劉禹彤，王金瑋，劉琳琳，李鑫磊，蔡佳雨，劉悅昊，竇德強(qiáng)*

(遼寧中醫(yī)藥大學(xué)·遼寧大連·116600)

鹿血為鹿科動(dòng)物梅花鹿的血液?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明鹿血中含有豐富的蛋白質(zhì)、游離脂肪酸、固醇、磷脂、激素、維生素和多糖等，具有益精血、補(bǔ)陽氣、止血、補(bǔ)充營養(yǎng)、提高免疫力防病保健等功效。目前市場(chǎng)上多以藥酒的形式使用，其腥味往往不利于人們使用。本產(chǎn)品以紅參和鹿血為主，輔以具有補(bǔ)氣、滋陰的藥食兩用中藥人參、枸杞子等制成具有補(bǔ)益作用的紅參鹿血片。其口感較好，方便服用，易于被消費(fèi)者接受。

1 材料與方法

1.1 材料

鹿血（遼寧鹿滋堂生物科技有限公司)；紅參、枸杞子、薏苡仁、甘草（河北安國中藥材交易市場(chǎng))；乳糖(河南萬邦實(shí)業(yè)有限公司)；羧甲基纖維素鈉(河南萬邦實(shí)業(yè)有限公司)；硬脂酸鎂(河南萬邦實(shí)業(yè)有限公司)。

1.2 加工工藝流程及要點(diǎn)

1.2.1 制備工藝

將（紅參、枸杞子、甘草）制成干浸膏,薏苡仁、鹿血研成細(xì)粉→加羧甲基淀粉鈉混合均勻→加適量70%乙醇溶液制粒（14目篩）→干燥→整?！尤胗仓徭V，混合均勻→壓片，包薄膜衣，即得。紅參鹿血補(bǔ)益片成分，詳見表1。

表1 紅參鹿血補(bǔ)益片的成分

1.2.2 干浸膏制作方法

枸杞子300g、山藥700g、甘草100g，加5倍量水浸泡12h后文火煎煮提取兩次，第一次提取2 h，濾布過濾，第二次（5倍量水）提取1h，濾布過濾，合并兩次上清液作為水煎液，濃縮至掛旗后放入65℃真空干燥箱干燥24h即得干浸膏(收率25%)。

1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3.1 單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

以鹿血粉50g、薏苡仁10g、乳糖50g、羧甲基纖維素鈉12g,干浸膏分別為100、150、200、250、300g、以感官評(píng)分、崩解時(shí)間為評(píng)價(jià)指標(biāo)，研究干浸膏添加量對(duì)紅參鹿血補(bǔ)益片品質(zhì)的影響。

以干浸膏100g、薏苡仁10g、乳糖50g、羧甲基纖維素鈉12g,鹿血粉分別為50、100、150、200、250g、以感官評(píng)分、崩解時(shí)間為評(píng)價(jià)指標(biāo)，研究鹿血粉添加量對(duì)紅參鹿血補(bǔ)益片品質(zhì)的影響。

以干浸膏100g、鹿血粉50g、乳糖50g、羧甲基纖維素鈉12g,薏苡仁分別為10、20、30、40、50g、以感官評(píng)分、崩解時(shí)間為評(píng)價(jià)指標(biāo)，研究薏苡仁添加量對(duì)紅參鹿血補(bǔ)益片品質(zhì)的影響。

以干浸膏100g、鹿血粉50g、薏苡仁10g、羧甲基纖維素鈉12g,乳糖分別為50、100、150、200、250g、以感官評(píng)分、崩解時(shí)間為評(píng)價(jià)指標(biāo)，研究乳糖添加量對(duì)紅參鹿血補(bǔ)益片品質(zhì)的影響。

以干浸膏100g、鹿血粉50g、薏苡仁10g、乳糖50g,羧甲基纖維素鈉分別為12、18、24、30、36g、以感官評(píng)分、崩解時(shí)間為評(píng)價(jià)指標(biāo)，研究羧甲基纖維素鈉添加量對(duì)紅參鹿血補(bǔ)益片品質(zhì)的影響。

