馬葭葭,張建國(guó),朱雨晴,岑 瑛,楊 敏*
(吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院·吉林吉林·132101)
隨著社會(huì)節(jié)奏的不斷加快、各種壓力不斷增大,大多數(shù)人的身體呈現(xiàn)亞健康狀態(tài)。我國(guó)存在睡眠障礙的人數(shù)超過(guò)3億,成年人的失眠發(fā)生率高達(dá)38.2%,頸椎病患者大約有兩億人,且均呈逐年上升的趨勢(shì),改善睡眠質(zhì)量、緩解頸椎酸痛是現(xiàn)代人面臨的急需解決的問(wèn)題。目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)此類功能綜合性護(hù)頸枕的研究較少,相關(guān)產(chǎn)品市場(chǎng)空白。中藥配方中的藥物平緩,適合芳香療法,天然冰片可開(kāi)竅醒神、抗菌[1],薄荷可清利頭目[2],磁石可鎮(zhèn)靜安神、平肝潛陽(yáng),丁香、艾葉、薄荷均有抗菌、抗炎[3,4,5]的功效。中藥安神助眠按摩護(hù)頸枕實(shí)現(xiàn)了多種功效的結(jié)合,緩解人們的需求,解決了市場(chǎng)中此類產(chǎn)品功效單一的問(wèn)題,將中藥應(yīng)用的形式加以創(chuàng)新,為傳統(tǒng)中藥進(jìn)一步的產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和臨床應(yīng)用提供參考。
天然冰片、丁香、艾葉、薄荷、磁石(購(gòu)于吉林大藥房)。
超聲波提取機(jī)(濟(jì)寧天華超聲電子儀器有限公司,THC);數(shù)顯控溫智能電熱套(力辰科儀)。
2.1.1 揮發(fā)油的制備
天然冰片本是龍腦香的樹(shù)脂和揮發(fā)油中取得的結(jié)晶,不再進(jìn)行提取操作。
藥理實(shí)驗(yàn)中天然冰片混懸液的制備[6]:取天然冰片適量,用研缽研碎,過(guò)100目篩,取過(guò)篩后天然冰片粉末0.5g,向其中加入3%的吐溫-80,超聲30min,使其溶解,然后加入蒸餾水定容至25ml,配制成20mg/ml的天然冰片混懸液,超聲30min,加入揮發(fā)油中。
稱取丁香適量,粉碎,參照文獻(xiàn)[7]進(jìn)行超聲波輔助水蒸氣蒸餾法提取,過(guò)150目篩,按料液比為1∶15加入蒸餾水,超聲波功率為300w,萃取時(shí)間1h。結(jié)果提取丁香揮發(fā)油的平均取得率為18.125%。
稱取艾葉適量,粉碎,參照文獻(xiàn)[8]進(jìn)行水蒸氣蒸餾法提取艾葉中的揮發(fā)油。將艾葉粉末置于1000 ml圓底燒瓶中,按料液比為1∶7加入蒸餾水,冷浸2h后按水蒸汽蒸餾法加熱提取?;亓?h后,分出揮發(fā)油,加入少量無(wú)水硫酸鈉干燥,即得到揮發(fā)油產(chǎn)品。重復(fù)上述操作提取所有艾葉的揮發(fā)油,注意保存。按每克艾葉提取的揮發(fā)油體積(ml)計(jì)算揮發(fā)油提取率為0.79%。稱取薄荷適量,粉碎,參照文獻(xiàn)[9]水蒸氣蒸餾,料液比為1∶9放入500ml三頸燒瓶中,加入適量二次蒸餾水,浸泡一段時(shí)間,浸泡時(shí)間1.5 h,于100℃條件下回流一段時(shí)間,獲得蒸餾液提取時(shí)間3.0 h時(shí)。轉(zhuǎn)入分液漏斗中加入2.0 g氯化鈉促進(jìn)油水分離,靜置24 h,加入適量無(wú)水硫酸鈉對(duì)其進(jìn)行干燥處理,純化后稱重。結(jié)果所得薄荷揮發(fā)油的提取率為1.05%。
2.1.2 中藥香囊的制備
將丁香、艾葉、薄荷的藥粉、揮發(fā)油和天然冰片分裝放入香囊內(nèi)。
將香囊放入護(hù)頸枕內(nèi),把磁石放在對(duì)應(yīng)需要按摩的穴位即風(fēng)池穴、風(fēng)府穴、大椎穴、天柱穴、肩井穴處。
2.2.1 抗疲勞實(shí)驗(yàn)測(cè)定負(fù)重游泳時(shí)間
選取昆明種雄性小鼠40只,日齡40天左右,平均體質(zhì)量(20±5)g。正常喂養(yǎng)小鼠,維持正常自由節(jié)律。
小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組(空白組)10只,試驗(yàn)組30只。將試驗(yàn)組的30只小鼠分為低、中、高(1∶2∶3)香薰用量不同的3組,每組10只。
低、中、高用量組小鼠分別灌胃中藥揮發(fā)油滴鼻液10μL/(只·次)、20μL/(只·次)、30μL/(只·次)(將揮發(fā)油、吐溫-80和蒸餾水以1∶2∶47的比例配成對(duì)應(yīng)的滴鼻液),每天兩次,空白對(duì)照組所用的滴鼻液為生理鹽水,連續(xù)14d。末次給藥30min后,將小鼠尾部負(fù)荷適宜重量的鐵釘,放入長(zhǎng)50寬30高40的水池內(nèi),水溫保持在(27.0±0.5)℃,進(jìn)行負(fù)重游泳[10],記錄小鼠游泳時(shí)間。
2.2.2 凝神入眠效果測(cè)睡眠發(fā)生率
選取昆明種雄性小鼠20只,日齡40天左右,平均體質(zhì)量(20±5)g。正常喂養(yǎng)小鼠,維持正常自由節(jié)律。
小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組(空白組)10只,試驗(yàn)組10只。
