差異不顯著；IL-6基因在96 日齡時中密度組的表達量比低密度組和高密度組分別升高1 倍和2 倍左右（P<0.05）（圖8）。76 日齡時高密度組比中、低密度組Myod基因的表達量升高50%左右（P<0.001），96 日齡時中、高密度組的表達量差異降低到與低密度組相似的水平；Myog基因在不同采樣時間點低密度組和中密度組的表達量差異不大，而高密度組的表達量明顯升高且于其他兩組相比升高3 倍左右P<0.001）；Myh1基因在76 日齡時中密度組表達量顯著低于其他兩組（P<0.01），96 日齡時比76 日齡升高2 倍左右，達到與低、高密度組相似的水平，而低、高密度組隨飼養(yǎng)天數(shù)增加變化不大；IGF-1基因的表達量在76 日齡時各密度組間差異不大，96日齡時中密度組的表達量顯著高于其他兩組（P<0.05）；76 日齡時MSTN基因隨飼養(yǎng)密度增加表達量略有升高，但差異均不顯著（圖9）。結果表明，飼養(yǎng)密度顯著影響山麻鴨炎癥因子和肌肉生長關鍵基因的表達。

圖8 飼養(yǎng)密度對山麻鴨腿肌炎癥因子表達的影響Fig.8 Effects of stocking densities on expression of inflammatory factors in leg muscle of Shan Partridge ducks

圖9 飼養(yǎng)密度對山麻鴨腿肌生長關鍵基因表達的影響Fig.9 Effects of stocking densities on expression of key genes in leg muscle growth of Shan Partridge ducks

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)飼養(yǎng)密度對鴨舍環(huán)境、山麻鴨血液內毒素以及脛骨、胸腿肌生長都有極大影響。飼養(yǎng)密度越高，鴨舍水池水體中的菌落數(shù)越多，水體和血液中的內毒素含量也越高，山麻鴨體重越低，而且較高的飼養(yǎng)密度顯著抑制了山麻鴨脛骨和胸腿肌的生長，對炎癥因子和肌肉生長關鍵基因的表達也產生了顯著影響。

在本研究中，飼養(yǎng)密度的增加使得水體菌落數(shù)和內毒素含量大幅度增加，并導致內毒素在山麻鴨體內積累。由于試驗期所有山麻鴨采食量一致，結合飼養(yǎng)密度越高，山麻鴨體重越低的結果推測，高飼養(yǎng)密度導致飼養(yǎng)環(huán)境污染，可能會通過內毒素在山麻鴨體內積累而導致其體重下降。馮培功等［17］發(fā)現(xiàn)飼養(yǎng)密度過大會造成空氣中氨氣、二氧化碳、硫化氫等有害氣體濃度過高；而籠養(yǎng)肉雞相比于平養(yǎng)肉雞的活動受限，籠養(yǎng)肉雞腿部疾病發(fā)病幾率會增加，進而使肉雞采食量下降，導致籠養(yǎng)肉雞體重低于平養(yǎng)肉雞［18］。此外，在高密度飼養(yǎng)條件下，雞的腳墊損傷和趾部損傷程度也顯著增加［19］。

本研究發(fā)現(xiàn)，較高的飼養(yǎng)密度也顯著降低了96 日齡山麻鴨脛骨骨質和髓質的厚度，這可能是由于較高的飼養(yǎng)密度導致山麻鴨運動強度受到影響，而飼養(yǎng)密度導致的養(yǎng)殖環(huán)境污染也可能影響了山麻鴨對鈣等營養(yǎng)物質的吸收，從而影響了脛骨的發(fā)育。此外，脛骨指標與鴨體重存在正相關關系，因此飼養(yǎng)密度間接導致的脛骨指標下降，可能也是導致山麻鴨體重降低的原因之一。厲秀梅［20］也發(fā)現(xiàn)，高密度組飼養(yǎng)的肉雞脛骨厚度顯著低于低密度組，且抑制了軟骨細胞增殖，不利于脛骨的生長發(fā)育。此外，家禽的活動量減少會引起脛骨軟骨發(fā)育不良導致腿病，在籠養(yǎng)條件下，肉雞容易出現(xiàn)骨骼問題，如骨畸形、骨質疏松癥等，容易導致家禽死亡［19］?，F(xiàn)代育種工作側重于提高肉鴨的體重和飼料轉化率，較少關注鴨的骨骼健康，這種不平衡的選擇導致體重增加和骨骼生長鈣化的不平衡，從而導致肉鴨易出現(xiàn)腹水、呼吸系統(tǒng)疾病和脛骨軟骨發(fā)育不良等問題［21］，以上問題的產生對于鴨的生長性能也有著較大影響。