1.3.2 響應(yīng)面優(yōu)化法

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選擇干浸膏、乳糖、羧甲基纖維素鈉添加量3個(gè)因素，利用Design Expert 8.0.6軟件設(shè)計(jì)三因素三水平響應(yīng)面試驗(yàn)。響應(yīng)面分析因素與水平設(shè)計(jì)見表2。

表2 響應(yīng)面分析因素與水平設(shè)計(jì)

1.4 感官評(píng)定方法

隨機(jī)挑選10名味覺嗅覺靈敏的人員組成測(cè)評(píng)小組，對(duì)紅參鹿血補(bǔ)益片進(jìn)行感官評(píng)定并用崩解儀測(cè)定崩解時(shí)間，評(píng)定的指標(biāo)包括產(chǎn)品色澤（20分）、氣味（20分）、口感（30分）、崩解時(shí)間（30分），總分100分，取評(píng)分的平均值作為最終得分，詳見表3。

表3 紅參鹿血補(bǔ)益片的感官評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

由圖1可知，材料加入量分別為干浸膏250g、鹿血粉100g、薏苡仁30g、乳糖100g、羧甲基纖維素鈉24g時(shí)，口感較好、崩解時(shí)間適宜。

圖1 不同材料加入量對(duì)紅參鹿血補(bǔ)益片的影響

2.2 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

在單因素試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上，依據(jù)Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，以感官評(píng)價(jià)為響應(yīng)值，利用Design-Expert.V8.0.6軟件對(duì)干浸膏、乳糖和羧甲基纖維素鈉加入量三因素設(shè)計(jì)響應(yīng)面法。響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果見表4。

表4 Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

2.3 響應(yīng)因子顯著性分析及方程擬合效果分析

由表5可以看出，模型P值小于0.001，說明該模型極顯著。失擬項(xiàng)P值為0.0564，大于0.05，不顯著，說明該回歸模型與實(shí)際試驗(yàn)有較好擬合性，自變量與感官評(píng)分之間關(guān)系顯著。

表5 響應(yīng)面試驗(yàn)回歸模型方差分析

分析三維響應(yīng)面圖,如圖2A，當(dāng)羧甲基纖維素鈉加入量處于最佳水平時(shí)，固定干浸膏添加量，隨著乳糖加入量的增多，感官評(píng)分呈先增加后減少趨勢(shì)，其增加幅度較明顯；固定乳糖添加量，隨著干浸膏添加量的增加，感官評(píng)分呈先增加后降低趨勢(shì)，趨勢(shì)較為明顯。此時(shí)，干浸膏和乳糖的添加量都有一個(gè)優(yōu)值，且兩個(gè)添加量的優(yōu)值相近，可形成交互作用從而取出最優(yōu)點(diǎn)。如圖2B，當(dāng)乳糖加入量處于最佳水平時(shí)，固定羧甲基纖維素鈉添加量，隨著干浸膏加入量的增多，感官評(píng)分呈先增加后減少趨勢(shì)，其增加幅度較明顯；固定干浸膏添加量，隨著羧甲基纖維素鈉添加量的增加，感官評(píng)分呈先增加后降低趨勢(shì)，趨勢(shì)較為明顯。此時(shí)，干浸膏和羧甲基纖維素鈉的添加量都有一個(gè)優(yōu)值，且兩個(gè)添加量的優(yōu)值相近，可形成交互作用從而取出最優(yōu)點(diǎn)。如圖2C，當(dāng)干浸膏加入量處于最佳水平時(shí)，固定乳糖添加量，隨著羧甲基纖維素鈉加入量的增多，感官評(píng)分呈先增加后減少趨勢(shì)，其增加幅度較明顯；固定羧甲基纖維素鈉添加量，隨著乳糖添加量的增加，感官評(píng)分呈先增加后降低趨勢(shì)，趨勢(shì)較為明顯。此時(shí)，乳糖和羧甲基纖維素鈉的添加量都有一個(gè)優(yōu)值，且兩個(gè)添加量的優(yōu)值相近，可形成交互作用從而取出最優(yōu)點(diǎn)。