熏香處理小鼠,當(dāng)天實(shí)驗(yàn)之前小鼠禁食不進(jìn)水,15點(diǎn)為飼料投放時(shí)間,在投放飼料之后的2 h內(nèi),觀察記錄各組入睡動(dòng)物數(shù),小鼠翻正反射消失達(dá)1 min以上的鼠數(shù)為入睡動(dòng)物數(shù),測(cè)小鼠睡眠發(fā)生率[11]。小鼠睡眠發(fā)生率=每組小鼠入睡只數(shù)/每組小鼠總只數(shù)×100%。
由中藥學(xué)專業(yè)人員組成10人評(píng)定小組,分別使用中藥安神助眠護(hù)頸枕,并就感官感受對(duì)護(hù)頸枕的功效進(jìn)行評(píng)價(jià),評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1。
表1 中藥護(hù)頸枕感官檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)
2.4.1 香味質(zhì)量檢測(cè)
根據(jù)一般人體所占空間的大小,應(yīng)于護(hù)頸枕周?chē)?5cm內(nèi)可聞到護(hù)頸枕的香味。
2.4.2 穴位檢測(cè)
磁石在護(hù)頸枕上的位置對(duì)應(yīng)人體穴位,可起到按摩磁療的作用。
經(jīng)檢測(cè),在人體頭部周?chē)线m的范圍內(nèi)散有護(hù)頸枕的香味,磁石放置位置準(zhǔn)確貼合人體穴位,符合護(hù)頸枕質(zhì)量檢測(cè)要求。
3.2.1 抗疲勞實(shí)驗(yàn)測(cè)定負(fù)重游泳時(shí)間結(jié)果與分析
不同用量組對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響如表2所示。
表2 不同用量組對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響(n=10,±S)
表2 不同用量組對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響(n=10,±S)
組別 游泳時(shí)間/s空白對(duì)照組 78.05±13.03a低用量組 91.45±10.23a中用量組 109.05±12.67b高用量組 145.86±24.90c
從表2可以看出,與空白組比較,不同用量的組別都能延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間。與空白對(duì)照組相比,低用量組延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間差異不顯著(P>0.05),中用量組和高用量組延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間差異顯著(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,不同用量組均能延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間,且高用量時(shí)效果最好。所以中藥提取揮發(fā)油具有一定的抗疲勞效果,且其抗疲勞效果隨揮發(fā)油使用量的增加而逐漸顯著。
3.2.2 凝神入眠實(shí)驗(yàn)測(cè)定小鼠睡眠發(fā)生率結(jié)果與分析小鼠睡眠數(shù)量及睡眠發(fā)生率如表3所示。
表3 小鼠睡眠數(shù)量及睡眠發(fā)生率(n=10,±S)
表3 小鼠睡眠數(shù)量及睡眠發(fā)生率(n=10,±S)
組別 睡眠發(fā)生率/% 12h睡眠時(shí)間/min空白對(duì)照組 30 233.88±23.74a低用量組 30 255.36±29.48b中用量組 60 298.64±25.34c高用量組 70 353.37±27.36d
從表3可以看出,與空白組比較,不同用量的組都能延長(zhǎng)小鼠的睡眠時(shí)間,中、高用量組能顯著提高小鼠睡眠發(fā)生率。與空白對(duì)照組相比,低用量組、中用量組以及高用量組延長(zhǎng)小鼠睡眠時(shí)間差異顯著(P<0.05),且睡眠延長(zhǎng)率分別為17.17%、39.72%、86.88%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,不同用量組均能延長(zhǎng)小鼠睡眠時(shí)間,且高用量時(shí)效果最好。所以中藥提取揮發(fā)油具有一定的安神助眠效果,且隨揮發(fā)油使用量增加而增高。
中藥學(xué)專業(yè)人員對(duì)中藥護(hù)頸枕感官檢測(cè)結(jié)果如表4所示。
表4 中藥護(hù)頸枕感官檢測(cè)結(jié)果(n=10,±S)
表4 中藥護(hù)頸枕感官檢測(cè)結(jié)果(n=10,±S)
組別 分?jǐn)?shù)/分安神助眠 24.6±2.07抗疲勞 23.9±1.20舒適度 34.2±1.60總分?jǐn)?shù) 82.7±3.30
感官檢測(cè)結(jié)果表明,中藥護(hù)頸枕的安神助眠、抗疲勞功效及舒適度都表現(xiàn)良好。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)白芷淀粉含量過(guò)高,難以提取,所以本品中去除白芷。另,由于運(yùn)動(dòng)方式的限制、不便于批量操作[12]、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)誤差較大,所以去除小鼠抗疲勞爬桿實(shí)驗(yàn)。