本研究結果表明，飼養(yǎng)密度的增加對胸腿肌肌纖維密度和直徑均有顯著影響，并且胸腿肌出現(xiàn)相反的趨勢。胸肌中，較高的飼養(yǎng)密度會導致肌纖維密度上升，肌纖維直徑下降；腿肌中，較高的飼養(yǎng)密度導致肌纖維密度下降，肌纖維直徑增加。導致這一現(xiàn)象的原因，一方面是由于胸腿肌生長模式存在一定差異［22］，另一方面，可能是由于飼養(yǎng)密度的增加，導致山麻鴨對營養(yǎng)物質的吸收產生影響，從而影響了胸肌肌纖維肥大的過程，導致肌纖維直徑下降。此外，在小鼠C2C12 細胞中，外源性LPS 可導致肌管顯著變細［23］，而本研究中山麻鴨血液內毒素增加，可能也會導致胸肌肌纖維直徑下降；而腿肌則是山麻鴨運動的主要肌肉群，飼養(yǎng)密度的增加導致山麻鴨覓食等活動產生更強的競爭，使得該飼養(yǎng)環(huán)境下的山麻鴨可能有較高的腿肌運動強度，進而引起其肌纖維直徑增加。與本研究結果類似，殷璐瑤等［24］研究表明，飼養(yǎng)密度對仔鵝的生長發(fā)育有顯著影響，飼養(yǎng)密度的升高導致鵝的體重降低，料重比升高，當飼養(yǎng)密度大于5只/m2時，仔鵝的腿肌率和胸肌率會受影響，此外，鵝出現(xiàn)羽毛質量下降、行走能力變差和免疫機能下降等健康問題。由于胸腿肌生長受到營養(yǎng)、運動和發(fā)育等多方面的影響，因此其對山麻鴨體重的影響還需進一步研究。

在基因表達方面，本研究發(fā)現(xiàn)，飼養(yǎng)密度較高時炎癥因子TNF-α的表達量變化不顯著，但IL-6表達差異顯著，可能是較高的飼養(yǎng)密度導致內毒素在山麻鴨體內積累產生炎癥反應，這與馮培功等［17］發(fā)現(xiàn)的高飼養(yǎng)密度會提高肉鴨體內IL-6 含量的結果相似。此外，山麻鴨的胸腿肌可能也產生了肌肉損傷修復的過程，進而激發(fā)了炎癥因子的表達。有報道顯示，添加適當濃度外源性LPS 會影響體外培養(yǎng)的大鼠骨骼肌肌衛(wèi)星細胞IL-6和TNF-a的表達，并促進其增殖和分化，而肌衛(wèi)星細胞的增殖和分化是肌肉損傷修復的必經環(huán)節(jié)［25］。Myod和IGF-1基因主要參與肌肉發(fā)育前期肌原細胞增殖的過程，Myog和Myh1主要對肌肉分化過程起重要作用，MSTN則起到抑制肌肉發(fā)育的作用。在本研究試驗期，山麻鴨已達到育成期，肌纖維的增殖過程已基本結束，主要進行的是肌纖維肥大的過程，此外由于高密度飼養(yǎng)環(huán)境的影響，山麻鴨體內產生的炎癥可能導致肌肉損傷，加之運動量在不同密度組間存在差異，因此導致部分成肌相關基因的表達與飼養(yǎng)密度的關系仍不太明確，但Myod、Myog和Myh1的表達與飼養(yǎng)密度存在較強的關聯(lián)性。有研究顯示，肌肉損傷可導致Myod、Myog和Myh1基因的顯著上調［26］。因此，我們推測飼養(yǎng)密度可能通過對骨骼肌產生炎癥導致肌肉損傷修復過程增強，并通過運動量的改變引起炎癥因子和肌肉生長關鍵基因表達的改變，最終影響了胸腿肌肌肉的發(fā)育，具體的分子機制還需進一步研究證實。

4 結論

本研究結果表明，飼養(yǎng)密度對鴨舍的養(yǎng)殖環(huán)境以及育成期山麻鴨血液內毒素、體重、脛骨、胸腿肌生長、炎癥因子和肌肉生長關鍵基因的表達都存在極大影響，2.5～5 只/m2的飼養(yǎng)密度對山麻鴨飼養(yǎng)環(huán)境起到改善作用，并有效促進脛骨和胸腿肌的生長。本研究結果為闡明高飼養(yǎng)密度對山麻鴨胸腿肌和脛骨生長的具體影響提供了理論依據(jù)，為今后通過優(yōu)化山麻鴨飼養(yǎng)密度從而提升山麻鴨生長性能提供了有益借鑒。