圖2 鹿血補(bǔ)益片感官評(píng)分影響的響應(yīng)面

2.4 響應(yīng)面試驗(yàn)?zāi)Ｐ偷尿?yàn)證

經(jīng)Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)，Design Expert軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理到制備紅參鹿血補(bǔ)益片的最優(yōu)工藝參數(shù)為：干浸膏的添加量為252g，乳糖的添加量為103g，羧甲基纖維素鈉的添加量為23.6g。在此條件下，獲得的紅參鹿血補(bǔ)益片感官評(píng)分為82。為實(shí)際操作方便更正為干浸膏的添加量為250g，乳糖的添加量為100g，羧甲基纖維素鈉的添加量為24g。

2.5 組方論證

鹿血在《本草綱目》有如下記載，“主陽痿、補(bǔ)腎，止腰痛，跌傷，狂犬傷，和酒服治肺痿吐血及崩中帶下，諸氣痛欲危者飲之立愈。大補(bǔ)虛損，益精血，解痘毒、藥毒”。大量試驗(yàn)證明，鹿血具有抗衰老、補(bǔ)血、促進(jìn)代謝、增強(qiáng)自身免疫力和抗疲勞等作用，被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥行業(yè)。紅參為人參經(jīng)蒸制后的干燥根和根莖，具有大補(bǔ)元?dú)?，?fù)脈固脫，益氣攝血的功效。具有抗糖尿病、抗腫瘤、抗衰老、抗氧化、抗疲勞等作用[1]。枸杞（Lycium barbarum），屬茄科多年生落葉灌木，味甘、性平。歸肝、腎經(jīng)。具有滋補(bǔ)肝腎、益精明目之功。枸杞植物（Lycium plant）的果實(shí)為枸杞子，是我國一味傳統(tǒng)的常用中藥。枸杞（Wolfberry fruit）又名枸蹄子、西枸杞、枸杞紅實(shí)、甜菜子等。其化學(xué)成分主要包括多糖類、維生素、色素、脂肪類、生物堿類、黃酮類、氨基酸和礦質(zhì)元素等。具有抗癌、抗氧化、增強(qiáng)免疫力、肝保護(hù)、神經(jīng)保護(hù)、抗炎等藥理作用[2-3]。薏苡仁為禾本科植物薏苡Coix lacryma-jobiL.var.Mayuen(Roman.)Stapf的干燥成熟種仁。薏苡仁具有利水滲濕，健脾，止瀉，除痹排膿，解毒散結(jié)的功效?，F(xiàn)代藥理研究表明，薏苡仁具有抗腫瘤、抗炎鎮(zhèn)痛、降血糖、降血壓和提高機(jī)體免疫力等多種藥理活性；臨床上也證實(shí)了其藥理活性的作用，特別是在宮頸癌、肺癌和消化道腫瘤中的治療[4]。甘草性平味甘,歸脾、胃、心、肺經(jīng),為臨床常用藥,具有補(bǔ)中益氣、潤肺止咳、清熱解毒、緩急止痛、調(diào)和諸藥之功。甘草提取物主要活性成分包括甘草皂苷類的甘草皂苷、甘草酸、甘草次酸,甘草黃酮類的甘草總黃酮、甘草苷、異甘草素、光甘草定,以及甘草多糖。其具有抗腫瘤、抗炎殺菌、抗病毒、保肝、抗心肌缺血、抗纖維化等藥理作用[5]。

3 結(jié)論

最佳工藝為鹿血粉150g、枸杞子188g、紅參188g、甘草63g、薏苡仁粉30g。方中鹿血補(bǔ)虛和血，枸杞子滋補(bǔ)肝腎，調(diào)和陰陽，取“陰中求陽”之義，于是可以“陰平陽秘”。薏苡仁健脾，紅參大補(bǔ)元?dú)鈹y薏苡仁使藥引津氣四迄，則周身之機(jī)運(yùn)流通，水谷精微敷布，且薏苡仁滲利濕熱，脾和相濟(jì)，不燥不寒。甘草調(diào)和陰陽，調(diào)和脾腎，調(diào)和補(bǔ)瀉，調(diào)和諸藥。諸藥相伍，補(bǔ)而不滯，溫而不燥。